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SOX9の遺伝子導入による軟骨分化誘導

通过SOX9基因导入诱导软骨分化

基本信息

批准号：
13877240
负责人：
石黒直樹
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

軟骨はマトリックスに富むため、軟骨細胞を得て培養するには多量の軟骨組織を必要とする。軟骨組織のドナーサイトは限られているため、軟骨再生医療実現には未分化細胞から軟骨細胞の分化誘導が必要であると考え本実験を計画した。マウス骨髄細胞を使用してマウスSOX9 cDNAを発現ベクターに組み込み、リポフェクション法によりそれを培養骨髄細胞に導入し、SOX9蛋白を過剰に発現させることにより軟骨細胞へ分化促進を目的として検討した。高密度培養によりトルイジンブルー陽性、II型コラーゲン陽性の軟骨組織を得ることができた。次いで、培養系で分化させた軟骨細胞を半透膜チェンバーに封入後ヌードマウス皮下に移植し、in vivoでの軟骨組織形成が起こることを確認した(特許申請中)。現在、ウサギ関節軟骨欠損モデルにて動物実験中であるが、対照群と比較して良好な関節軟骨形成を確認している。今後は実用化に向けて安全性試験を繰り返す予定である。骨髄細胞は容易に大量採取が可能な点と、組織内にchondroprogenitor cellが存在することから軟骨再生におけるドナー組織として適している。また、遺伝子導入法としてのリポフェクション法は毒性が少ない。これらのことから本研究は、変形性関節症などの損傷軟骨に対するtissue engineeringを用いた新しい補助治療法としての臨床応用が期待できる。Scaffoldとの組み合わせを実用化に向けて検討予定である。

The cartilage is rich and the cartilage cells are cultured. A large amount of cartilage tissue is necessary. Cartilage tissue のドナーサイトはlimited られているため, cartilage regeneration medical treatment には undifferentiated cells からchondrocyte のdifferentiation induction がであると考え本実験を plan した. MASUS bone marrow cells use SOX9 Introduction of cDNA using the ベクターにgroup み込み, リポフェクション method によりそれを cultured bone marrow cellsし, SOX9 protein is used to promote the differentiation of chondrocytes.高密度培養によりトルイジンブルー陽性、II型コラーゲン陽性の軟骨組織を得ることができた。 Secondary, cultured differentiated chondrocytes, semi-permeable membrane, sealed, and subcutaneous transplantation, in The formation of cartilage tissue in vivo has been confirmed (patent application pending). Now, the joint cartilage deficiency of the joint is confirmed by the animal 実験中であるが, and the group is compared and the joint cartilage formation of the joint is confirmed. In the future, the safety test of chemical products will be carried out in advance. Bone cartilage cells are easy to collect and can be collected in large quantities. Chondroprogenitor cells are present in the tissue and are suitable for cartilage regeneration.また、The method of introducing the remaining vines is the same as the としてのリポフェクション method and the toxicity is low. The purpose of this study is to use a new auxiliary treatment method for deformed joint disease to damage cartilage and tissue engineering and to apply it clinically and to look forward to it. Scaffold's group, the combination of the two, uses the chemical to ask for the predetermined one.