細胞運動における細胞極性決定の分子機序に関する研究

细胞运动过程中细胞极性决定的分子机制研究

• 批准号: 13878151
• 负责人: 佐邊 壽孝
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka Bioscience Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13878151/
• 关键词: 細胞運動; 運動極性; パキシリン; チロシンリン酸化; Cdc42; Rac1; cell polarity; paxillin; directional persistenc

これまでにインテグリンを介する細胞の接着と運動制御において、paxillinとp130Casのチロシンリン酸化が重要な役割を果たすこと、その内paxillinのTyr31/118のリン酸化が上皮細胞の運動先端部におけるRhoAの活性抑制に関与してしていることを明らかにしてきた。今回、paxillinのTyr40/181のリン酸化が、運動する上皮細胞においてCdc42とRac1の活性制御に深く関与することを明らかにし、そのことによりpaxillinが細胞運動極性の制御に深く関わることを示した。即ち、これまでの我々の知見(JBC,275,27155(2000))に加え、今回FRET法(阪大、微研、松田道行先生との共同研究)での評価も行った結果、Tyr40/181のリン酸化変異体を発現させた上皮細胞では、運動中にCdc42とRac1の正常を逸脱した活性化が起っていることを明らかにすることができた異常な活性化が起る部位とその方向への運動極性のぶれは概ね一致していた。Tyr31/118の変異体ではこのようなことは観察されなかった。この異常な活性化は細胞の局所でのみ観察されることであり、細胞全体のCdc42やRaclの活性量を生化学的に測定しても、コントロールと比べ有為な変化を補足することはできなかった。現在、Cdc42やRac1の活性制御に到るTyr40/181のリン酸化の下流シグナル分子を同定する為、最近、Birchmeirらが開発した新しいTwo hybrid systemを導入し、解析を進めている。

The regulation of cell adhesion and motility by the enzyme paxillin and p130Cas is important for the regulation of cell adhesion and motility, and the regulation of RhoA activity by the enzyme paxillin and p130Cas is important for the regulation of cell adhesion and motility. In this paper, paxillin Tyr40/181 is used to control the activity of Rac1 in epithelial cells. That is, I know what I know.(JBC,275,27155(2000)), FRET method (Joint study by Mr. Sakata, Mr. Weiken and Mr. Yukio Matsuda). The results of the evaluation show that Tyr40/181 has a positive effect on the development of epithelial cells, and that Cdc42/Rac1 has a positive effect on the activation of epithelial cells during exercise. Tyr31/118 is a variant of Tyr 31/118. This abnormal activity is detected in the cells, and the activity of Cdc42 and Racl in the whole cell is determined biochemically. Now, Cdc42 and Rac1 activity control to Tyr40/181 and the downstream molecular identity of the acid are determined, recently, Birchmeir has been developed, and a new Two hybrid system has been introduced and analyzed.

项目成果

Yagi, R., Ishimaru, S., Yano, H., Gaul, U., Hanafusa, H., Sabe, H.: "A novel muscle LIM-only protein is generated from paxillin gene locus in Drosophila"EMBO Rep.. 2・9. 814-820 (2001)

Yagi, R.、Ishimaru, S.、Yano, H.、Gaul, U.、Hanafusa, H.、Sabe, H.：“果蝇中的桩蛋白基因座产生了一种新型肌肉 LIM 蛋白”EMBO 代表。 2·9。814-820（2001）

T.Oshiro, S.Koyama, S.Sugiyama, A.Kondo, Y.Onodera, T.Asahara, H.Sabe, A.Kikuchi: "Interaction of POB1, a downstream molecule of small G protein Ral, with PAG2, a paxillin binding protein, is involved in cell migration"J.Biol.Chem.. 277・41. 38618-38626 (2

T.Oshiro、S.Koyama、S.Sugiyama、A.Kondo、Y.Onodera、T.Asahara、H.Sabe、A.Kikuchi：“小 G 蛋白 Ral 的下游分子 POB1 与 PAG2（小 G 蛋白 Ral 的下游分子）的相互作用桩蛋白结合蛋白，参与细胞迁移”J.Biol.Chem.. 277・41. 38618-38626 (2

Woods, AJ., Roberts, MS., Choudhary, J., Barry, ST., Mazaki, Y., Sabe, H., Morley, SJ., Critchley, DR., Norman, Jc.: "Paxillin associates with poly(A)-binding protein 1 at the dense endoplasmic reticulum and the leading edge of migrating cells"J Biol Cher

Woods, AJ.、Roberts, MS.、Choudhary, J.、Barry, ST.、Mazaki, Y.、Sabe, H.、Morley, SJ.、Critchley, DR.、Norman, Jc.：“Paxillin 与聚

H.Sabe: "In 'The ARF book'(Ed. R.Kahn)"Kluwer Academic Publishers (in press). 18

H.Sabe：“《ARF 书》（Ed. R.Kahn）”Kluwer 学术出版社（正在出版）。

Mazaki, Y., Hashimoto, S., Okawa, K., Tsubouchi, A., Nakamura, K., Yagi, R., Yano, H., Kondo, A., Iwamatsu, A., Mizoguchi, A., Sabe, H.: "An ADP-Ribosylation Factor GTPase-activating Protein Git2-short/KIAA0148 Is Involved in Subcellular Localization of P

真崎 Y.、桥本 S.、大川 K.、坪内 A.、中村 K.、八木 R.、矢野 H.、近藤 A.、岩松 A.、沟口 A.、