特異的分子プローブの開発によるexocytosisの分子機構の解明

通过开发特异性分子探针阐明胞吐作用的分子机制

• 批准号: 09273206
• 负责人: 五十嵐 道弘
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09273206/
• 关键词: Ca^<2+>チャネル; 成長円錐; 情報伝達系; シナプス形成; 開口放出; C-キナーゼ; カルパイン

神経成長円錐における細胞間相互作用とそれに基づく細胞内情報伝達系の研究を継続して行い、以下の知見を得た。a.成長円錐にはシナプス終末に比べて、L型Ca^<2+>チャネルが高密度に存在していることを証明した。その生理的意義を明らかにすべく、単離成長円錐で生化学的解析を続け、このチャネルの活性化が、1)C-キナーゼ依存症のMARCKS protein,GAP-43の蛋白リン酸化と、2)カルパインの活性化に基づく脳スペクトリンの分解を引き起こすことを証明した。これらの反応に基づいて、膜骨格などの蛋白の分布に変化が生ずることを確認した。これらを総合すると、L型チャネルの活性化によって、C-キナーゼ系とカルパイン系が成長円錐の異なるドメインで作用することを強く示唆する結果を得た。b.成長円錐におけるシナプス終末への変化の過程をシナプス関連蛋白に着目して行っているが、今年はSNARE系(ATP依存性)とrab3A系(GTP依存系)の関連について、強制的に開口放出を引き起こすクモ毒素ラトロトキシンを用いて検討した。その結果、成長円錐ではrabphilin,rab-GEPの2種類の蛋白がきわめて少量で、rab3Aサイクリングが不完全であることを見出した。これらの蛋白を遺伝子的に作成し成長円錐に導入すると、成長円錐でもシナプスに近い効率で、開口放出を起こすことを確認した。これらのデータは、既に私が予想したように成長円錐ではSNARE機構は十分に発達しているが、rab3Aサイクリングはシナプス成熟に伴って発達することを強く示していた。

The following findings were obtained from the study of intracellular information transmission system in the brain growth cone a. The growth of Ca2 + in the growth cone is proved by the high density of Ca2 + in the growth cone. The physiological significance of the protein is clarified, the biochemical analysis of isolated growth cones is demonstrated, and the activation of the protein is demonstrated. 1) MARCKS protein,GAP-43 protein, which is a C-dependent protein, is acidified. 2) The activation of the protein is demonstrated. The distribution of protein in the matrix and membrane was confirmed. The activation of the L-type ring, the C-type ring and the C-type ring are the results of the interaction between the growth cone and the ring. b. The process of terminal transformation of growth cones is discussed in relation to the expression of proteins. This year, SNARE (ATP-dependent) and Rab3A (GTP-dependent) systems are discussed in relation to the expression of proteins, and stress is discussed in relation to the expression of toxins. The results, growth cone, rabphilin,rab-GEP, 2 kinds of protein, rab3A, incomplete protein The protein is produced by the growth cone, the growth cone is produced by the growth cone, and the protein is produced by the growth cone. This is the first time I've ever seen a person who's been in a relationship with someone who's been in a relationship with someone else.

项目成果

五十嵐 道弘: "軸索成長の分子機構" 医学の歩み. 180(2). 138-140 (1997)

Michihiro Igarashi：“轴突生长的分子机制”医学史180（2）（1997）。

Igarashi M.Tagaya M, Kamiya Y: "The SNARE complex in growth cores" Journal of Neuroscience. 17・4. 1460-1470 (1997)

Igarashi M. Tagaya M、Kamiya Y：“生长核心中的 SNARE 复合体”《神经科学杂志》17・4（1997 年）。

Ohbayashi K, Inoue HK, Fukura H, Kamiya Y, Igarashi M: "Stimulation of L-type Ca^<2+>channel in growth cores activates two independent signaling pathways" Journal of Neuroscience Research. (印刷中). (1998)

Ohbayashi K、Inoue HK、Fukura H、Kamiya Y、Igarashi M：“生长核心中 L 型 Ca^<2+> 通道的刺激激活两个独立的信号传导途径”《神经科学研究杂志》（出版中）。

五十嵐 道弘: "軸索成長の制御に関与する情報伝達系" 生体の科学. 48(6). 542-554 (1997)

Michihiro Igarashi：“参与轴突生长控制的信息传输系统”生物科学48（6）（1997）。

Igarashi M(他21名)(Fujisawa,H.ed.): "Mechanisms of axonal growth and nerve pattern formation" Karger/Japan Scientific Societies Press, 280 (1997)

Igarashi M（和其他 21 人）（Fujisawa，H.ed.）：“轴突生长和神经模式形成的机制”Karger/日本科学协会出版社，280（1997）