脳部位・時期特異的な蛋白質発現マウスを用いた神経情報伝達機構のイメージング解析
使用表达特定于大脑区域和时间段的蛋白质的小鼠进行神经信息传递机制的成像分析
基本信息
- 批准号:17024040
- 负责人:
- 金额:$ 1.54万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:2005
- 资助国家:日本
- 起止时间:2005 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
細胞内情報伝達は、多種類のシグナル分子から構成される複数のシグナル経路がお互いにクロストークすることによって、巧妙に調節されている。分子間でシグナルが伝達されるためには、2種類以上の分子が細胞内のいずれかの部位で、一定時間共局在することが必要である。しかし、これまでに多くのシグナル経路の存在が報告されているにもかかわらず、それぞれのシグナルが「いつ」、「どこで」伝達されるかといった時間的・空間的な解析は十分には行われていなかった。情報伝達分子が、「いつ」、「どこで」、「どのような機構で」活性化を受けるかを解析することは、リン酸化酵素などシグナル分子による神経細胞応答の制御機構の解明には必須であると考えられる。我々は、プロテインキナーゼC(PKC)が、「いつ」、「どこで」情報伝達を行なうかを可視化することを目的として、GFP融合PKCの培養細胞内に発現させ、種々の刺激によるPKCの各サブタイプの動態をライブイメージング法を用いて解析した。その結果、PKCのトランスロケーションは、刺激・サブタイプ特異的、かつ発現する細胞特異的でもあること、また、多彩なトランスロケーションは、単一のPKC分子を介した様々な細胞応答を導くことを示した。神経において、PKCなど情報伝達因子の時空間解析を行うためには、神経ネットワークの完成された個体レベルでのイメージングが必要であると考え、テトラサイクリン制御システムを用いて、NSE(neuron specific enolase)あるいはCaMKII(calcium-calmodulin dependent kinase II)プロモーターの制御により脳内発現部位を決定し、さらに、テトラサイクリンの投与により発現時期をも調節しうる、各GFP-PKC発現遺伝子操作動物を作製した。プロモーターの違いにより、発現する神経細胞は明らかに異なっており、特定の時期における、特定の神経細胞での、特定の情報伝達因子の動態の観察が可能となった。これらの動物の脳スライスを用いて、生理的条件下での神経シナプスを介した神経刺激によるPKCの神経細胞内動態を検討したところ、シナプスを介して誘導された生理的なPKCトランスロケーションは明らかに薬物刺激によるPKCトランスロケーションと異なっていることを示した。また、これらの脳部位特異的・時期特異的PKC-GFP発現遺伝子操作動物を用いたマウスの行動学的検討を行い、特定の部位でのPKCの発現が神経機能にどのような影響を及ぼすかを解析した。
Intracellular information transmission, multi-species molecular composition, multiple molecular pathways, interaction, and clever regulation Molecular interaction is necessary when more than two kinds of molecules are present in the cell. The existence of a multi-dimensional network is reported in the middle of the day, and the analysis of time and space is very difficult. Information molecules,"middle",""," The information of PKC (PKC), GFP fusion PKC and GFP fusion PKC in cultured cells is visualized and analyzed. The results, PKC molecules, stimuli, cell-specific responses, multi-color PKC molecules, and cellular responses are shown. The time and space analysis of PKC and PKC information transmission factors is necessary for the study of NSE and the application of PKC and PKC information transmission factors. CaMKII(calcium-calmodulin dependent kinase II) is the most important enzyme in the production of GFP-PKC. It is possible to detect the dynamics of specific information transmission factors during specific periods of time, during specific periods of time, and during specific periods of time. The study of PKC intracellular dynamics in animals under physiological and physiological conditions was conducted in response to physiological and physiological stimulation. A study of the kinetics of PKC expression in animals, site-specific and time-specific PKC-GFP expression, and analysis of the effects of PKC expression on neural function.
项目成果
期刊论文数量(12)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Two types of chorine acetyltransferase of rat differ in intracellular translocation.
大鼠两种类型的氯乙酰转移酶在细胞内易位方面存在差异。
- DOI:
- 发表时间:2005
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Matsuo;A.他
- 通讯作者:A.他
Targeting of PKC-ε during Fc γR-Dependent Phagocytosis Requires the εC1B domain and Phospholipase C-γ1
Fc γR 依赖性吞噬作用期间 PKC-ε 的靶向需要 εC1B 结构域和磷脂酶 C-γ1
- DOI:
- 发表时间:2006
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Hatakeyama S.;et al.;Hara T.et al.;Kaneko-Oshikawa C. et al.;A.Kamata;S.Moriguchi;F.Han;N.Shioda;H.Sakagami;Y.Hasegawa;S.Yano;A.Hashiguchi;M.Hashimoto;K.Fukunaga;T.Shirakura;H.Nagase;H.Sakagami;H.Sakagami;K L.Cheeseman.他
- 通讯作者:K L.Cheeseman.他
Mutant protein kinase C gamma found in spinocerebellar ataxia type 14 is susceptible to aggregate and cause cell death.
14 型脊髓小脑共济失调中发现的突变蛋白激酶 C γ 易于聚集并导致细胞死亡。
- DOI:
- 发表时间:2005
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Seki;T.他
- 通讯作者:T.他
Phosphorylation of PKC activation loop plays an important role in receptor-mediated translocation of PKC
- DOI:10.1111/j.1365-2443.2005.00830.x
- 发表时间:2005-03-01
- 期刊:
- 影响因子:2.1
- 作者:Seki, T;Matsubayashi, H;Sakai, N
- 通讯作者:Sakai, N
Nuclear transportation of diacylglycerol kinase γ and its possible function in the nucleus
二酰甘油激酶γ的核转运及其在细胞核中的可能功能
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Matsubara;T.他
- 通讯作者:T.他
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齋藤 尚亮其他文献
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- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
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- 影响因子:0
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- DOI:
- 发表时间:
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- 影响因子:0
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- DOI:
- 发表时间:
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- 作者:
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- DOI:
- 发表时间:
2019 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
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上山 健彦
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