植物病原ウイルスの多粒子性DNAゲノムの機能解析と診断法の確立

植物病原病毒多颗粒DNA基因组功能分析及诊断方法建立

• 批准号: 12760032
• 负责人: 佐野 義孝
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kyoto Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12760032/
• 关键词: 植物保護; DNAウイルス; 分節ゲノム; 植物DNAウイルス; マルチパータイト・ゲノム

レンゲ萎縮ウイルス(MDV)は複数の環状1本鎖DNAからなる多粒子性ゲノムを持つ植物ウイルスで、その遺伝情報は11種類のDNAセグメント(C1-C11)上に個別にコードされている。本研究は、MDVの多粒子性ゲノム機能を解析することにより、ウイルス感染・増殖に必須のDNAセグメントを同定し、あわせて信頼性の高い診断技術を確立することを目的とする。平成12年度には、2種のMDV-DNAクローン(C9,C11)を用いたトランジェントな植物組織片感染試験により、一過性のDNA複製がおこることを確認し、さらにC11が自身のDNA複製のみでなく他のDNAセグメントの複製にも必須の複製開始タンパク(Master-Rep)をコードすることを明らかにした。平成13年度においても、同様な系を用いて遺伝子導入を試みたが、すべてのDNAセグメントを用いた完全なウイルスゲノムの複製は認められていない。この原因として、用いたDNAセグメントの全てが同一の細胞核へ導入され難い可能性が考えられた。診断法の開発では、抗体作製のためにC9遺伝子を発現ベクターに組み込み、MDV外被タンパクの産生を確認したが、発現細胞中で不溶化することが判明した。今後目的遺伝子領域を断片化し発現させる必要があると思われる。一方、日本各地で発生したMDV感染株の診断をすすめる過程で、特定のMDV分離株中に新たなゲノムDNA(C12)が含まれることが判明した。このことはMDVの進化・来歴を考察するうえで重要な意義を持つと思われる(論文準備中)。以上、当初めざしたウイルスDNA導入による完全なウイルス増殖系の確立には至らなかったが、ウイルスゲノムの中でDNA複製の中心的役割を果たすC11を同定し、さらに新たな遺伝子(C12)を発見したことは大きな成果であり、今後の研究遂行する上で貴重な知見が得られたと思われる。

レンゲ shrinkage ウイルス (MDV) は plural ring 1 lock DNA からなる multi-particulate ゲノムをhold つ plant ウイルThere are 11 types of DNA セセグメント (C1-C11) on the individual にコードされている. This study is necessary to analyze the multi-particle function of MDV and its infection and reproduction.のDNAセグメントを同定し、あわせて信格性の高いDiagnostic technologyをEstablishmentすることをpurposeとする. In 2012, two kinds of MDV-DNA クローン (C9, C11) were used. Plant tissue slice infection test, transient DNA replication confirmation , さらにC11's own DNA copying and other DNA copying mustをコードすることを明らかにした. In 2013, the においても and the same 様な system were introduced with the いて缝子 and tested the みたが and すべてのDNA セグメントを use いたcomplete なウイルスゲノムのreplication は recognized められていない. Because of the reason, it is difficult to introduce the same cell nucleus using DNA, and it is difficult and possible to test it. Diagnostic method, antibody production method, C9 legacy test method, antibody production method, M The production of DV epithelium was confirmed and the insolubilization in the cells was confirmed. In the future, it is necessary to fragment the remaining sub-fields and make them appear necessary. On the one hand, the diagnosis process of MDV infection strains produced in various places in Japan has been carried out, and the new DNA (C12) contained in the specific MDV isolates has been confirmed.このことはMDVのevolution・Come to 歴をinvestigate the importance of するうえでな思つと思われる(thesis is being prepared). Above, it is true that the original DNA introduced into the めざしたウイルスによる completely なウイルス reproductive system The fruit of the establishment of the center of DNA replication in the らなかったが and ウイルスゲノムの中でDNA replication centersたすC11を同定し、さらに新たな伝子(C12)を発见したことは大きIt is important to realize the results and carry out future research.

项目成果

中村茂雄: "宮城県のソラマメ栽培におけるウイルス病の発生実態"宮城県農業センター研究報告. 67. 21-29 (2000)

Shigeo Nakamura：“宫城县蚕豆种植中病毒病爆发的现状”宫城县农业中心研究报告 67. 21-29 (2000)。

M.H.V.van Regenmortel: "Virus Taxonomy"Academic Press. 1162 (2000)

M.H.V.van Regenmortel：《病毒分类学》学术出版社。

Randles, J. W: "Genus Nanovirus. In"Virus Taxonomy, Seventh report of the International Committee on Taxonomy of Viruses""Academic Press. 1162 (2000)

Randles, J. W：“纳米病毒属。载于《病毒分类学，国际病毒分类委员会第七次报告》”学术出版社。

Timchenko, T: "The master rep concept in nanovirus replication : Identification of missing genome components and potential for natural genetic reassortment"Virology. 274. 189-195 (2000)

Timchenko, T：“纳米病毒复制的主要代表概念：识别缺失的基因组成分和自然遗传重配的潜力”病毒学。

Tatiana Timchenko: "The master Rep concept in Nanovirus replication : Identification of missing genome components and potential for natural genetic reassortment."Virology. 274. 189-195 (2000)

Tatiana Timchenko：“纳米病毒复制中的主代表概念：识别缺失的基因组成分和自然遗传重配的潜力。”病毒学。