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皮膚の幹細胞(SP細胞)の大量培養法の開発と多能性の検討

皮肤干细胞（SP细胞）大量培养方法的开发及多能性研究

基本信息

批准号：
16659298
负责人：
大河内仁志
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Research Institute, International Medical Center of Japan
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659298/
关键词：
SP細胞角化細胞毛乳頭細胞皮膚幹細胞

项目摘要

マウスの皮膚を用いた検討により、表皮・真皮ともにHoechst 33342を強く排出するSP細胞集団が認められた。新生児マウスの表皮ではSP細胞の割合が5-10%認められたが、生後1ヶ月以降急速に減少した(0.1-0.5%)。新生児マウス真皮の細胞においてはSP細胞の割合は0.1%程度であったが、毛の毛乳頭細胞を選択的に採取して検討したところ、SP細胞の比率は3.5%に上昇した。ただマウスの毛は新生児期は比較的成長期にそろっていることが原因かもしれない。その後は3-4週間の毛周期を持つことから解釈に当たっては毛周期を考慮する必要があると思われた。セルソーターによるSP細胞の単離は可能であったが、機械的なダメージが認められたので、上皮細胞の大量培養は困難であった。そこで通常の皮膚の細胞を用いて培養条件を検討し、EGF(上皮細胞成長因子)とcholera toxinを添加することによって、従来より長期大量培養できることが判明した。一方、マウスの頬髭から毛乳頭部だけを単離し、毛乳頭細胞を培養する系においてbFGF(塩基性線維芽細胞成長因子)と10%FBS(牛胎児血清)を添加すると、毛乳頭細胞が大量に培養でき、しかも長期に毛包誘導能を維持できることが示唆された。これまでマウスの角化細胞はfeeder細胞がないと増殖しにくいとされていたので、今回の検討により、トランスジェニックマウスなどの解析にも応用できる可能性が示唆された。また毛乳頭細胞は培養すると毛包誘導能が低下することが問題であったが、今回の検討により改善が見られたので、今後はヒトの細胞においても同様であるか検討していきたい。

The skin and dermis are closely related. The cleavage of SP cells in the epidermis of newborns is only 5-10% higher, and decreases rapidly (0.1-0.5%) from the first month after birth. The percentage of SP cells in the newborn dermis increased by 0.1%, while that of hair papilla cells increased by 3.5%. The growth period of the new generation is different from that of the old generation. 3-4 weeks after the hair cycle is considered necessary It is difficult to culture SP cells in large quantities. The culture conditions of normal skin cells were studied, EGF(epithelial cell growth factor) and cholera toxin were added, and the results of long-term mass culture were determined. In addition to bFGF(basic fibroblast growth factor) and 10% FBS (bovine fetal serum), hair papilla cells can be cultured in large quantities and maintained for a long time. The possibility that the keratinized cells of this species may be used in the analysis of this species is demonstrated by the possibility that the keratinized cells of this species may be used in the analysis of this species. The hair follicle induction ability of hair papilla cells in culture is low, and the problem is that the hair follicle induction ability of hair papilla cells in culture is low.