B19パルボウイルス(ヒトDNAウイルス)による造血障害の遺伝子解析

B19细小病毒（人类DNA病毒）引起的造血系统疾病的遗传分析

• 批准号: 01570672
• 负责人: 小澤 敬也
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01570672/
• 关键词: B19パルボウイルス; 造血障害; ウイルス非構造蛋白; JK-1細胞; 組織特異性; 細胞障害作用

B19パルボウイルスは、溶血性貧血の患者に感染して急性の骨髄抑制(acute aplastic crisis)を起こすだけでなく、免疫能の低下した患者では慢性骨髄不全を引き起こすことが明らかとなり注目されている。我々は、このB19ウイルスの遺伝子産物のうち、ウイルス非構造(NS)蛋白が細胞障害の原因であることを既に明らかにしているが、本研究ではさらに、このNS蛋白発現プラスミドのミュ-タントを多数構築し、DNAトランスフェクションにより細胞内へ導入し、各プラスミドの細胞障害作用の有無を調べた。その結果、NS蛋白のC末端が20%除去された程度では細胞障害作用に影響がなく、40%除去するとその作用を失ったことから、NS蛋白の活性ドメインの部位が限定されてきた。また、NS蛋白発現誘導実験に関しては、当初メタロチオネイン・プロモ-タ-を用いたプラスミドの構築を行ったが、誘導物質により細胞障害が惹起されるような細胞クロ-ンは得られなかった。そこで次に、顆粒球コロニ-刺激因子(G-CSF)のプロモ-タ-と誘導物質としてインタ-ロイキン1(IL-1)を用いた同様の実験を行っている。第3に、B19ウイルスのinvitroでの増殖を支持する株化培養細胞はこれまで知られていなかったが、今回、赤血球系への分化傾向の強いJK-1という赤芽球系細胞株を用いると、B19ウイルスの複製が起こることを明らかにした。このJK-1細胞は、B19ウイルスの細胞特異性や細胞障害作用の遺伝子解析を進めていく上で極めて有用と考えられ、この細胞におけるB19ウィルスの増殖動態に関する詳細な検討を行った。以上、B19ウイルスによる造血障害の研究は、多少の計画変更はあったものの、着実な進展がみられた。

B19 パ ル ボ ウ イ ル ス は, hemolytic anemia, の し に infection in patients with acute の て bone marrow inhibition (acute aplastic crisis) を up こ す だ け で な く, immune to low の し た patients で は chronic bone marrow insufficiency を lead き up こ す こ と が Ming ら か と な り attention さ れ て い る. I 々 は, こ の B19 ウ イ ル ス の heritage 伝 zi chan content の う ち, ウ イ ル ス non-structural protein (NS) が cells handicap of の reason で あ る こ と を both に Ming ら か に し て い る が, this study で は さ ら に, こ の NS protein 発 now プ ラ ス ミ ド の ミ ュ - タ ン ト を most build し, DNA ト ラ ン ス フ ェ ク シ ョ ン に よ り へ import in the cell Youdaoplaceholder0, each プラス, プラス, ド, <s:1>, whether there is a を regulation べた of the obstructive effect of <s:1> cells. そ の results, NS protein の C terminal が 20% remove さ れ た degree で は cells handicap に influence が な く, 40% to remove す る と そ の role を lost っ た こ と か ら, NS protein の active ド メ イ ン の parts が qualified さ れ て き た. ま た, NS protein induced 発 now be 験 に masato し て は, original メ タ ロ チ オ ネ イ ン · プ ロ モ タ - を with い た プ ラ ス ミ ド の line build を っ た が, inductive substance に よ り cells handicap of が provoked さ れ る よ う な cells ク ロ - ン は have ら れ な か っ た. そ こ で に, particle ball コ ロ ニ - stimulating factor (g-csf) の プ ロ モ タ - と inductive substance と し て イ ン タ - ロ イ キ ン 1 (IL 1) を い た with others の be 験 を line っ て い る. に, 3 B19 ウ イ ル ス の invitro で の raised colonization を support す る strains the culture cell は こ れ ま で know ら れ て い な か っ た が, today back, red blood cell is へ の differentiation tendency strong の い JK - 1 と い う red cell lines を gemmule department with い る と, B19 ウ イ ル ス の copy が up こ る こ と を Ming ら か に し た. こ の JK - 1 cell は, B19 ウ イ ル ス の cells specificity や handicap of role の heritage 伝 son parsing を into め て い で extremely on く め て useful と exam え ら れ, こ の cells に お け る B19 ウ ィ ル ス の raised colonization dynamics に masato す る detailed な 検 line for を っ た. The above is the research on hematopoietic disorders of B19ウ and スによる スによる, the number of plans to be updated, and the actual な progress がみられた.

项目成果

Akira Okano: "In vitro expansion of the murine pluripotent hemopoietic stem cell population in response to interleukin 3 and interleukin 6.Application to bone marrow transplantation." Transplant.48. 495-498 (1989)

Akira Okano：“响应白细胞介素 3 和白细胞介素 6 的小鼠多能造血干细胞群的体外扩增。在骨髓移植中的应用。”

Terumasa Tsuchiya: "Multi-copy introduction and high-level expression of interleukin-3genes by retroviral vector superinfection" Biochem.Biophys.Res.Commun.158. 576-583 (1989)

Terumasa Tsuchiya：“通过逆转录病毒载体重复感染实现白细胞介素 3 基因的多拷贝引入和高水平表达”Biochem.Biophys.Res.Commun.158。

Kenzaburo Tani: "A Stu I polymorphism in the human granulocyte colony-stimulating factor gene." Nucl.Acid Res.17. 17 (1989)

Kenzaburo Tani：“人类粒细胞集落刺激因子基因中的 S​​tu I 多态性。”

Takeshi Takahashi: "Susceptibility of human erythropoietic cells to B19 parvovirus in vitro increases with differentiation." Blood. 75. inpress (1990)

Takeshi Takahashi：“人红细胞生成细胞在体外对 B19 细小病毒的敏感性随着分化而增加。”

Takeshi Takahashi: "B19 parvovirus replicates in erythroid leukemia cells in vitro." J.Infect.Dis.160. 548-549 (1989)

Takeshi Takahashi：“B19 细小病毒在体外红系白血病细胞中复制。”