マウス精子上の卵子認識レセプタ-

マウス精子に対するモノクロ-ン抗体OBF13を作製しこの抗体を用いて様々な検討を行ったところ、精子と卵子の結合/融合のメカニズムを探るうえで、興味ある知見が得られた。ハムスタ-の卵子から透明帯を人工的に取り除くと、異種の精子とも融合できるようになる。そこで、マウスの卵とハムスタ-の卵から透明帯を取り除き、OBF13の存在化で、マウス精子を加えたところ、マウス卵との融合は強く阻害されたが、ハムスタ-卵との融合はほとんど阻害されないことがわかった。体外受精に適したメディウムの組成は、種によって少しづつ異なっているので、異種間での融合を行なう場合、そのメディウムの組成を精子にあわせるのか、卵子にあわせるのか、あるいはその中間が良いのか譲しい問題である。我々は、卵子にあわせたメディウムを使用したが、そのことによる影響はなかったといえる。すなわち、マウス精子-ハムスタ--卵子の組み合わせだと最適メディウムの不一致のほかに、本来のレセプタ-でないものと結合しなければならないので、融合を起こすための条件としてはマウス-マウスの系に劣っているはずである。にも関わらず、マウス-ハムスタ-の系では有為な阻害が認められなかった。これだけで断定的な結論は出せないものの、ハムスタ-の卵子が異種の精子とも融合できるのは、何か種の確認を行なうためのステップが弱いか、欠落しているのではないかと疑わせる。OBF13がどのような物質を認識しているのか現在検討中であるが、界面活性剤を用いないと可溶化されないことや、SDS-ポリアクリルアミド電気泳動後にニトロセルロ-ス紙に転写し、イムノブロットを行なっても、うまく検出されないことが、研究難しくしている。抗原性を残したままの可溶化が、今後の課題である。

マウス精子に対するモノクロ-ン抗体OBF13を作製しこの抗体を用いて様々な検討を行ったところ、精子と卵子の結合/融合のメカニズムを探るうえで、興味ある知見が得られた。ハムスタ-の卵子から透明帯を人工的に取り除くと、異種の精子とも融合できるようになる。そこで、マウスの卵とハムスタ-の卵から透明帯を取り除き、OBF13の存在化で、マウス精子を加えたところ、マウス卵との融合は強く阻害されたが、ハムスタ-卵との融合はほとんど阻害されないことがわかった。体外受精に適したメディウムの組成は、種によって少しづつ異なっているので、異種間での融合を行なう場合、そのメディウムの組成を精子にあわせるのか、卵子にあわせるのか、あるいはその中間が良いのか譲しい問題である。我々は、卵子にあわせたメディウムを使用したが、そのことによる影響はなかったといえる。すなわち、マウス精子-ハムスタ--卵子の組み合わせだと最適メディウムの不一致のほかに、本来のレセプタ-でないものと結合しなければならないので、融合を起こすための条件としてはマウス-マウスの系に劣っているはずである。にも関わらず、マウス-ハムスタ-の系では有為な阻害が認められなかった。これだけで断定的な結論は出せないものの、ハムスタ-の卵子が異種の精子とも融合できるのは、何か種の確認を行なうためのステップが弱いか、欠落しているのではないかと疑わせる。OBF13がどのような物質を認識しているのか現在検討中であるが、界面活性剤を用いないと可溶化されないことや、SDS-ポリアクリルアミド電気泳動後にニトロセルロ-ス紙に転写し、イムノブロットを行なっても、うまく検出されないことが、研究難しくしている。抗原性を残したままの可溶化が、今後の課題である。