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複合組織移植を目的とした骨、軟骨、筋肉組織保存法及び再潅流障害防止法の研究

复合组织移植中骨、软骨、肌肉组织保存方法及再灌注损伤预防方法研究

基本信息

批准号：
06671451
负责人：
石黒直樹
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06671451/
关键词：
HPLC 虚血再潅流障害組織保存筋肉 ATP

项目摘要

ラット後肢温阻血モデルを用い、各種のfree radical scavengerを投与した群とその対照群にテトラサイクリン、カルセインで二重ラベリングした後、下腿骨を採取しマイクログラインディングマシンを用いて硬組織標本を作製した。脱灰標本は光学顕微鏡、電子顕微鏡で組織学的にポイントカウンテイング法を用いてエンプテイーラクネ、骨芽細胞数などを検討。硬組織標本ではラベリングを骨形態計測法にて分析し、蛍光顕微鏡にて撮影した写真をデジタイザーで処理して新生骨の面積を計算し骨の横軸方向の成長を検討した。成長軟骨のviabilityも同様な方法で評価した。骨の抗酸化剤使用による温阻血の保存可能時間の延長が可能性であることを証明した。同時に保存液による冷阻血保存を検討する目的でラット後肢同系複合組織移植モデルを用いて、保存液に生理食塩水、Eurocollins液、UW solutionを用い冷保存(4℃)した。保存時間を6時間、9時間、12時間、18時間で行ない、再接着後2週間を経て、筋組織を採取。筋組織のviabilityの指標としてHPLCを用いてATP,ADP,AMPを測定しこれにより保存可能時間を比較し、筋組織についての最適単純浸漬によるエネルギー面より考えた保存条件を求た。ラット後肢複合組織移植モデルでUWsolution、EuroCollins液を用いて冷保存(4℃)を24時間、36時間、48時間、72時間保存で行ない、再接着モデルを作成する。テトラサイクリン、カルセインで二重ラベリングした後、下腿骨を採取し骨組織の脱灰標本及び硬組織標本を作製、これを光学顕微鏡、電子顕微鏡で組織学的に検討した。また硬組織標本では骨形態計測にて分析し骨の成長を機能的に検討し、成長軟骨のviabilityを評価し骨の室温での保存可能時間を明らかとした。温阻血モデルで各種坑酸化剤、トロンボキサンA2合成阻害剤等を用い、再潅流障害を防止することによっての筋肉組織の回復過程を検討した。

In addition to the above, it is also necessary to use a variety of free radical scavenger to control the hard tissue of the lower leg bone. The deashing process was studied by optical microscopy and electron microscopy. The bone morphology measurement method for hard tissue analysis, optical microscopy, imaging, processing, calculation of the area of new bone, and growth analysis in the transverse direction of bone The viability of growing cartilage is evaluated in the same way. The possibility of prolonging the preservation time of bone anti-acidification agent with temperature resistance is proved. At the same time, the preservation solution was used for cold blood resistance preservation. For the purpose of cold blood resistance preservation, the hind limb homologous composite tissue transplantation was used for cold preservation (4℃). The preservation solution was physiological water, Eurocollins solution and UW solution. Storage time: 6 hours, 9 hours, 12 hours, 18 hours, and then 2 weeks after storage, tendon tissue collection. Tendon tissue viability indicators were determined by HPLC using ATP,ADP,AMP, and storage time was compared. Tendon tissue viability indicators were determined by HPLC using ATP, ADP, AMP, and storage conditions were determined. After transplantation of hindlimb composite tissue, UW solution and EuroCollins solution were used for cold preservation (4℃) for 24, 36, 48, and 72 hours, respectively, and then prepared. The bone tissue of the lower leg was taken from the bone and the hard tissue was examined histologically by optical microscopy and electronic microscopy. Bone morphology analysis, bone growth function evaluation, growth cartilage viability evaluation, and possible preservation time at room temperature are also discussed. To investigate the recovery process of muscle tissue from various corrosion inhibitors, corrosion inhibitors, and reflow inhibitors.