サイトカインシグナル抑制因子の新規機能の解析に関するRNA干渉法の応用

应用RNA干扰方法分析细胞因子信号抑制因子的新功能

• 批准号: 18659543
• 负责人: 花澤 重正
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659543/
• 关键词: サイトカイン; シグナル伝達; 遺伝子発現; 炎症反応; SOCS-3; RNA干渉; SOCS; siRNA; RNAi干渉; 相互作用蛋白質

SOCS-3はJAKキナーゼ活性を抑制することで種々のサイトカインシグナル伝達を阻害することが明らかなことから、LIF刺激によるJAKの基質であるSTATのリン酸化を指標にSOCSのJAKキナーゼ活性抑制能が消失しているか否かについてsiRNA導入細胞を用いウエスタンブロット解析で調べた。その結果、SOCS-3ノックダウン細胞におけるSTAT-3リン酸化の抑制とSTAT-3転写の抑制を認めた。これらの結果はSOCS-3のRNA干渉法実験系が確立できたことを強く示唆した。私共は既にSOCS-3が細胞周期調節性転写因子DP-1と相互作用し、G1期からS期への移行を阻害し、細胞増殖を抑制するという興味ある知見を得ている。そこで、このSOCS-3のDP-1抑制能をSOCS-3-siRNAが干渉することができるかについてサイトフローメーターを用い、その細胞周期の遅延干渉作用について、さらに、サイクリン転写活性の抑制干渉作用について調べたところ、SOCS-3-siRNAはHEK細胞のG1-S期への明らかな遅延干渉作用を発現した。また、有意のサイクリン転写活性の抑制干渉作用も認められた。以上の結果から、SOCS-3-siRNAの細胞分化制御、発癌の制御や癌治療薬などへの新たな研究の方向性が示唆された。また、SOCS-3の新たな機能についての検索並びに解析するためのRNA干渉法を確立することができたものと考える。

SOCS-3 inhibits JAK activity, and the expression of JAK is inhibited by LIF stimulation. SOCS-3 inhibits JAK activity by LIF stimulation. SOCS-3 inhibits JAK activity by LIF stimulation. The results showed that SOCS-3 could inhibit STAT-3 acidification and STAT-3 transcription. The results showed that SOCS-3 RNA interference method was established. SOCS-3 interacts with DP-1, a cell cycle regulator, and inhibits cell proliferation from G1 to S. SOCS-3 and DP-1 inhibit the activity of SOCS-3-siRNA, and SOCS-3-siRNA inhibits the activity of SOCS-3-siRNA in HEK cells during G1-S phase. The inhibition of the activity of the active substances by the active substances was studied. These results indicate that SOCS-3-siRNA can inhibit cell differentiation, prevent cancer, and provide new research directions for cancer therapy. SOCS-3 's new features include the detection and analysis of RNA interference.

项目成果

Adiponectin inhibits induction of TNF-alpha/RANKL-stimulated NFATcl via the AMPK signaling.

脂联素通过 AMPK 信号传导抑制 TNF-α/RANKL 刺激的 NFATcl 的诱导。

• 发表时间: 2008
• 期刊: FEBS Letter 582
• 作者: Yamaguchi N;Kukita T;Li YJ;Kamio N;Fukumoto S;Nonaka K;Ninomiya Y;Hanazawa S;Yamashita Y
• 通讯作者: Yamashita Y

Adiponectin inhibits osteoclast formation stimulated by lipopolysaccharide from Actinobacillus actinomycetemcomitans.

• DOI: 10.1111/j.1574-695x.2006.00164.x
• 发表时间: 2007-02
• 期刊: FEMS immunology and medical microbiology
• 作者: N. Yamaguchi;T. Kukita;Yin-Ji Li;Jose Guillermo Martinez Argueta;Toshiyuki Saito;S. Hanazawa;Y. Yamashita

Induction of Porphyromonas gingivalis GroEL signaling via binding to Toll-like receptors 2 and 4

• DOI: 10.1111/j.1399-302x.2006.00286.x
• 发表时间: 2006-08-01
• 期刊: ORAL MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
• 作者: Argueta, J. G. M.;Shiota, S.;Hanazawa, S.
• 通讯作者: Hanazawa, S.