染色体DNAを保存するシステムに関与する遺伝子群の、ヒトの多型性の機能評価

人类染色体DNA保存系统中基因多态性的功能评估

• 批准号: 15012232
• 负责人: 武田 俊一
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15012232/
• 关键词: 相同DNA組み換え; DNA修復; 損傷乗り越え; DNAポリメラーゼ; ゲノム不安定性; シスプラチン; 女性ホルモン; タモキシフェン

私は、ニワトリBリンパ細胞株が高等真核細胞(ヒト、昆虫、植物など)のなかで唯一、酵母のように遺伝子ノックアウトやノックインが高頻度に起ることを見い出した(Buerstedde, J.-M.& Takeda, S.Cell,67:179-188,1991)。よってDT40を含むニワトリBリンパ細胞株は、高等真核細胞で唯一、酵母の実験系のような系統的な"機能の破壊"の実験が行なえる系である。我々は、様々なDNA修復経路、チェックポイント経路の1重/2重変異クローンをDT40から系統的に作成し表現型を解析した。そして各経路が、(1)ゲノム構造維持、(2)放射線照射/シスプラチンなどによって生じたゲノム損傷の修復の2点において、どのような役割分担をしているかを系統的に解析した。ゲノム構造維持機構の破たんは、変異や染色体異常の蓄積を促進する。一方、放射線照射/シスプラチン処理後の細胞の反応の解析は、よりよい癌治療の開発に重要である。ゆえに、我々の研究は、発癌機構の解明と治療方法の開発の両方に貢献できる。平成15年度は、損傷乗り越えDNA合成(pol κ、polζ、Rad18)が、シスプラチンなどクロスリンカーによるDNA損傷の修復に重要な役割を持つことを解明した。さらに、これらの遺伝子欠損株を女性ホルモン(4OH estradiol)や女性ホルモンの拮抗役(タモキシフェン)で処理すると、多数の染色体断裂が発生することがわかった。すなわち、女性ホルモンやタモキシフェンは、従来知られていた発がんプロモーターとしての活性だけでなく、イニシエーターとしての活性もあることが明らかとなった。

我发现，鸡B淋巴细胞细胞系是较高的真核细胞中唯一的鸡肉（人，昆虫，植物等）中的唯一一种，它像酵母一样引起基因敲除和敲除（Buerstedde，J.-M。＆Takeda，S。Cell，67：179-179-188，1991）。因此，含有DT40的鸡B淋巴细胞细胞系是唯一可以进行系统的“功能破坏”实验的较高的真核细胞，例如酵母实验中的实验。我们系统地生成了来自DN0的各种DNA修复和检查点途径的单/双突变克隆，并分析了表型。然后，我们以两种方式系统地分析了每种途径的作用：（1）维持基因组结构和（2）修复由辐射照射/顺铂引起的基因组损伤。基因组结构维持机制的破坏促进了突变和染色体异常的积累。另一方面，对辐射/顺铂治疗后细胞反应的分析对于开发更好的癌症治疗很重要。因此，我们的研究可以有助于阐明癌症的机制和开发治疗方法。在2003年，我们澄清说，DNA合成克服损伤（POLκ，POLζ，RAD18）在修复Cisplatin等交联链损伤方面起着重要作用。此外，发现这些缺乏基因的菌株用雌性激素（4OH雌二醇）和雌性激素的拮抗剂（他莫昔芬）的治疗导致了许多染色体撕裂。换句话说，已经揭示了女性激素和他莫昔芬不仅被称为致癌物启动子，而且也称为发起人。

项目成果

M.Hashimoto, 3名略, Takata, S.Takeda, H.Utsumi: "DNA-PK : the major target for wortmannin-mediated radiosensitization by the inhibition of DSB repair via NHEJ pathway."J.Radiat.Res.. 44. 155-163 (2003)

M.Hashimoto，省略 3 个名字，Takata、S.Takeda、H.Utsumi：“DNA-PK：通过 NHEJ 途径抑制 DSB 修复来实现渥曼青介导的放射增敏的主要靶标。”J.Radiat.Res.. 44 .155-163 (2003)

Hochegger, H., Sonoda, E., Takeda, S.: "Post Replication Repair in DT40 cells : Translesion Polymerases versus Recombinases."Bio Essay(Review). 26. 151-158 (2004)

Hochegger, H.、Sonoda, E.、Takeda, S.：“DT40 细胞的复制后修复：跨损伤聚合酶与重组酶。”生物论文（评论）。

Sonoda, E., Okada, T., Zhao, G.Y., 7名略, Takeda, S.: "Multiple roles of Rev3,the catalytic subunit of polz in maintaining genome stability in vertebrate"EMBO J.. 22. 3188-3197 (2003)

Sonoda, E.、Okada, T.、Zhao, G.Y.，省略 7 个名字，Takeda, S.：“Rev3 的多重作用，polz 的催化亚基在维持脊椎动物基因组稳定性中的作用”EMBO J.. 22. 3188-3197 (2003)

Yn, D., Sonoda, E., Takeda.S., Huang, C.L.H., Pellegrini, L., Blundell, T.L., Venkitaraman, A.R.: "Dynamic control of Rad51 recombinase by self-association and interaction with Brca2."Mol Cell. 12. 1029-1041 (2003)

Yn, D.、Sonoda, E.、Takeda.S.、Huang, C.L.H.、Pellegrini, L.、Blundell, T.L.、Venkitaraman, A.R.：“通过自关联和与 Brca2 相互作用动态控制 Rad51 重组酶。”Mol Cell

Mizutani, A., Okadal, T., Shibutani, S., Sonodal, E., 3名略, Y., Takeda, S., Yamazoel, M.: "Extensive chromosomal breaks are induced by tamoxifen and estrogen in DNA repair deficient cells."Cancer Research. in press.

Mizutani, A.、Okadal, T.、Shibutani, S.、Sonodal, E.、Y.、Takeda, S.、Yamazoel, M.：“在 DNA 修复缺陷细胞中，他莫昔芬和雌激素会诱导广泛的染色体断裂。”癌症研究正在出版。