マウス精子上の卵子認識レセプタ-

小鼠精子上的卵子识别受体

• 批准号: 02222206
• 负责人: 岡部 勝
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02222206/
• 关键词: マウス; 精子; 卵子; 相互認識; λgt11; 精巣cDNA

マウス精子上の卵子認識レセプタ-と結合するモノクロ-ン抗体OBF13を用いてマウス精巣のcDNAライブラリ-の中から反応するクロ-ンを見いだすべく検討を行った。λgt11の系に組み込まれたcDNAライブラリ-は筑波大学の馬場忠博士より提供されたものを用い総数60万クロ-ンをスクリ-ニングを供した。しかし、OBF13に対して反応するクロ-ンを見いだすことはできなかった。OBF13抗原は蛋白分解酵素処理によって失活するので抗原に蛋白質が含まれると考えられるが、今回の結果はOBF13の認識エピト-プが蛋白質以外の部分を認識するかあるいは精子表面上でだけ形成されるような立体構造を認識していることを示している。今後はOBF13抗原に対するポリクロ-ナルな抗体を作成し、もう一度ライブラリ-のスクリ-ニングを試みる予定である。また、抗原のアミノ酸の一次構造を決定する事も試み、成功すればDNAプロ-ブを用いたスクリ-ニングを行いたい。先体反応を終えたヒト精子とのみ反応するモノクロ-ン抗体MH61を用いてやはりλgt11に組み込まれたヒト精巣cDNAライブラリ-(クロ-ンテック社)から総数60万クロ-ンをスクリ-ニングしたがOBF13と同様MH61に対して反応するクロ-ンを見いだす事はできなかった。MH61が精子の受精能と結び付いていることを確実に示すために以下のような検討を加えた。MH61抗体をポリスチレンビ-ズの上に結合させてヒト精子と培養した。ビ-ズに結合した精子をマニピュレ-タ-で透明帯を除去したハムスタ-の卵子表面にもって行き卵子への結合能をビ-ズに結合していなかった精子との間で比較を行ったところ前者のような精子は卵子とよく結合したが後者はほとんど結合できずMH61抗体による受精可能精子の選別の可能性が示唆された。

Ovum recognition on sperm is performed using the cDNA library of OBF13.λgt11 and its related gene sequences are provided by Dr. Tadashi Nakamura of the University of Tsukuba. The first time I saw you, I was in the middle of the night. OBF13 antigen is inactivated by proteolytic enzyme treatment. The protein content of OBF13 antigen is examined. The results show that the protein content of OBF13 is recognized by the protein content of OBF13. The protein content of OBF13 is determined by the three-dimensional structure of OBF13. In the future, we will try to establish the antibody against OBF13 antigen. The primary structure of the antigen was determined by the test and the success of the DNA test. Precursor anti-sperm antibody MH61 was used in the middle of the reaction. λgt11 was used in the formation of the sperm cDNA. The total number of anti-sperm antibodies was 600,000. OBF13 was used in the same reaction as MH61. MH61 sperm fertilization can be achieved through the following methods: MH61 antibody can be used in sperm culture. The sperm binding ability of the egg is compared with that of the sperm binding ability of the egg.

项目成果

M.Okabe,S.MAtzno,M.Nagira,T.Mimura,Y.Kawai,T.Mayumi: "A human sperm antigen possibly involved in binding and/or fusion with zonaーfree hamster eggs" Fertility and Sterility. 54. 1121-1126 (1990)

M. Okabe、S. MAtzno、M. Nagira、T. Mimura、Y. Kawai、T. Mayumi：“人类精子抗原可能参与与无透明带仓鼠卵的结合和/或融合”生育力和不育54。 1121-1126 (1990)

M.Okabe,S.Matzno,Y.Xing,M.Nagira,Y.Kohama and T.Mimura: "An attempt to evaluate human sperm fertilizing ability with a monoclonal antibody" Serono Symposis,USA Fertilization in Mammals,. 432-432 (1990)

M.Okabe、S.Matzno、Y.Xing、M.Nagira、Y.Kohama 和 T.Mimura：“尝试用单克隆抗体评估人类精子受精能力”Serono Symposis，美国哺乳动物受精。