PKCターゲティングのFRETによる抗癌剤のハイスループットスクリーニングの開発

开发利用 FRET 进行 PKC 靶向的抗癌药物高通量筛选

• 批准号: 15659060
• 负责人: 齋藤 尚亮
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659060/
• 关键词: プロテインキナーゼC; トランスロケーション; GFP; イメージング; 発癌; サブタイプ

PKCの多彩な機能は、10種類以上のサブタイプが、種々の細胞害外刺激に応じて、細胞内の目的とする部位に移動し、特定の基質をリン酸化するという機能(ターゲティング機能)を有するためであると考えられてきている。本年度の研究では、種々の合成ホルボールエステルによるPKC各サブタイプのターゲティングをスクリーニングすることにより、特定のPKC機能の阻害剤(活性化剤)を見出すことを目的とした。また、種々の病態における各PKCサブタイプの役割についても検討した。その結果、(1)特定のPKCサブタイプを特異的に活性化する合成ホルボールエステルを同定した。このホルボールエステルはin vitroでは特異性を示さないものの、in vivoではbetaPKCを特異的に活性化する働きを有した。(2)脳虚血による脳神経細胞死に対して予防作用を持つエストロゲンは、PKC特にgammaPKCを介して、その効果を発揮することを示した。また、その神経保護作用は従来の核型エストロゲン受容体ではなく、細胞膜に存在する新しいエストリロゲン受容体を介することが明らかとなった。(3)VEGF受容体を介したERKの活性化機構にはdeltaPKCの活性化が必須であることを示した。(4)ミクログリア細胞によるドン食作用には2種のPKC、epsilonおよびbetaが関与しているが、それぞれ、異なる機構に関与することを示した。つまり、活性酸素産生に関与するbetaPKCと、ドン食運動に関与するepsilonである。以上の結果から、細胞種、細胞機能により機能するPKCが異なっており、各生理作用に関与するPKCサブタイプを決定し、さらにサブタイプ特異的なPKC作用薬の開発を行うことにより、副作用の少ない薬物の開発が可能となることを示した。

PKC's colorful functions include more than 10 types of protein, extracellular stimulation, intracellular target site movement, and specific matrix acidification. This year's research aims to identify inhibitors (activators) of specific PKC functions in the synthesis of PKC species. All PKC services are subject to investigation. The results are as follows: (1) Specific PKC activity is constant. This is the first time that a PKC has been activated in vivo. (2)The effect of PKC on cell death is demonstrated by the presence of PKC in the body. The neuroprotective effect of the enzyme is due to the presence of a new receptor in the cell membrane. (3)VEGF receptor mediates ERK activation and deltaPKC activation is essential. (4)There are two kinds of PKC, epsilon and beta related to the function of cell nutrition. Active acid production is related to beta PKC, food movement is related to epsilon The above results show that PKC is different in cell species, cell function, PKC function, PKC physiological function, PKC activity, PKC development, PKC side effects and PKC side effects.

项目成果

nvolvement of γPKC in estrogen-induced neuroprotection on focal brain ischemia through G protein-coupled estrogen receptor.

γPKC 通过 G 蛋白偶联雌激素受体参与雌激素诱导的局灶性脑缺血神经保护。

• 期刊: J Neurochem. (未定)(近刊)
• 作者: Hayashi;S.
• 通讯作者: S.

Salli, U.: "Spatio-temporal interactions of myristoylated alanine-rich C kinase substrate (MARCKS) protein with the actin cytoskeleton and exocytosis of oxytocin upon prostaglandin F2alpha stimulation of bovine luteal cells."Biol.Reprod. 69・6. 2053-2058 (

Salli, U.：“肉豆蔻酰化丙氨酸丰富的 C 激酶底物 (MARCKS) 蛋白与肌动蛋白细胞骨架和前列腺素 F2α 刺激牛黄体细胞时催产素的胞吐作用的时空相互作用。”Biol.Reprod 69·6。 2058（

Effects of different anti‐tau antibodies on tau fibrillogenesis: RTA‐1 and RTA‐2 counteract tau aggregation

• DOI: 10.1016/j.febslet.2005.01.039
• 发表时间: 2005-02
• 期刊: FEBS Letters
• 影响因子: 3.5
• 作者: T. Taniguchi;M. Sumida;Shuko Hiraoka;K. Tomoo;T. Kakehi;K. Minoura;S. Sugiyama;K. Inaka;T. Ishida;N. Saito;C. Tanaka

Protein kinase C-α mediates TNF release process in RBL-2H3 mast cells-Running title : αPKC mediates TNF release in RBL-2H3 cells-

蛋白激酶C-α介导RBL-2H3肥大细胞中的TNF释放过程-运行标题：αPKC介导RBL-2H3细胞中的TNF释放-

• 发表时间: 2005
• 期刊: Br.J.Pharmacol. 145
• 作者: Abdel-Raheem;I.T.他
• 通讯作者: I.T.他

Importance of chroman ring and tyrosine phosphorylation in the subtype-specific translocation and activation of diacylglycerol kinase alpha by d-alpha-tocophenol.

色满环和酪氨酸磷酸化在 d-α-生育酚对二酰基甘油激酶 α 的亚型特异性易位和激活中的重要性。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Genes to Cells. 10
• 作者: Fukunaga-Takenaka;R.他
• 通讯作者: R.他