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赤血球内寄生原虫と宿主細胞間の分子間相互作用解析とワクチン開発への応用

红细胞内原生动物与宿主细胞之间的分子相互作用分析及其在疫苗开发中的应用

基本信息

批准号：
01F00777
负责人：
杉本千尋
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01F00777/
关键词：
バベシア原虫赤血球抗原蛋白質バベシア膜骨格表面蛋白質

项目摘要

馬バベシア原虫(Babesia equi)は馬赤血球内に寄生し、貧血、黄疸を主徴とする疾患である。本原虫は分類学的にはBabesia属より、Theileria属に近縁であることが分子系統学的研究から報告されている。本原虫の宿主細胞内での動態を解析する上で、その表面蛋白質EMA-1,EMA-2に着目して研究を実施した。まず、それらに対する抗体をマウスで作製し、感染赤血球内部での2種の蛋白質の動態を観察した。その結果、両蛋白質が同一細胞上にほぼ同時期に発現していることが共焦点顕微鏡で観察され、EMA-2では感染初期に赤血球内に拡散し、細胞内面に蓄積される像も認められた。さらに赤血球膜画分を調製し、組換えEMA-1,EMA-2との結合性を検出したところ、後者でのみ特異的な結合を示した。以上の結果から、EMA-1とEMA-2の間では免疫学的性状、赤血球内での動態が異なり、機能的にも異なることが示唆された。2つの表面蛋白質間の機能的分化に関わる遺伝的背景を明らかにするため、まず両遺伝子をゲノム上にマッピングすることを行った。パルスフィールド電気泳動法分離された4本の染色体DNAをナイロン膜状に転写し、EMA-1,EMA-2遺伝子それぞれに特異的に反応するプローブによるサザンサザンプロッティングを実施したところ、EMA-1,EMA-2はそれぞれ第2染色体、第1染色体に位置することがわかった。タイレリア原虫のEMA相同遺伝子(MPSP)は第1染色体に存在していることから、EMA-2がMPSPのオーソロガスな遺伝子と考えられた。なぜBabesia equiだけが2種類の表面抗原を発現しているのか、機能的な観点からも興味深いだけではなく、遺伝子の進化についても今後解析することによって興味深い結果が得られると思われた。

Babesia equi is a parasitic parasite in the red blood cells of horses, causing anemia and jaundice. The taxonomic classification of this protozoa is based on the genus Babesia and the genus Theileria. A study on molecular systematics is reported. Analysis of the dynamics of the host cell of this parasite has been carried out, and the surface proteins EMA-1 and EMA-2 have been studied and studied.まず、それらに対するAntibody をマウスでし、Infected erythrocytes with 2 kinds of proteins inside the dynamic を観看した. As a result, the protein was detected on the same cell at the same time and was observed by confocal microscopy. In the early stage of infection, EMA-2 can be dispersed in red blood cells and accumulated in cells, and can be recognized as an image. The erythrocyte membrane is divided into modulated ones, the combined ones are EMA-1, EMA-2 and the binding properties of EMA-2, and the latter ones are specific binding properties. The above results show the immunological properties of EMA-1 and EMA-2, the dynamic properties of red blood cells, and the functional properties of EMA-1 and EMA-2. 2. Differentiation of functions between surface proteins and the background of the relationship between them.るため、まず両伝子をゲノム上にマッピングすることを行った.パルスフィールド electrophoresis method separation of chromosomal DNA をナイロン membrane The status of writing, EMA-1, EMA-2 is a special reaction EMA-1, EMA-2 is the location of the second chromosome and the first chromosome. The existence of the 1st chromosome of the EMA-identical protozoa (MPSP)ることから、EMA-2がMPSPのオーソロガスな伝子と考えられた.なぜBabesia equiだけが2 types of surface antigen を発appears しているのか, functional な観点からも深熟いだけではなく、伊伝子の性的についても下注的することによってinterest深い resultsが得られると思われた.