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ヒートショックタンパク質阻害剤による温熱・放射線感受性の増感

热休克蛋白抑制剂对热和放射敏感性的敏化

基本信息

批准号：
17659372
负责人：
大西武雄
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Nara Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

目的本研究では温熱処理あるいは放射線照射後に誘導されるアポトーシスシグナル伝達系を抑制しているヒートショックタンパク質(Hsp)を分子制御し、温熱・放射線に対するがん細胞の感受性を高めることを目的とする。Hsp27、Hsp70、Hsp90はアポトーシス実行因子であるCaspase-3の活性化を誘導するApoptosome(ApaS-1/Caspase-9/Cytochrome C複合体)の形成を阻害することが最近報告されつつある。従って、Hsp27、Hsp70、Hsp90を分子制御することにより、温熱あるいは放射線誘導アポトーシスを増強することが可能となる。既に細胞死/細胞生存にかかわるシグナル伝達系で中心的にはたらくPI3-Kの特異的阻害剤であるLY294002の温熱・X線増感効果を明らかにし論文として発表した(Int J Oncol,2006)。さらに予備実験でMAPキナーゼの阻害剤であるPD98059もHspの阻害効果と温熱増感効果があることを見出したので本研究で詳しく解析した。方法(1)ヒトのp53伝子欠損肺がん細胞H1299へ正常型および各種変異型p53伝子を導入し、これらを本研究に用いた。得られた結果がp53遺伝子に依存しているかが判断できる。(2)生存シグナルの阻害剤(MEK阻害剤PD98059)による温熱・X線増感効果をコロニー形成法で調べた。(3)アポトーシス誘導がPD98059により増強されるかどうかをアポトーシス小体検出法あるいは細胞生存関連タンパク質の蓄積誘導をWestern blot法で調べた。結果1.PD98059によって細胞の温熱感受性はp53遺伝子型に依存せず増感された。2.PD98059によって温熱誘導アポトーシスはp53遺伝子型に依存せず増強された。3.温熱処理後、survivinの蓄積誘導が見られたが、PD98059によりそれらは阻害された。4.PD98059は温熱によるhsp27、hsp70の蓄積誘導を阻害した。考察PD98059はps53非依存的塗温熱誘導アポトーシスの増強をもたらし温熱増感剤として有用であることが示唆された。

Objective: To study the molecular control of heat treatment, radiation exposure and induction of HSP in cells. Hsp27, Hsp70, and Hsp90 were recently reported to inhibit the formation of Apotoposome (Apas-1/Caspase-9/Cytochrome C complex) by inducing the activation of Caspase-3. Hsp27, Hsp70, Hsp90 are molecular controlled, warm, and radiation-induced. In addition, the specific inhibitor of PI3-K in the center of cell death/cell survival is LY294002, which is characterized by thermal and X-ray sensitivity (Int J Oncol,2006). This paper presents a detailed analysis of MAP and HSP's effect of thermal sensitivity. Methods (1) The p53 gene was introduced into H1299 cells with normal and variant p53 genes, which were used in this study. The result of the test is p53. (2)The resistance agent (MEK resistance agent PD98059) for survival is adjusted by the method of heat and X-ray sensitization. (3)The expression of PD98059 was detected by Western blot. Results 1. PD98059 cells were thermosensitive and p53 gene dependent. 2. PD98059 is a temperature-induced virus that depends on the p53 gene. 3. After warm treatment, survivin accumulation was induced, PD98059 was inhibited. 4. PD98059 is resistant to thermal induction by hsp27 and hsp70. PD98059 is independent of PS53 and can be used for thermal induction.