エリスロポイエチン産生機構の尿中酸素濃度感受性仮説の検証

促红细胞生成素生成机制的尿氧浓度敏感性假说的验证

• 批准号: 18659245
• 负责人: 根東 義明
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659245/
• 关键词: エリスロポイエチン; 酸素濃度; 尿中落下細胞培養系; 微小単離尿細管灌流; 近位尿細管; 移植・再生医療; 細胞・組織; 生理学; タンパク質; 発生・分化

エリスロポイエチン産生細胞をマウス腎近位尿細管の微小灌流実験系で2日以上の長時間にわたり灌流維持し、管腔内の酸素濃度を低下させた時に起こると予想されるエリスロポイエチン産生の増強を観察しようとしたが、残念ながら研究期間中に安定した定常的長時間灌流を実現できなかった。そこで、ヒト尿中落下尿細管培養系の尿細管細胞単層上皮培養系を用い、エリスロポイエチン産生の有無を確認し、研究に利用できるかどうかを検討した。その結果、培養された尿細管細胞単層上皮系中に、胞体が顕微蛍光抗体法でエリスロポイエチン要請に染色される、尿細管細胞よりもやや大きめの細胞の同定に成功した。この細胞は、ヒト尿中落下細胞培養の際には、当初明確に同定される細胞としては観察されないが、約14日間の培養後、近位尿細管由来培養細胞のようなスピンドル型ではなく、比較的卵円形の大きめの細胞として同定された。本研究計画の主要テーマである尿中酸素濃度感受性仮説を検証するため、尿細管上皮側に相当する培養液の酸素濃度を低下させ、エリスロポイエチンの産生量を培養細胞内のEPOのRNA産生量で確認したところ、増加の傾向は見られたが有意な増加とは判断しがたかった。一方、低酸素状態と同様の条件を作ると考えられるコバルトの投与を行ったところ、エリスロポイエチンの産生量は増加していると考えられた。以上のことから、尿中落下細胞培養系において、エリスロポイエチン産生細胞がヒトではほぼ初めて培養細胞として同定され、その産生量は周囲の酸素濃度の低下に反応すると推察されたが、今回の研究成果では残念ながらその結論を得るには至らなかった。今後引き続き研究を進め、今回観察されたエリスロポイエチン産生の増強傾向が、尿中の酸素濃度による影響かどうかを明確にできるよう、研究手法の再検討を加えていきたい。

エ リ ス ロ ポ イ エ チ ン cells を マ ウ ス renal proximal tubule urine の tiny perfusion be で 験 department more than 2 days の long に わ た り perfusion maintain し, tube cavity の acid levels low を さ せ た に up こ る と to think さ れ る エ リ ス ロ ポ イ エ チ ン の raised strong を 観 examine し よ う と し た が, residual な が ら に stable during the study period し た long constant Intermittent perfusion を occurrence で な な な った った. そ こ で, ヒ ト urine drop urine tube cultivation is の tubule epithelial cells 単 layer culture system を い, エ リ ス ロ ポ イ エ チ ン produce の に を confirm し, researchers using で き る か ど う か を beg し 検 た. そ の results and cultivate さ れ た urine tubule epithelial cells 単 layer of に, cell body が 顕 micro 蛍 light antibody technique で エ リ ス ロ ポ イ エ チ ン to please に dyed さ れ る, urine tubule cells よ り も や や big き め の の cells with fixed に successful し た. こ の cell は, ヒ ト urine drop cell culture の interstate に は, at the beginning with clear に さ れ る cells と し て は 観 examine さ れ な い が, about 14 day の cultivation, proximal tubule urine after origin cells の よ う な ス ピ ン ド ル type で は な く, comparative big image of eggs has drifted back towards ¥ の き め の cells と し て be さ れ た. This research project main テ の ー マ で あ る uric acid levels in susceptibility 仮 said を 検 card す る た め, urine tubule epithelial side に quite す の る cultures of low concentration of acid element を さ せ, エ リ ス ロ ポ イ エ チ ン discharge の を culture cells の EPO の RNA production で confirm し た と こ ろ, rights and の tendency は see ら れ た が intentionally な raised plus と は judgment し が た Youdaoplaceholder0 った. With others in one party state, low acid と の condition を る と exam え ら れ る コ バ ル ト の cast with を っ た と こ ろ, エ リ ス ロ ポ イ エ チ ン discharge の は raised plus し て い る と exam え ら れ た. Above の こ と か ら fall in cell culture system, urine に お い て, エ リ ス ロ ポ イ エ チ ン cells が ヒ ト で は ほ ぼ early め て culture cell と し て with fixed さ れ, そ discharge の は weeks 囲 の acid element concentration low の に 応 す る と push examine さ れ た が, today back to の research で は remnants read aloud な が ら そ の conclusion を must る に は to ら な か っ た. Future lead き 続 を き research into め and examines this back 観 さ れ た エ リ ス ロ ポ イ エ チ ン の raised strong tendency が, urine の acid levels に よ る influence か ど う か を clear に で き る よ う, research technique の again beg を 検 え て い き た い.

项目成果

Accurately Diagnosing Alport Syndrome Based on the Findings of Stained Cultured Cells with Collagen Type4 Alpha Chains Obtained from Voided Human Urine

基于从人尿中获得的 4 型胶原蛋白 α 链对培养细胞进行染色的结果，准确诊断 Alport 综合征

• 发表时间: 2007
• 作者: C N Inoue;他;熊谷 直憲
• 通讯作者: 熊谷 直憲

Tonsillectomy in the treatment of pediatric Henoch-Schonlein nephritis

扁桃体切除术治疗小儿过敏性肾炎

• 发表时间: 2007
• 期刊: Clin Nephrol 67
• 作者: C N Inoue;他
• 通讯作者: 他

Molecular pathogenesis of pseudohypoaldosteronism type II:: Generation and analysis of a Wnk4D561A/+ knockin mouse model

• DOI: 10.1016/j.cmet.2007.03.009
• 发表时间: 2007-05-01
• 期刊: CELL METABOLISM
• 影响因子: 29
• 作者: Yang, Sung-Sen;Morimoto, Tetsuji;Uchida, Shinichi
• 通讯作者: Uchida, Shinichi