大脳皮質内に部位差を形成する新たなメカニズムの発生工学的手法を用いた解析

利用发育工程方法分析大脑皮层形成区域差异的新机制

• 批准号: 11780545
• 负责人: 永野 隆
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: 福井医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11780545/
• 关键词: 大脳皮質; 細胞移動; Filamin 1; 遺伝子クローニング; 前後軸; 部位差

発生期の大脳皮質で一過性に強い発現を示す新規遺伝子として研究代表者らが同定した遺伝子の一つ(便宜的に「KI遺伝子」と称する)は、発現強度に前後軸に沿う部位差がみられた。本研究はこの遺伝子の解析を通じて大脳皮質に部位差が形成されるメカニズムを明らかにしようとするものである。その後の研究により、このKI遺伝子産物は大脳皮質形成時の細胞移動に必須のアクチン結合蛋白質Filamin 1に結合しその分解を促進することによって細胞移動を負に制御する新たな因子であることが示唆された。本研究は追加で採択が決定されたために研究開始が半年以上遅れたが11年度にはKI遺伝子産物に対する抗体作成に着手しており、12年度は引き続き抗体作成を完了するとともにそれを用いて遺伝子産物の解析を行った。その結果、当抗体によるウエスタン解析によりKI遺伝子産物にはこれまでから予想されていた蛋白質に加え、altemative splicingにより生ずると考えられるもう1つの分子種が存在すること、大脳皮質における遺伝子発現は胎生後期には減弱するのに対し遺伝子産物は生後数日の間検出されること、発生途中の大脳皮質では新たに同定されたKI遺伝子産物が以前から予想されていたものに比べて量的に優位に存在していることが明らかになった。さらに新たに同定された遺伝子産物に対応する遺伝子を単離し機能を検討したところFilamin 1の分解を誘導する活性がより大きく、その存在量と合わせ大脳皮質内では新たに同定された遺伝子産物が主に機能していることが示唆された。現在、KI遺伝子産物の組織分布にも部位差が見られるかを解析するため、作成した抗体を用いた免疫組織化学染色法を検討中である。

During the development period, the large cortex showed transient and strong appearance of new gene, and the representative of the study found that the same gene was found in the same gene (cheap gene), but the appearance intensity was different along the anterior axis. This study is aimed at analyzing the differences in the distribution of these genes, and at identifying the differences in the distribution of these genes in the cortex. These KI gene products are essential for cell migration during cortical formation, and are shown to be novel factors that promote the binding and decomposition of Filamin 1, a protein that negatively controls cell migration. This study was conducted more than half a year after the start of the study, and the preparation of antibodies against KI gene products was completed in 2012. The results showed that when the antibody was analyzed, the KI gene product was detected several days after birth, and the protein was added, and the altemative splicing was detected. In the process of development, the new cortex is stable and the KI gene product is different from the previous one. In addition, the new and stable gene product is related to the gene function, and the decomposition of Filamin 1 is induced. The activity of Filamin 1 is related to the gene function. Now, the tissue distribution of KI gene products is different from that of other tissues, and antibody production is studied by immunohistochemical staining.