住血寄生性原虫(トリパノソーマ)を用いた糖鎖構造機能解析モデル系の開発

开发利用裂寄生原生动物(锥虫)分析糖链结构和功能的模型系统

基本信息

项目摘要

N-結合型糖鎖合成において糖鎖転移に重要な役割を果たす酵素系の一つであるオリゴサッカリルトランスフェラーゼ(OST)遺伝子をTrypanosoma bruceiからクローニングし、その構造解析を行った。同遺伝子は2種類見出され、それぞれOST1,OST2と命名した、N-グリコシレーションに関わるオリゴサッカリルトランスフェラーゼ(OST)遺伝子をクローニングした。すなわち、Leishmania major(L.major)のOST STT3サブユニットの運伝子配列を基にして、プライマーを設計し、PCRにより2種類のOST遺伝子をT.brucei染色体DNAから得た。それらを、TbOST I、TbOST IIと命名し、それぞれ2,430kbp、2,406kbpの遺伝子全長を解析した。予想アミノ酸配列の比較では、他生物の既知OST STT3サブユニットとは高い相向性を示し、ドメイン構造も保存されていることが明らかとなった。それぞれの転写産物のサイズは前者では3.5および4.5kb、後者ではおよそ3.5kbであった。予想アミノ酸配列から設計した合成ペプチドにより作製した免疫血清は原虫の74kDaの蛋白質と皮応した。さらに、TbOSTを2本鎖RNA干渉用のベクターに組み込んで、dsRNAiによる本遺伝子産物の機能解析を試みた。その結果、本遺伝子の発現抑制は致死的であり、TbOSTが原虫の生存に必須の蛋白質をコードしていることを明らかにした。TbOST発現を抑制された原虫細胞質内には濃染する顆粒構造が出現することが米学顕微鏡ならびに電子顕微鏡観察で認められた。これらの出現形質は原虫蛋白質のN-グリコシレーションの阻害とマンノース6燐酸系の阻害の結果と考えられた。また、機能的にもTbOSTは酵母菌OST STT3サブユニットの相当する分子と考えられた。
N - type combination lock sugar synthesis に お い て sugar lock planning move important な に "を cut fruit た す enzyme to tie の つ で あ る オ リ ゴ サ ッ カ リ ル ト ラ ン ス フ ェ ラ ー ゼ (OST) posthumous son 伝 を Trypanosoma brucei か ら ク ロ ー ニ ン グ し, そ の structure line を っ た. Son with heritage 伝 は out 2 kinds さ れ, そ れ ぞ れ OST1, OST2 と named し た, N - グ リ コ シ レ ー シ ョ ン に masato わ る オ リ ゴ サ ッ カ リ ル ト ラ ン ス フ ェ ラ ー ゼ (OST) heritage 伝 son を ク ロ ー ニ ン グ し た. す な わ ち, Leishmania major (" ajor) の OST STT3 サ ブ ユ ニ ッ ト の luck 伝 with sequence を base に し て, プ ラ イ マ ー を し design, PCR に よ り 2 kinds の OST heritage 伝 son を T.b rucei chromosome DNA か ら た. Youdaoplaceholder0, TbOST I, TbOST IIと naming た, それぞれ2,430kbp, 2,406kbp cultural heritage 伝 total length を analysis た た. To think ア ミ ノ acid with column の is で は, he is known biological の OST STT3 サ ブ ユ ニ ッ ト と は high い opposite sex を し, ド メ イ ン tectonic も save さ れ て い る こ と が Ming ら か と な っ た. そ れ ぞ れ の product planning write の サ イ ズ は former で は 3.5 お よ び 4.5 KB, the latter で は お よ そ 3.5 KB で あ っ た. To want to ア ミ ノ acid with column か ら design し た synthetic ペ プ チ ド に よ り cropping し た immune serum は parasite の 74 kda protein の と skin 応 し た. さ ら に, TbOST を 2 dry involved with this lock RNA の ベ ク タ ー に group み 込 ん で, dsRNAi に よ る this heritage 伝 zi chan content analytical を の function try み た. そ の results, the heritage 伝 son の 発 now inhibit lethal は で あ り, TbOST が parasite の survival に must の protein を コ ー ド し て い る こ と を Ming ら か に し た. TbOST 発 now を inhibit さ れ た parasite cytoplasm に は thick dye す る granular structure appeared が す る こ と が m learn 顕 micromirror な ら び に electronic 顕 micromirror 観 examine で recognize め ら れ た. こ れ ら の appear character は parasite protein の N - グ リ コ シ レ ー シ ョ ン の resistance against と マ ン ノ ー ス 6 燐 acid is の resistance against の results と exam え ら れ た. Youdaoplaceholder0, functional に <s:1> TbOST yeast OST STT3サブユニット <s:1> equivalent する molecules と study えられた.

项目成果

期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
組換えリボソームPO蛋白質を用いたトリパノソーマ特異的ELISA法の開発
使用重组核糖体 PO 蛋白开发锥虫特异性 ELISA 方法
  • DOI:
  • 发表时间:
    2004
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Hayashi;S.;Yamagishi;J.;Kotchasatid;A.;Jongdee;B.;Kamoshita;A.;櫻井 達也
  • 通讯作者:
    櫻井 達也
トリパノソーマ コンゴレンセ特異的診断法の開発
刚果锥虫特异性诊断方法的开发
  • DOI:
  • 发表时间:
    2005
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    ワレン バティカドス
  • 通讯作者:
    ワレン バティカドス
トリパノソーマ エバンシ実験感染豚由来血液を用いたLAMP法の評価
使用实验感染伊氏锥虫的猪的血液进行 LAMP 方法的评估
  • DOI:
  • 发表时间:
    2005
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    YOSHIMURA;Yukinori;オリエル テキソエ
  • 通讯作者:
    オリエル テキソエ
Expression of a gene encoding Trypanosoma congolense Putative Abcl family protein is developmentally regulated.
编码刚果锥虫推定 Abcl 家族蛋白的基因的表达受到发育调节。
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杉本 千尋其他文献

Human African trypanosomiasis-Diagnosis and vector genomics.
非洲人类锥虫病-诊断和载体基因组学。
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Kobie K.;Kawabata M.;Hioki K.;Tanaka A.;Matsuda H.;Mori T.;Maruo K.;杉本 千尋
  • 通讯作者:
    杉本 千尋

杉本 千尋的其他文献

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  • DOI:
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  • 发表时间:
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    $ 2.43万
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    1999
  • 资助金额:
    $ 2.43万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
Theieria sergentiのribonucletide reductase遺伝子のクローニングとその特異的阻害剤を用いたピロプラズマ感染症防除法の開発
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  • 批准号:
    96F00086
  • 财政年份:
    1998
  • 资助金额:
    $ 2.43万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
タイレリア原虫ゲノムの比較解析
泰勒虫寄生虫基因组的比较分析
  • 批准号:
    97F00425
  • 财政年份:
    1998
  • 资助金额:
    $ 2.43万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
熱帯タイレリア症に対するサブユニットワクチン開発 ― 有効な抗原の同定と精製
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  • 批准号:
    96F00331
  • 财政年份:
    1998
  • 资助金额:
    $ 2.43万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows

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    2024
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  • 批准号:
    24K20196
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  • 批准号:
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  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 2.43万
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    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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