新規ロドプシンの特性を利用したG蛋白質共役受容体の活性化状態の変異体解析
利用新型视紫红质的特性对 G 蛋白偶联受体的激活状态进行突变分析
基本信息
- 批准号:15657034
- 负责人:
- 金额:$ 1.79万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
- 财政年份:2003
- 资助国家:日本
- 起止时间:2003 至 2004
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
前年度の研究において、新規ロドプシンにおいては、Trp265は不活性状態と活性化状態においてレチナールと相互作用し、Ala269は、活性化状態では、レチナールとの距離が近づき相互作用が強まると考えちれた。この2つの残基は共に、ウシロドプシン結晶構造中でヘリックス6に存在し、αヘリックス1巻き分しか位置が異ならないので、G蛋白質活性化メカニズムを考える上で興味深い。今年度はTrp265やAla269は、レチナールのβイオノン部分と相互作用していると考えられるので、以下の2つの研究を実施した。1.新規ロドプシンにおいて、アゴニストである全トランス型レチナールと相互作用するアミノ酸残基の全貌を明らかにするために、ウシロドプシンにおいて、レチナールのポリエン鎖から<4.5Åに存在するアミノ酸残基に対応する新規ロドプシンのアミノ酸残基に変異を網羅的に導入した。具体的には、Y113A,G114L,G114A,L117A,T186A,C187A,S188A,L189A,W191A,W191L各変異体の発現用コンストラクトを作製し、発現を確認した。2.Trp269やAla269はアゴニストである全トランス型レチナールと相互作用しているので、この位置の変異が11シス型レチナールと全トランス型レチナールへの親和性を変化させるのかを分光学的に測定した。その結果、Trp265に変異を導入すると側鎖の体積が小さいほど全トランス型レチナールへの親和性が増大し、Ala269の場合は、側鎖が大きくなるほど全トランス型レチナールへの親和性が低下した。また、これらの変異体のG蛋白質活性化能を詳細に検討した結果、Trp265の変異は、アゴニストとの相互作用が低下し、G蛋白質の活性化能が低下するのに対し、Ala269の変異は、全トランス型レチナールの構造が歪められるためにG蛋白質活性化が低下した可能性が考えられた。
In the previous year, the study focused on inactive traits, inactive traits, active interactions, Ala269 interactions, active interactions, close distance interactions, and Trp265 inactivating traits. The results show that there is a strong smell in the production of the residue, the presence of the This year's "Trp265 Ala269", "interaction", "interaction" and "interaction". 1. New rules are known to be full-size interactions, acid residues, acid residues and acid residues. 4.5 there is an influx of acid residues on the Internet. Specific characters, Y113A G114L G114A recorder L117A Reagle T186A Magi C187A Magi S188A Magazine L189A Magi W191A W191L W191L each body is now used to make sure that it is done. 2.Trp269
项目成果
期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
寺北明久: "ロドプシン類の分子進化と多様性"比較生理生化学. (印刷中). (2004)
Akihisa Terakita:“视紫红质的分子进化和多样性”比较生理生物化学(出版中)。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
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Akihisa Terakita:“视紫红质家族分子进化中的反离子位移”Nature Structural
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
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