遺伝子操作動物を用いた性比決定機構の解析

利用基因工程动物分析性别比决定机制

• 批准号: 18650111
• 负责人: 岡部 勝
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18650111/
• 关键词: 性比; 精子; 卵子; 受精; GFP; X染色体; Y染色体

性比のかたよりは精子産生時のX精子、Y精子の数に偏りに原因があるかどうかをまず検討した。この部分は精子を用いたFISHを行いX精子とY精子の分別により行なった。その結果、雄が多く生まれるC57BL/6の系のマウスの雄の精巣上体に存在するX精子とY精子の比に性差は存在しないことが明らかになった。さらに受精時にX精子とY精子の受精能に偏りがあるためなのかを知るために、体外受精系における検討を行なった。着床前における性比決定のためのツールとして申請時点ではX染色体にGFP遺伝子が組み込まれた遺伝子操作マウス(X-GFPマウス)を準備していた。X-GFPの雄マウスを用いて受精を起こさせると雌性の胚のみがGFPにより緑色の蛍光を発することから、着床前に性の分別が可能である。そこで遺伝子操作GFP雄からの精子を用いて体外受精を行い、それらをブラストシスト期になるまで培養して雌雄の判別を行った。その結果、体外受精の条件下では雌雄の性比に偏りが出ないことが明らかになった。この間、雌雄の比較を完全に行うためには、別途Y-GFPマウスを作製することにより、雄胚だけが緑色になるという系と組み合わせることが良いということがわかった。そこで全身からGFPを発現するようにCAGプロモーターに結合したGPF遺伝子を構築し、これをY染色体上のEif2s3y遺伝子の下流にノックインしてY-GFPマウスの作製を試みた。これまでに4クローンの組換え体ES細胞の樹立に成功した。それらのES細胞を元に5匹のキメラマウスを作製し、Y-GFPキメラマウスを作製した。

The sex ratio of <s:1> がある たよ たよ <s:1> に when the sperm is produced, the number of <s:1> X sperm and Y sperm に is に higher than that of <s:1> に. The reason is がある う う をまず検 をまず検. The <s:1> <s:1> part of the <s:1> sperm を is used in the を たFISHを line. The なった X sperm と and Y sperm によ are respectively used in the によ line なった. そ の results, more than the male が く ま れ る C57BL / 6 の is の マ ウ ス の male の fine 巣 upper に exist す る X sperm と Y sperm の exist sex differences than に は し な い こ と が Ming ら か に な っ た. さ ら に fertilization に X sperm と Y sperm の fertilization can slant に り が あ る た め な の か を know る た め に, in vitro fertilization に お け る 検 line for を な っ た. Before implantation に お け る sex than the decision の た め の ツ ー ル と し て application point で は X chromosome に GFP heritage 伝 son が group み 込 ま れ た heritage 伝 sub operations マ ウ ス (X - GFP マ ウ ス) を prepare し て い た. X-ray GFP の male マ ウ ス を with い て fertilization を up こ さ せ る と の female embryo の み が GFP に よ り green の 蛍 light を 発 す る こ と か ら respectively, before implantation に の が may で あ る. そ こ で heritage 伝 sub operations GFP male か ら の sperm を with い て in vitro fertilization を い, そ れ ら を ブ ラ ス ト シ ス ト period に な る ま で cultivate し male and female line discriminant を の っ て た. The results of そ そ show that under in vitro fertilization <s:1> conditions, the sexual ratio of で になった to male and female is に biased. Youdaoplaceholder3 results in な とが とが とが とが and ら になった. Comparison, male and female の こ の を line completely に う た め に は, don't * Y - GFP マ ウ ス を cropping す る こ と に よ り, male embryo だ け が green に な る と い う department と group み close わ せ る こ と が good い と い う こ と が わ か っ た. そ こ で systemic か ら GFP を 発 now す る よ う に the CAG プ ロ モ ー タ ー に combining し た GPF heritage 伝 を build し, こ れ を Y chromosome の Eif2s3y posthumous son 伝 の obscene に ノ ッ ク イ ン し て Y - GFP マ ウ ス の cropping を try み た. <s:1> れまでに4 <s:1> ロ ロ ロ ロ <s:1> <s:1> え in vivo ES cell <s:1> establishment に successful <s:1> た. Youdaoplaceholder0 それら ES cell を elements に5 <s:1> キメラ キメラ ウスを ウスを to prepare <s:1>, Y-GFPキメラ ウスを ウスを to prepare た.

项目成果

遺伝子操作マウスを用いて見る卵子と精子の相互作用

使用基因工程小鼠研究卵子和精子之间的相互作用

• 发表时间: 2006
• 期刊: 生化学 78
• 作者: 井上 直和;ほか;岡部 勝
• 通讯作者: 岡部 勝

新編精子学

新版精子学

• 发表时间: 2006
• 作者: 毛利秀雄;星 元紀監修;森澤正昭;星 和彦;岡部 勝編
• 通讯作者: 岡部 勝編

Aberrant Distribution of ADAM3 in Sperm from Both Angiotensin-Converting Enzyme (Ace)- and Calmegin (Clgn)-Deficient Mice.

ADAM3 在血管紧张素转换酶 (Ace) 和钙镁蛋白 (Clgn) 缺陷小鼠精子中的异常分布。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Biol Reprod 75
• 作者: Yamaguchi R;Yamagata K;Ikawa M;Moss SB;Okabe M
• 通讯作者: Okabe M