培養肺胞上皮細胞気管内注入による肺病変修復促進に関する分子生物学的検索

气管内注射培养肺泡上皮细胞促进肺部病变修复的分子生物学研究

• 批准号: 17659489
• 负责人: 須加原 一博
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: University of the Ryukyus
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659489/
• 关键词: 急性肺障害; 創傷治癒; サイトカイン; 肺胞上皮細胞; 培養細胞; 骨髄幹細胞; 分子生物学; サーファクタント

1.培養肺胞II型上皮細胞気管内投与による投与(培養)細胞の動態-これまでの研究成果から、(1)近交系ラット間の方が細胞正着率が良い(投与細胞の20〜30%)。(2)細胞外マトリックと培養細胞の相互作用が培養細胞機能保持に重要(Engelbreth-Holm-Swarm腫瘍細胞の細胞外のマトリックスがよい)。(3)4-diamino-phenylindole(DAPI)やlipophilic dialkylcarbocyanines(Dil or DiD)を用いて、投与細胞と組織細胞の区別が可能であること、(4)細胞増殖因子であるKGFで、12時間培養細胞を刺激して気管内投与すると、両方の細胞に増殖反応がみられ、投与細胞の約30%が生着すること、(5)KGF投与後2〜3日目に最大増殖能(BrdU取り込み最大)を示し、イオン輸送能もそれとよく相関することなどが明らかになった。2.呼吸不全動物肺での培養細胞気管内投与-エンドトキシン、ブレオマイシンや塩酸による肺障害ラットについて、KGF刺激培養肺胞II型上皮細胞を気管内投与し、その投与細胞の動態と肺病変の変化を検索した。障害肺に肺水腫様変化が強いために、投与細胞が肺胞レベルまで到達しにくく、生着率が悪い。そのため、障害後2〜3日目に人工サーファクタントを投与してみた。少し生着率が高くなった。最適な投与方法や時期について検討し、5〜7日目に投与すると効果大。3.KGFおよび人工サーファクタントの併用効果-上記障害ラット肺について、KGFと人工サーファクタントを同時に投与し、肺水腫液の吸収度を検索すると、吸収促進が示唆された。この方法を応用し研究を進めている。4.骨髄幹細胞からのlung stem cellsの分離と病変修復への応用-GFPラットに5-FUを投与し、骨髄を刺激し、骨髄細胞と採取。培養し血球成分を除いた骨髄幹細胞を静脈投与し、肺胞への生着度を検索。ブレオマイシン肺傷害への生着度を比較検討し、傷害肺への生着が高いことがわかった。さらに、SP-A抗体による染色を行うと、血管から肺組織へ遊走した骨髄細胞の中に、SP-A抗体に染色される細胞があった。肺胞II型上皮細胞に特異的なSP-C mRNAをin situ hybridization法で検索すると、肺胞内のグリーンの上皮細胞に発現しており、肺胞II型上皮への分化と考えられた。現在これらがKGFに反応する検索中。反応する場合は、病変修復作用があるか検索を計画している。特に、培養細胞を気管内投与し、骨髄細胞を血管内投与することで、修復促進できるものと期待される。5.FGF-10およびFGF-18による障害抑制-FGF-10およびFGF-18が新たな肺胞II型上皮細胞増殖因子として作用するため、KGFとの相乗効果や細胞増殖による障害抑制効果についても検索を進めている。

1. Cultivate 気 tube for cell type II lung epithelial cells and に よ る cast with (training) cells の dynamic - こ れ ま で の research か ら, (1) inbred line ラ ッ ト の party が cell dish rate between good が い (cast and cell の 20 ~ 30%). (2) the extracellular マ ト リ ッ ク と culture cell の interaction が culture cell function maintain に important (Engelbreth - Holm - Swarm swollen sores cells の extracellular の マ ト リ ッ ク ス が よ い). (3) 4-diamino-pheny-lindole (DAPI)やlipophilic dialkylcarbocyanines(Dil or DiD) を い て と organization, cast and cells の difference が may で あ る こ と, (4) cells raised colonization factor で あ る KGF で, 12 time train を stimulate cell し て 気 tube pitch and す る と に raised colonization, struck の cells against 応 が み ら の about 30% が れ, cast and cells with す る こ と, (5) KGF cast and mesh に biggest rights issue 2 ~ 3 days after the colonization The energy (BrdU is taken as the maximum of 込み)を indicates を, and the <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> transmission energy それとよく それとよく is related to する する とな とな が が and が が indicate ら になった になった. 2. Respiratory insufficiency animal lungs で の culture cell 気 tube made with - エ ン ド ト キ シ ン, ブ レ オ マ イ シ ン や acid salt に よ る lung handicap of ラ ッ ト に つ い て, KGF stimulate を culture cell type II lung epithelial cells 気 tube pitch and し and そ の cast and cell の dynamic と lung disease - の variations change を 検 cable し た. Obstruction of lung に pulmonary edema changes が strong <s:1> ために, efferent cells が pulmonary cells レベ まで まで reach にくく, growth rate が悪 に. Youdaoplaceholder0 ため, 2 to 3 days after the injury, に, サ, ファ, タ, トを, トを and てみた. The survival rate of the few is が high くなった. The most suitable period for な investment and methods is や. The effect of に て検 て検 て検 investment and に investment within 5 to 7 days is greater. 3 KGF お よ び artificial サ ー フ ァ ク タ ン ト の and sharper fruit - written handicap of ラ ッ ト lung に つ い て, KGF と artificial サ ー フ ァ ク タ ン ト を に cast and し and pulmonary edema fluid の 収 degrees を 検 cable す る と, aspiration 収 promote が sucking さ れ た. The <s:1> を応 method を応 uses the を to study を into めて る る る. 4. Bone marrow stem cells 応 ら <s:1> lung stem cells <e:1> isolation と lesion repair へ 応 応 administration of -GFPラットに5-FUを to <s:1>, bone marrow を stimulation of <s:1>, bone marrow cells と taken. The components of cultured blast blood cells を in addition to を た bone marrow stem cells を are intravenously administered to the bulbs and lung cells へ, which are attached with を検 cords. ブ レ オ マ イ シ ン lung damage へ の を compared with degrees beg し 検, damage lung へ の with high が い こ と が わ か っ た. さ ら に, SP - A antibody に よ る dyeing line を う と, blood vessels, か ら lung tissue へ wander し た に in bone marrow cells の, SP - A antibody に dyeing さ れ る cells が あ っ た. Cell type II lung epithelial cells に specific な SP - C mRNA を the in situ hybridization method で 検 cable す る と, lung intracellular の グ リ ー ン の epithelial cells に 発 now し て お り, lung cell type II epithelial へ の differentiation と exam え ら れ た. Now 応する検 れらがKGFに is in the 応する検 search. Anti-応 する situation, disease repair effect がある 検 検 request を plan る て る る る. に, culture cell を 気 tube pitch and し and bone marrow cells を vascular cast and す る こ と で, repairing and promote で き る も の と expect さ れ る. 5. FGF - 10 お よ び FGF - 18 に よ る handicap of inhibition of FGF - 10 お よ び FGF - 18 new た が な cell type II lung epithelial cells raised colonization factor と し て role す る た め, KGF と の phase 乗 unseen fruit や cells raised colonization に よ る handicap of inhibition of unseen fruit に つ い て も 検 cable を into め て い る.

项目成果

Mu, and delta, but not kappa, opioid agonists induce spastic paraparesis after a short period of spinal cord ischemia in rats

Mu 和 delta，但不是 kappa，阿片类激动剂在大鼠短暂脊髓缺血后可诱发痉挛性截瘫

• 发表时间: 2006
• 期刊: British Journal of Anaesthesia 96・1
• 作者: Kakinohana M;et al.
• 通讯作者: et al.

Differential effects of vitamin A on fetal lung growth and diaphragmatic formation in nitrogen-induced rat model

维生素 A 对氮诱导大鼠模型胎肺生长和膈肌形成的不同影响

• 发表时间: 2005
• 期刊: Pulmonary Pharmacology and Therapeutics 18・3
• 作者: Oshiro T;Asato Y;Sakanashi M;Ohta T;Sugahara K
• 通讯作者: Sugahara K

麻酔科学レビュー2006、新しい人工呼吸

2006 年麻醉学评论，新的人工通气

• 发表时间: 2006
• 作者: S Nakamura;M Kakinohana;K Sugahara;et al.;須加原一博
• 通讯作者: 須加原一博

Neuroprotective effect of epidural electrical stimulation against ischemic spinal cord injury in rats.

硬膜外电刺激对大鼠缺血性脊髓损伤的神经保护作用。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Anesthesiology 103
• 作者: Kakinohana M;et al.;Kakinohana et al.
• 通讯作者: Kakinohana et al.

Transvenous implantation of bone marrow stromal cells to bleomycin-induced lung injury model in rats.

骨髓基质细胞经静脉植入博莱霉素诱导的大鼠肺损伤模型。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of Japanese Medical society for Biological Interface 36
• 作者: Tokumine J;et al.
• 通讯作者: et al.