课题基金 / 基金详情

原子間力顕微鏡による蛋白質複合体の効率的観察法の開発

原子間力顕微鏡による蛋白質複合体の効率的観察法の開発
使用原子力显微镜开发蛋白质复合物的有效观察方法
批准号：
19659067
负责人：
五十嵐 道弘
金额：
$2.05万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2007 至 2008
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659067/
关键词：
原子間力顕微鏡蛋白質複合体分子イメージング膜蛋白質細胞内情報伝達バキュロウイルス組換え蛋白質Sf9細胞ミオシンVカルモジュリンシンタキシンアイソフォーム

项目摘要

项目成果

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蛋白質複合体の作成については、バキュロウイルスの発現ベクター系を用いてこれを哺乳動物株細胞に導入する方法を併用した。導入した系には蛍光蛋白質GFP融合体を結合させ、特に膜蛋白質でもできる系を使用した。この系で、膜結合部位と膜外表、細胞内のアダプター分子結合部位を一貫して制御できた。すなわち、細胞外に接着分子結合部位を導入し、この発現分子をクラスターさせて融合蛋白質を可視化することに成功した。この系を原子間力顕微鏡に導入したが、発現量が十分な解像力を呈するほどには得られなかった。またタグとの相互作用が十分に強くなかったと思われるため、配列はまだ不完全であった。すなわち、部分的にそのような分子複合体と思われる像があったが、頻度が少ないために形態学的にそろった可視化には更なる生化学的手法の改良が必要と思われた。但し、膜蛋白質及びその細胞内情報伝達部位を一貫して可視化する方法を得た点、バキュロウイルス-昆虫細胞系での大量蛋白質産生と光学的可視化が可能な哺乳動物細胞系を連動させた発現系の構築の成功には大きな意義があったといえる。なおこの系の構築には、代表者の研究室の武内恒成准教授の協力を得た。分担者牛木の原子間力顕微鏡についても引き続き、バードウェア面、ソフトウェア面での画像解析の解像度上昇と操作簡便化に一定の改良が見られた。これによって、代表者らの研究結果との組合せで、萌芽研究としての目的で一定の結果は到達したと考えられるが、さらなる両者の共同で更なる改良が必要であることを確認した。
期刊论文(16)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Systematic identification of the proteins that operate the growth cone activity
系统鉴定控制生长锥活性的蛋白质
DOI： --
发表时间： 2007
期刊：
影响因子： --
作者： [Nozumi M, Igarashi M]
通讯作者： Igarashi M
Establishment and characterization of monoclonal and polyclonalantibodies against human intestinal fatty acid-binding protein (I-FABP)using synthetip regional peptides and recombinant I-FABP.
使用合成末端区域肽和重组 I-FABP 建立抗人肠脂肪酸结合蛋白 (I-FABP) 的单克隆和多克隆抗体并进行表征。
DOI： --
发表时间： 2008
期刊： J Im加unoassay Immunochem 29
影响因子： --
作者： [Kajiura s, Yashiki T, Funaoka H, 他, 10名中8番目(代表者)]
通讯作者： 10名中8番目(代表者)
Atomic force microscopy for imaging human metaphase chromosomes
DOI： 10.1007/s10577-008-1241-7
发表时间： 2008-05-01
期刊： CHROMOSOME RESEARCH
影响因子： 2.6
作者： [Ushiki, Tatsuo, Hoshi, Osamu]
通讯作者： Hoshi, Osamu
神経軸索の成長シュミレーシヨ・ンの開発
神经轴突生长模拟的发展
DOI： --
发表时间： 2008
期刊：
影响因子： --
作者： [小林太一朗, 野住素広, 寺島健史五十嵐道弘, 赤澤宏平]
通讯作者： 赤澤宏平
共 16 条
    成長円錐のプロテオミクスに基づく新規軸索ガイダンス分子受容体の発見
    • 批准号：
      16015240
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $3.78万
    • 财政年份：
      2004
    • 负责人：
      五十嵐 道弘
    • 依托单位：
      Niigata University
    カルモジュリン結合蛋白質によるシンタキシン機能のCa^<2+>依存性制御の解析
    • 批准号：
      16044216
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $3.84万
    • 财政年份：
      2004
    • 负责人：
      五十嵐 道弘
    • 依托单位：
      Niigata University
    プロテオミクスによる成長円錐からシナプス終末への分子過程の解明
    • 批准号：
      15029218
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $4.1万
    • 财政年份：
      2003
    • 负责人：
      五十嵐 道弘
    • 依托单位：
      Niigata University
    成長円錐退縮の分子機構における逆行性モーター分子の原子間力顕微鏡を用いた役割解析
    • 批准号：
      14658248
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额：
      $2.24万
    • 财政年份：
      2002
    • 负责人：
      五十嵐 道弘
    • 依托单位：
      Niigata University
    海外基金