細胞周期を制御するCDK1のケミカル条件変異ヒト細胞株の樹立と表現型解析

控制细胞周期的 CDK1 化学突变人类细胞系的建立和表型分析

• 批准号: 19659069
• 负责人: 武田 俊一
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659069/
• 关键词: CDK; ケミカルジェネティックス; DT40

Cyclin dependent kinase(CDK)は、細胞分裂周期をコントロールする司令塔である。CDKは、分裂周期の各フェーズ毎に違う機能を持つので、単純な遺伝子破壊では、CDKが持つすべての機能を調べることができない。各フェーズ毎の機能を調べる為には、CDK阻害剤が使われてきた。ところが、ケミカルの阻害剤は、必ずOFF target効果があり、実験結果の解釈は必ずしも単純にはいかない。これらの、遺伝学的解析と阻害剤を使った解析との、それぞれの弱点を補う新しい研究手法が、ケミカルジェネティックスである。我々は、遺伝子破壊が容易なニワトリDT40細胞株にケミカルジェネティックスを応用してCDK1の条件破壊株を作った。得られた細胞は、阻害剤添加後、10分以内にCDK1が抑制され、細胞がG2期で-時停止する。一方、阻害剤を除去すると、10分以内にCDK1が再活性化され、G2からM期に細胞周期が進行することがわかった。よってCDK1は、G2からM期への移行に必須である。同様のCDK1の条件破壊をCDK2欠損細胞で行なった。すると、CDK2欠損細胞は全く正常に増殖できるにもかかわらず、CDK1とCDK2とが両方不活性化されると、細胞はDNA複製を開始できないことがわかった。ゆえに、複製開始については、CDK1とCDK2とが完全に重複した機能を持ち、いずれか一方が存在すれば、DNA複製は正常に完了することが明らかになった。同様に、中心体の複製も、CDK1もしくはCDK2の、いずれか一方が存在すれば、正常に起こることも解明できた。

Cyclin dependent kinase(CDK) CDK is divided into two parts, each part is divided into two parts, and each part is divided into two parts. Each function of the CDK is adjusted to the opposite direction.ところが、ケミカルの阻害剤は、必ずOFF target効果があり、実験结果の解釈は必ずしも単纯にはいかない。The analysis of this problem and the analysis of its weaknesses are based on new research methods. The CDK1 conditional strain was used in the treatment of CDK1. CDK1 inhibition and G2 phase arrest were observed within 10 minutes after inhibitor addition. CDK1 was reactivated within 10 minutes after removal of the inhibitor, and the cell cycle progressed in G2 and M phases. CDK1, G2, M, M CDK1 and CDK2 are the same conditions that destroy CDK2 cells. CDK1 and CDK2 are inactivated, and DNA replication begins. CDK1 and CDK2 are completely duplicated, and the function of CDK1 and CDK2 is completely duplicated. The same, the center body copy, CDK1, CDK 2, CDK1, CDK2, CDK2, CDK 1, CDK 2, CDK 2, CDK 3, CDK 4, CDK 5, CDK 6, CDK 7, CDK 8, CDK 9, CDK 9, CDK

项目成果

An essential role for Cdkl in S phase control, revealed by chemical genetics in vertebrate cells.

脊椎动物细胞的化学遗传学揭示了 Cdkl 在 S 期控制中的重要作用。

• 发表时间: 2007
• 期刊: J Cell Biol. 178
• 作者: Hochegger H;Dejsuphong D;Sonoda E;Saberi A;Rajendra E;Kirk J;Hunt T;Takeda S
• 通讯作者: Takeda S