非病原性トリパノソーマの寄生戦略から探る病原性進化のダイナミズム

从非致病锥虫的寄生策略探索致病进化的动态

基本信息

批准号：
17658127
负责人：
杉本千尋
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

鹿児島県下で採取されたマタニ(Haemaphysalis hystricis)から検出されたトリパノソーマ原虫(KG1株)についてその生物学的、遺伝学的性状を検討した。本原虫は、HEK293T細胞をフィーダーとしてL929培地で培養が可能であったが、フィーダー細胞無しでは培養は不可能であった。また培養した原虫をダニ(Ornithodoros moubata)の体腔に注入し、一定時間後に臓器、ヘモリンフを回収し、塗抹染色標本を作製し、原虫を検索したところトリポマスティゴートあるいはエピマスティゴート様形態を示す虫体が検出できた。このことからツェツェバエで媒介されるトリパノソーマ種と同様のライフサイクルをダニ体内で保有していることが推察された。18および28sリボソームRMA遺伝子領域ならびにITS領域を解析し、他のトリパノソーマ、その他類縁種との系統解析を行った結果、病原性の高いトリパノソーマ種(T.brucei, T.simiae and T.congolense)とは系統発生的に離れており、Bodo, Crithidiaなど低〜無病原性のキネトプラスト目原虫と類縁であることが明らかにできた。KG1株をマウス、ウサギ、ヒツジに接種したが血液中での増殖は認められなかった。またT.evansiを抗原としてラマを免疫し、一本鎖抗体を含む抗血清を作製し、表面抗原(VSG)型が明らかに異なるT.bruceiライセートに対してウエスタンブロット解析を実施したが、VSG間の交差反応性は明瞭ではなかった。

在Kagoshima县收集的Matani（Haemphysalis hystricis）中检测到的原生动物寄生虫（KG1菌株）的生物学和遗传特性。这种原生动物寄生虫能够在L929培养基中使用HEK293T细胞作为进料器进行培养，但是没有进料器细胞就不可能培养。 Furthermore, the cultured protozoa was injected into the body cavity of the mites (Ornithodoros moubata), and after a certain period of time the organs and hemolynf were collected, smear-stained specimens were prepared, and when protozoa were searched, insect bodies exhibiting a trypomastigote or epimastigote-like morphology were detected.这表明螨虫具有与采集蝇介导的锥虫种类相似的生命周期。 The 18th and 28s ribosomal RMA gene regions and ITS regions were analyzed, and phylogenetic analysis was performed with other trypanosomas and other related species, and it was revealed that they were phylogenetically separated from highly pathogenic trypanosoma species (T. brucei, T. simiae and T. congolense), and were related to low-pathogenic Kinetoplast order protozoans such as Bodo and克里西亚。将小鼠，兔子和绵羊接种了KG1菌株，但未观察到血液生长。此外，使用T. evansi作为产生含有单链抗体的抗血清的抗原对美洲驼进行免疫，并对具有不同表面抗原（VSG）类型的t. brucei裂解物进行了蛋白质印迹分析，但VSG之间的交叉反应性却不清楚。