膜インターフェイスでのG蛋白質共役受容体によるG蛋白質活性化効率の制御機構の解析

膜界面G蛋白偶联受体对G蛋白激活效率的控制机制分析

• 批准号: 19036029
• 负责人: 寺北 明久
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19036029/
• 关键词: シグナル伝達; G蛋白質共役型受容体; ロドプシン; 構造変化; Gタンパク質

G蛋白質活性化効率が高いウシロドプシンと、低いパラピノプシンの構造変化の「大きさ」を以下の実験により定量的に比較した。(1)ウシロドプシンとパラピノプシンの膜貫通ヘリックス6に存在する250番目に加えて、227、251、244番目のアミノ酸残基に蛍光色素bimmeを導入したウシロドプシンとパラピノプシンを作製し、光受容前後における水溶性消光分子KIによる蛍光の「見かけの消光効率」を測定した。また、蛍光寿命をオレゴン健康科学大学のファレンス教授の研究室で測定し、見かけの消光効率と蛍光寿命から真の消光効率を算出した。その結果、膜貫通ヘリックス6の構造変化は、ウシロドプシンで大きく、パラピノプシンでは小さいことが明らかになった。さらに、上述の蛍光色素導入変異体に加えて227番目にbkmaneを導入した変異体について、消光剤が存在しない際の、光照射前後での蛍光スペクトルの極大変化を解析した。その結果か照も、構造変化はウシロドプシンで大きく、パラピノプシンでは小さいことが明らかになった。(2)ヘリックス6の250番目と251番目の位置に蛍光色素bimmeを導入し、またbimaneの消光分子として働くトリプトファンをヘリックス5の226番目と227番目に導入した。それらを用いて、ウシロドプシン・パラピノプシンのヘリックス6のヘリックス5に対する構造変化の「大きさ」を比較した。その結果、ヘリックス6の相対的な動きもウシロドプシンで大きく、パラピノプシンでは小さいことが明らかになった。

High rate of G protein activeness sharper が い ウ シ ロ ド プ シ ン と, low い パ ラ ピ ノ プ シ ン の structure - the の "big き さ" を の below be 験 に よ り quantitative に compare し た. (1) ウ シ ロ ド プ シ ン と パ ラ ピ ノ プ シ ン の transmembrane ヘ リ ッ ク ス 6 に exist す る 250's mesh に plus え て, 227, 251, 244's mesh の ア ミ ノ acid residues に 蛍 photopigment bimme を import し た ウ シ ロ ド プ シ ン と パ ラ ピ ノ プ シ ン を as し, light before and after the capacity に お け る water-soluble extinction molecular KI に よ る 蛍 Light <s:1> "see け <s:1> extinction efficiency" を to determine <s:1> た. ま た, 蛍 light life を オ レ ゴ ン health and science university の フ ァ レ ン ス professor の laboratory で し, see か け の extinction rate of unseen と 蛍 light life か ら is の extinction rate of unseen を calculate し た. そ の results, transmembrane ヘ リ ッ ク ス 6 の structure - は, ウ シ ロ ド プ シ ン で big き く, パ ラ ピ ノ プ シ ン で は small さ い こ と が Ming ら か に な っ た. さ ら に, the above の 蛍 photopigment import - variant に plus え て 227's mesh に bkmane を import し た - variant に つ い て, extinction tonic が し な before and after the event い の, light で の 蛍 light ス ペ ク ト ル の is great - the を parsing し た. か according も そ の results, structural variations は ウ シ ロ ド プ シ ン で big き く, パ ラ ピ ノ プ シ ン で は small さ い こ と が Ming ら か に な っ た. (2) ヘ リ ッ ク ス 6 の 250's yard と 251 times の position に 蛍 photopigment bimme を import し, ま た bimane の extinction molecular と し て 働 く ト リ プ ト フ ァ ン を ヘ リ ッ ク ス 5 の 226's yard と 227 times に import し た. そ れ ら を with い て, ウ シ ロ ド プ シ ン · パ ラ ピ ノ プ シ ン の ヘ リ ッ ク ス 6 の ヘ リ ッ ク ス 5 に す seaborne る structure - the の "big き さ" を compare し た. そ の results, ヘ リ ッ ク ス 6 の phase of seaborne な dynamic き も ウ シ ロ ド プ シ ン で big き く, パ ラ ピ ノ プ シ ン で は small さ い こ と が Ming ら か に な っ た.

项目成果

脊椎動物ロドプシンと近縁なエンセファロプシンの分子特性の生化学的解析

与脊椎动物视紫红质密切相关的脑紫质分子特性的生化分析

• 发表时间: 2008
• 作者: 高田英一郎;小柳光正;塚本寿夫;徳永史生;寺北明久
• 通讯作者: 寺北明久

部位特異的蛍光標識を用いた多様なロドプシンの活性化に伴う構造変化の検出の試み

尝试使用位点特异性荧光标记检测与各种视紫红质激活相关的结构变化

• 发表时间: 2007
• 作者: Fukumura;K.;片岡直行;片岡直行;Takefumi. Morizumi;Takahiro Yamashita;Mitsumasa Koyanagi;寺北明久;Akihisa Terakita;Takeo Horie;Emi Kawano-Yamashita;Masaki Torii;塚本 寿夫;寺北明久;塚本寿夫;酒井佳寿美;木俣直規;藤田彩理;Hisao Tsukamoto;寺北明久;小柳光正;塚本寿夫;山下(川野)絵美;寺北明久;永田 崇;和田精二;神野有香;若桑基博;寺北明久;深田吉孝;永田 崇;寺北明久;寺北明久;永田崇;Akihisa Terakita;木股 直規;永田 崇;塚本 寿夫
• 通讯作者: 塚本 寿夫

Comparative characterization of bistable pigments in visual and non-visual photoreception

双稳态颜料在视觉和非视觉感光中的比较表征

• 发表时间: 2007
• 作者: Fukumura;K.;片岡直行;片岡直行;Takefumi. Morizumi;Takahiro Yamashita;Mitsumasa Koyanagi;寺北明久;Akihisa Terakita;Takeo Horie;Emi Kawano-Yamashita;Masaki Torii;塚本 寿夫;寺北明久;塚本寿夫;酒井佳寿美;木俣直規;藤田彩理;Hisao Tsukamoto;寺北明久;小柳光正;塚本寿夫;山下(川野)絵美;寺北明久;永田 崇;和田精二;神野有香;若桑基博;寺北明久;深田吉孝;永田 崇;寺北明久;寺北明久;永田崇;Akihisa Terakita;木股 直規;永田 崇;塚本 寿夫;寺北 明久;寺北 明久;高野 浩輔;高田 英一郎;小柳 光正;Akihisa Terakita
• 通讯作者: Akihisa Terakita

見える光、見えない光 : 動物と光のかかわり

可见光、不可见光：动物与光的关系

• 发表时间: 2009
• 作者: Fukumura;K.;片岡直行;片岡直行;Takefumi. Morizumi;Takahiro Yamashita;Mitsumasa Koyanagi;寺北明久;Akihisa Terakita;Takeo Horie;Emi Kawano-Yamashita;Masaki Torii;塚本 寿夫;寺北明久;塚本寿夫;酒井佳寿美;木俣直規;藤田彩理;Hisao Tsukamoto;寺北明久;小柳光正;塚本寿夫;山下(川野)絵美;寺北明久;永田 崇;和田精二;神野有香;若桑基博;寺北明久;深田吉孝;永田 崇;寺北明久;寺北明久;永田崇;Akihisa Terakita;木股 直規;永田 崇;塚本 寿夫;寺北 明久;寺北 明久;高野 浩輔;高田 英一郎;小柳 光正;Akihisa Terakita;Emi Kawano-Yamashita;塚本 寿夫;寺北 明久;寺北 明久;永田 崇;小柳 光正;高野 浩輔;寺北明久
• 通讯作者: 寺北明久

シリーズ21世紀の動物科学 動物の感覚とりズム

21世纪动物科学系列 动物感知节律

• 发表时间: 2007
• 作者: 新崎恒平;他;塚本寿夫;藤田彩理;寺北明久;永田崇;深田吉孝;永田崇;寺北明久;寺北 明久;寺北 明久;寺北 明久;永田 崇;寺北 明久
• 通讯作者: 寺北 明久