予定外胚葉領域由来全能性幹(ES)細胞からの歯牙の誘導とその組織再生医療への応用

预期外胚层区域的全能干细胞诱导牙齿及其在组织再生医学中的应用

基本信息

  • 批准号:
    16659551
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.11万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    2004
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2004 至 2005
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

アフリカツメガエル胚未分化細胞再集合培養系を用いて以下の検討を行った.アニマルキャップ(AC)をCa^<2+>,Mg^<2+>を含まないSteinberg's solution(SS)中で細胞解離後,activin A(25ng/ml)1時間処理細胞群と未処理群を種々の比率で混合し,Ca^<2+>,Mg^<2+>を含むSS中で再集合体を形成し培養後,組織学的解析、RT-PCR法,in situ hybridization法にて各種遺伝子発現を検討した.また,再集合体を正常胚へ移植し,組織学的ならびに分子生物学的に解析した.1.Activin A処理群:未処理群1:5から形成した再集合体(1:5再集合体)は,培養期間7日では,組織学的に主に軟骨組織から構成され,顎顔面領域ならびに軟骨に発現する遺伝子群の発現を認めた.ISH法の結果,培養期間4日目において,gsc,X-dll4,Sox9,Col2の遺伝子発現の局在を認めた.しかし,Hoxb9の発現は認めなかった.2.1:5再集合体を正常胚(st23)下顎相当部へ移植を行うと,10日目組織は軟骨組織によって構成され,1,4日目移植組織でgsc,X-Hoxa2,X-dll4,Sox9,Col2の発現をを認めた.3.1:5再集合体の正常胚(st23)腹部への移植では,10日目組織には,軟骨組織,筋組織,神経組織,眼球様構造、歯胚様構造を認めgsc,X-Hoxa2,X-dll4,Sox9,Col2発現,歯胚様構造部にはアメロジェニン陽性を認めた.以上の結果再集合培養系を用いてin vitroで未分化細胞から細胞分化と位置情報をコントロールすることができた.次にアフリカツメガエルの結果に基づき,マウスES細胞を用いて以下の検討を行った。方法:フィーダー細胞を用いずLIFを含む無血清ES7培地を用いて未分化性を維持したマウスES-D3細胞を,中胚葉組織誘導能を持つ因子で処理、あるいは腹側化因子で処理を行い、それぞれ胚葉体(embryoid body, EB)を形成させた。続いて、これらEBを再集合させ、さらに培養を行った後、EBを組織学的ならびにRT-PCR法を用いて解析した。結果:4週間培養後の再集合体には、アルシアンブルーならびにII型collagen陽性の軟骨組織を認めた。また、頭部に発現するOTX-2ならびにneural crest形成に関与するAP-2の発現を認めたことから,この再集合体は頭部の位置情報を持つことが明らかとなった。以上のことから、本培養系は,種々の器官発生メカニズムの解明ならびに今後の再生医療に向け、有用なモデルとして発展できると考えられる。
ア フ リ カ ツ メ ガ エ ル embryos undifferentiated cells to set training department を using い て following の 検 line for を っ た. ア ニ マ ル キ ャ ッ プ (AC) を Ca ^ > < 2 +, Mg ^ 2 + < > を containing ま な い Steinberg 's solution (SS) で cells after dissociation, activin A(25ng/ml)1 time treated cell population と untreated population を species 々 <s:1> ratio で mixed と,Ca^<2+>,Mg^<2+>を containing むSS で reaggregates を after forming a <s:1> culture, histological analysis, RT-PCR method,in situ Hybridization method に て various legacy 伝 発 を now son beg し 検 た. ま た, then aggregate を し へ normal embryo transplantation, histological な ら び に molecular biology に parsing し た. 1. Activin A 処 manage group: not 処 principle of 1:5 か ら form し た aggregation (1:5 then aggregate) は again, training during the 7th で は, histological に main に cartilage か ら constitute さ れ, jaw facial areas な ら び に cartilage に 発 now す る heritage 伝 subgroup の 発 を now recognize め た. の ISH method as A result, the training during the 4th item に お い て, GSC, X-ray dll4, S Ox9, Col2 の posthumous son 伝 発 now の bureau in を recognize め た. し か し, Hoxb9 の 発 は now recognize め な か っ た. 2.1:5 to aggregate を gege (st23) jaw line を う quite department へ transplantation と, 10 orders は cartilage tissue に よ っ て constitute さ れ, 1, 4, eye transplant tissue で GSC, X-ray Hoxa2, X-ray dl L4, Sox9, Col2 の 発 now を を recognize め た. 3.1:5 to aggregate の gege (st23) abdomen へ の transplantation で は, 10 organised に は, cartilage, muscle tissue, god 経 organization, eyeball others in structure, 歯 embryo others を recognize め GSC, X-ray Hoxa2, X-ray dll4, Sox9, Col2 発, 歯 embryo to others The structural department is に に アメロジェニ アメロジェニ を positive を confirmed めた. Above の results to set training department を い て in vitro で undifferentiated cells か ら cell differentiation と location intelligence を コ ン ト ロ ー ル す る こ と が で き た. Time に ア フ リ カ ツ メ ガ エ ル の results に づ き, マ ウ ス を ES cells with い て following の 検 line for を っ た. Methods: フ ィ ー ダ ー cells を using い ず LIF を containing む serum-free ES7 petty を with い て undifferentiated sex を maintain し た マ ウ ス を ES - D3 cells, mesoderm groups can induce を hold つ factor で 処, あ る い は ventral change factor で 処 を line い, そ れ ぞ れ germ layer body (embryoid body, EB) を form さ せ た. 続 い て, こ れ ら EB を re-collect さ せ, さ ら に line cultivate を っ た, EB を histological な ら び に を rt-pcr method with い て parsing し た. Results: 4 weeks after incubation の collection again に は, ア ル シ ア ン ブ ル ー な ら び に type II collagen positive の cartilage を recognize め た. ま た, head に 発 now す る working - 2 な ら び に neural crest formation に masato and す る AP - 2 の 発 を now recognize め た こ と か ら, こ の aggregation は の head position information を again hold つ こ と が Ming ら か と な っ た. Above の こ と か ら, this training is は, kind of 々 の organ 発 raw メ カ ニ ズ ム の interpret な ら び に の regeneration in the future medical に け, useful な モ デ ル と し て 発 exhibition で き る と exam え ら れ る.

项目成果

期刊论文数量(26)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Plasminogen activator/plasmin system suppresses cell-cell adhesion of oral squamous cell carcinoma cells via proteolysis of E-cadherin.
  • DOI:
    10.3892/ijo.27.3.693
  • 发表时间:
    2005-09
  • 期刊:
  • 影响因子:
    5.2
  • 作者:
    Y. Hayashido;T. Hamana;Y. Yoshioka;H. Kitano;Koh-ichi Koizumi;T. Okamoto
  • 通讯作者:
    Y. Hayashido;T. Hamana;Y. Yoshioka;H. Kitano;Koh-ichi Koizumi;T. Okamoto
LIF as a mitogen for pluripotent mouse ES cells in a defined serum-free medium without feeder cells. DOI : 10.1290/0502010
LIF 作为多能小鼠 ES 细胞的有丝分裂原,在不含饲养细胞的确定无血清培养基中。
Activin-like signaling activates Notch signaling during mesodermal induction
LIF as a mitogen for pluripotent mouse ES cells in a defined serum-free medium without feeder cells.
LIF 作为多能小鼠 ES 细胞的有丝分裂原,在不含饲养细胞的确定无血清培养基中。
Novel relationship between the antifungal activity and cytotoxicity of marine-derived metabolite xestoquinone and its family
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岡本 哲治其他文献

口腔扁平上皮癌組織におけるインテグリンαv及びβ8発現の免疫組織学的解析
口腔鳞癌组织中整合素αv、β8表达的免疫组织学分析
  • DOI:
  • 发表时间:
    2016
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    櫻井 繁;林堂 安貴;吉岡 幸男;浜名 智昭,坂上 泰士;末松 美玲;岡本 哲治
  • 通讯作者:
    岡本 哲治
神経外胚葉系由来腫瘍における VASCULAR ENDOTHELIAL GROWTH FACTOR(VEGF)およびVEGF受容体遺伝子の発現
神经外胚层源性肿瘤中血管内皮生长因子(VEGF)和 VEGF 受体基因的表达
  • DOI:
  • 发表时间:
    1995
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    坂本 哲彦;岡本 哲治;田中 良治;高田 和彰
  • 通讯作者:
    高田 和彰
Listing All Trees with Specified Degree Sequence
列出具有指定度数序列的所有树
  • DOI:
  • 发表时间:
    2008
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    田口有紀;山崎佐知子;嶋本顕;田原栄俊;岡本 哲治;中野眞一
  • 通讯作者:
    中野眞一
口腔扁平上皮がん細胞株におけるrBC2LCNレクチン認識糖鎖発現細胞の機能解析
口腔鳞状细胞癌细胞系中rBC2LCN凝集素识别糖链表达细胞的功能分析
  • DOI:
  • 发表时间:
    2017
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    中峠 洋隆;山崎 佐知子;赤木 恵理;濱田 充子;虎谷 茂昭;岡本 哲治
  • 通讯作者:
    岡本 哲治
口腔扁平上皮癌の浸潤・増殖におけるHDM2の機能解析
HDM2在口腔鳞状细胞癌侵袭和增殖中的功能分析
  • DOI:
  • 发表时间:
    2017
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    津島 康司;林堂 安貴;坂上 泰士;松岡 美玲;櫻井 繁;岡本 哲治
  • 通讯作者:
    岡本 哲治

岡本 哲治的其他文献

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  • DOI:
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  • 发表时间:
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  • 期刊:
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  • 作者:
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  • 通讯作者:
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無血清再集合培養法を用いたマウスES細胞及びヒト骨髄幹細胞からの顎骨・歯胚誘導
采用无血清再增殖培养法诱导小鼠 ES 细胞和人骨髓干细胞诱导颌骨和牙胚
  • 批准号:
    20659316
  • 财政年份:
    2008
  • 资助金额:
    $ 2.11万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
口腔癌における癌幹細胞の分離・同定と同細胞を標的とした新しい診断・治療法の開発
口腔癌中癌症干细胞的分离和鉴定以及针对这些细胞的新诊断和治疗方法的开发
  • 批准号:
    19390517
  • 财政年份:
    2007
  • 资助金额:
    $ 2.11万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
無血清再集合培養系を用いたマウスES及びヒト骨髄間葉系幹細胞からの顎骨・歯胚誘導
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  • 批准号:
    18659598
  • 财政年份:
    2006
  • 资助金额:
    $ 2.11万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
予定外胚葉領域由来全能性幹(ES)細胞からの歯牙の誘導とその組織再生医療への応用
预期外胚层区域的全能干细胞诱导牙齿及其在组织再生医学中的应用
  • 批准号:
    14657525
  • 财政年份:
    2002
  • 资助金额:
    $ 2.11万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
FGF,FGF結合蛋白およびFGF受容体を標的とした扁平上皮癌の分子標的治療
针对FGF、FGF结合蛋白和FGF受体的鳞状细胞癌分子靶向治疗
  • 批准号:
    14030057
  • 财政年份:
    2002
  • 资助金额:
    $ 2.11万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
FGF、FGF結合蛋白およびFGF受容体を標的とした扁平上皮癌の分子標的治療
针对FGF、FGF结合蛋白和FGF受体的鳞状细胞癌分子靶向治疗
  • 批准号:
    13218084
  • 财政年份:
    2001
  • 资助金额:
    $ 2.11万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
予定外胚葉領域由来全能性幹(ES)細胞からの歯牙の誘導とその組織再生医療への応用
预期外胚层区域的全能干细胞诱导牙齿及其在组织再生医学中的应用
  • 批准号:
    13877341
  • 财政年份:
    2001
  • 资助金额:
    $ 2.11万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
FGF結合蛋白(FGFBP/HBp17)を標的とした扁平上皮癌の分子標的治療
FGF结合蛋白(FGFBP/HBp17)的鳞状细胞癌分子靶向治疗
  • 批准号:
    11140249
  • 财政年份:
    1999
  • 资助金额:
    $ 2.11万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
神経・内分泌・免疫ネットワーク間の情報伝達液性因子を用いた新しいストレス定量法
一种利用在神经、内分泌和免疫网络之间传递信息的体液因子来量化压力的新方法
  • 批准号:
    11877350
  • 财政年份:
    1999
  • 资助金额:
    $ 2.11万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
ヒト唾液腺腫瘍の悪性転換過程におけるFGF受容体遺伝子群のディファレンシャル発現
人唾液腺肿瘤恶变过程中FGF受体基因的差异表达
  • 批准号:
    08265244
  • 财政年份:
    1996
  • 资助金额:
    $ 2.11万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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