SSA/Ro52分子の構造と機能解析及びそのSLE等膠原病への治療応用

SSA/Ro52分子的结构和功能分析及其在SLE等胶原疾病中的治疗应用

基本信息

批准号：
16659261
负责人：
森本幾夫
金额：
$ 1.98万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659261/
关键词：
Ro52 SLE シェーグレン症候群 CD28 IL-2 p-body T細胞活性化自己抗原 IL-2産生 TRIM motif Ring Finger B BOX Jurkat T cell ミトコンドリア

项目摘要

Ro52は分子量52KDでRing finger, B Box, Coiled CoilドメインとさらにC端にRet Finger Protein(RFP)ドメインを有する分子である。この分子に対する自己抗体はシェーグレン症候群(SS)やSystemic Lupus Erythematosus(SLE)等の自己免疫疾患の患者から特徴的に検出されており、SSの診断マーカーとなっている。Ro52を認識する自己抗体が高頻度にみられるSSでは唾液腺などにリンパ球の浸潤がみられるがそのリンパ球はCD4陽性のT細胞であり、抗原刺激により活性化されている事も明らかになっている。このようにSSの病態においてT細胞の役割は非常に重要である。しかし現在のところ、この自己抗体産生に関する免疫寛容破綻のメカニズムやRo52の機能については全く明らかにされていない。我々は機序解明の糸口として、Ro52の過剰発現Jurkat T細胞株を作成したところ、CD3+CD28刺激のみならずCD28の単独刺激においてもIL-2産生の亢進がみられた。一方Jurkatの内在性のRo52をノックダウンさせるとCD3+CD28刺激でIL-2の産生がコントロールに比べて有意に減少した。この現象はRo52がCD28の活性化経絡に関与していることを示しており、Ro52の発現上昇がCD28の感受性を引き上げその結果、免疫的寛容を破綻させ、自己免疫疾患への引き金となる可能性を強く示唆した。さらにこの過剰発現の実験により、CD28刺激の際にRo52が局在変化を起こす事も明らかになった。以上より我々はRo52が引き起こす、IL-2産生機序解明のため、Ro52結合分子を探索してきた。その結果、Ro52と共局在し、共沈する分子を数個明らかにした。これらは、DCP1(Decapping enzyme 1)、DCP2(Decapping enzyme 2)でいずれもp-body(Processing body)と呼ばれる細胞質の小体に局在する分子であった。この両分子はmRNAのDecappingに関わる分子でmRNA量を負の方向に制御している。今後Ro52がDecapping活性に関わるメカニズムを明らかにして行く予定である。実際、T細胞活性化機構にはRNAのDegradationが関わる事が明らかになっているが、Ro52とDCP2がこのRNA Degradationにどのように関わるのかについても今後検討して行く。

RO52是一个分子量为52 kd的分子，环手指，b盒和盘绕的线圈结构域，在C端的RET指蛋白（RFP）结构域。针对该分子的自身抗体在自身免疫性疾病（例如Sjogren综合征（SS）和全身性红斑红斑（SLE）的患者中已被检测到，并且是SS的诊断标记。在SS中，经常看到识别RO52的自身抗体，淋巴细胞被渗入唾液腺，但这些淋巴细胞是CD4阳性T细胞，并且已证明它们被抗原刺激激活。因此，T细胞在SS病理学中的作用极为重要。但是，目前尚未阐明自身抗体产生中免疫耐受性失效和RO52功能的机制。作为阐明该机制的线索，我们创建了一个过表达RO52的Jurkat T细胞系，我们发现不仅通过CD3+CD28刺激增强了IL-2的产生，而且还通过CD28刺激增强了IL-2的产生。另一方面，当CD3+CD28刺激时，Jurkat内源性RO52的敲低会显着降低IL-2的产生。这种现象表明RO52参与了CD28的激活子午线，强烈表明RO52的表达升高会增加CD28的敏感性，从而破坏免疫耐受性并触发自身免疫性疾病。此外，这个过表达的实验表明，RO52在CD28刺激时经历了定位变化。从上面，我们一直在寻找RO52结合分子，以阐明由RO52引起的IL-2产生机理。结果，揭示了与RO52共定位并共沉淀的几个分子。这些都是DCP1（decapping酶1）和DCP2（decapping酶2）分子，该分子位于被称为p体（加工体）的细胞质体中。这两个分子都是参与mRNA的分子的分子，并在负方向上控制mRNA的量。将来，RO52计划阐明削弱活动所涉及的机制。实际上，已经揭示了RNA降解参与T细胞激活机制，但我们还将考虑将来RO52和DCP2在将来如何参与此RNA降解。