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非病原性トリパノソーマの寄生戦略から探る病原性進化のダイナミズム

从非致病锥虫的寄生策略探索致病进化的动态

基本信息

批准号：
17658127
负责人：
杉本千尋
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

鹿児島県下で採取されたマタニ(Haemaphysalis hystricis)から検出されたトリパノソーマ原虫(KG1株)についてその生物学的、遺伝学的性状を検討した。本原虫は、HEK293T細胞をフィーダーとしてL929培地で培養が可能であったが、フィーダー細胞無しでは培養は不可能であった。また培養した原虫をダニ(Ornithodoros moubata)の体腔に注入し、一定時間後に臓器、ヘモリンフを回収し、塗抹染色標本を作製し、原虫を検索したところトリポマスティゴートあるいはエピマスティゴート様形態を示す虫体が検出できた。このことからツェツェバエで媒介されるトリパノソーマ種と同様のライフサイクルをダニ体内で保有していることが推察された。18および28sリボソームRMA遺伝子領域ならびにITS領域を解析し、他のトリパノソーマ、その他類縁種との系統解析を行った結果、病原性の高いトリパノソーマ種(T.brucei, T.simiae and T.congolense)とは系統発生的に離れており、Bodo, Crithidiaなど低〜無病原性のキネトプラスト目原虫と類縁であることが明らかにできた。KG1株をマウス、ウサギ、ヒツジに接種したが血液中での増殖は認められなかった。またT.evansiを抗原としてラマを免疫し、一本鎖抗体を含む抗血清を作製し、表面抗原(VSG)型が明らかに異なるT.bruceiライセートに対してウエスタンブロット解析を実施したが、VSG間の交差反応性は明瞭ではなかった。

Kagoshima Prefecture's Haemaphysalis hystricis), the biological and genetic properties of the protozoan protozoa (KG1 strain) are as follows: It is possible to culture the protozoa and HEK293T cells without cultivating L929 cells, and it is impossible to culture the cells without cultivating them. Ornithodoros moubata) injection into the body cavity, injection after a certain period of time, recovery of the ヘモリンフを, preparation of stained specimens, original Insect 検SO したところトリポマスティゴートあるいはThe form of the エピマスティゴート様 shows the insect body and the が検出できた. The medium is the same as the mediumのライフサイクルをダニででていることが看された. 18および28sリボソームRMA legacy subdomainならびにITS domainをanalyticし、hisのトリパノソーマ, そのOTHER type とのSYSTEM ANALYSIS を行った results, pathogenic の高いトリパノソーマ species (T.brucei, T.simiae and T.congolense) and Bodo of T.simiae and T.congolense, Crithidia is a low to non-pathogenic protozoa of the same order. The KG1 strains of をマウス, ウサギ, and ヒツジに were inoculated into the blood of したが and were reproduced in the められなかった.またT.evansi をantigen としてラマをimmune し, 1 lock antibody をcontaining むantiserum をproduced し, surface antigen (VSG) type が明らかにisoなるT.bruceiライセートに対してエスタンブロット solution The cross-reaction between VSG and VSG is clearly understood.