神経幹細胞標識トランスジェニックマウスを用いた神経因性疼痛発症機構に関する研究

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神経因性疼痛発症維持過程において、神経幹細胞による神経再生が関与するかどうかを明らかにするために、神経幹細胞のマーカーであるnestinのプロモーターの下流にGFPを組み込んだトランスジェニックマウス(pNestin-GFP Tg)マウスを用いて実験を行った。正常マウスで腰髄と後根神経節(DRG)におけるGFPの発現パターンを胎児期から成体までの発達段階で詳細に検討した結果、胎児では脊髄の中心管が強く染色され、生後日が進むにつれて蛍光強度はさがるものの、中心管周囲の細胞がGFP陽性となった。腰髄の切片でも中心管の周囲が強く染まった。DRGでは、一次求心性線維を出している神経細胞には発現せず、神経細胞を取り囲むpericytesに強く発現していた。坐骨神経結紮モデルを作製した。このモデルマウスでは、1週間後に熱や機械的刺激に対して痛覚過敏反応を示す。手術後2、3日目に後角の両側とも全体にGFP陽性細胞が増加し、炎症が消褪し、神経因性疼痛が確立する7日目では同時に結紮した肢側の脊髄後角にGFP陽性細胞が有意に増加した。このGFP陽性細胞は、神経細胞のマーカーであるMAP-2やPGP9.5、アストログリアのマーカーのGFAPいずれに対しても共染されなかった。神経型一酸化窒素合成酵素同様nestin陽性細胞は主として中心管付近に存在した。疼痛の感覚細胞はDRGにあり、NGFやBDNFが神経細胞の生存に必要なことがよく知られている。DRGの中にSCF/c-kitチロシンキナーゼ受容体を発現し、その生存に関与する細胞に着目し、c-kit受容体が痛覚伝達に重要な脊髄後角の浅層にCGRPといっしょに発現していること、neonatal capsaisin処置でその発現と疼痛が消滅することからc-kit系が疼痛に関与すること、さらに神経因性疼痛モデルで神経損傷側よりむしろ反対側の脊髄表層にタンパクとmRNAの発現が増大することから、SCF/c-kit系は疼痛の発症だけでなく神経再生にも関与する可能性を示した。