細胞分裂期の紡錘系に局在する細胞死の誘導および抑制タンパク質の機能解析

细胞分裂过程中纺锤体系统中细胞死亡诱导和抑制蛋白的功能分析

• 批准号: 12878110
• 负责人: 武田 俊一
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12878110/
• 关键词: DT40; 発がん; DNA修復; 癌治療; チェックポイント; 放射線; 相同DNA組み換え

これまで細胞生物学の分野のFunctional genomicsは、酵母でしかできなかった。DT40細胞は、以下に我々の業績を述べながら説明するように、酵母に匹敵するFunctional genomicsを動物細胞でも行うことが可能になった先駆けと位置ずけることのできる実験系である。我々は、DNA修復/チェックポイントシステムの変異細胞をDT40から作成し、その表現型を解析してきた。我々の研究成果を以下に列挙する。1)相同DNA組み換えが放射線照射によってゲノムに誘導された損傷を修復するのに重要な働きをすることを解明した(論文リスト:5)。2)相同DNA組み換えが減数分裂の時だけでなく体細胞分裂の各サイクル毎にDNA修復のために必須の働きをすることを証明した(論文リスト:3,4,6)。3)我々はDNA損傷によって活性化されるチェックポイント機構が、従来から解明されてきたように細胞分裂周期を一時停止するだけでなく、相同DNA組み換えによるDNA修復をアップレギレートすることを見い出した(論文リスト2)。4)Rad51は、大腸菌RecA分子と構造的な相同性を持つ相同DNA組み換えにおいて中心的役割をもつ分子である。そして、動物細胞は、Rad51と構造的に似た分子を5種類(Rad51B/Rad51C/Rad51D/XRCC2/XRCC3)さらに持っている。我々は、これらの分子の各シングルミュータトを作成、解析することによって、これら5種類の分子はコンプレックスを作ってRad51を補助することを証明した(論文リスト:1)。これらの研究成果は、単に新規にクローニングされた遺伝子を世界に先駆けてノックアウトしただけでなく、その表現型を注意深く、既存/新規の方法をトライしながら解析した結果、世界的に認められたものである。

Functional genomics of cell biology, yeast, etc. DT40 cells are described in the following terms of their performance: Functional genomics of animal cells, possible pre-emptive location, and system. DNA repair and analysis of the phenotype of different cells The results of our research are listed below. 1)The same DNA sequence is responsible for the repair of radiation induced damage. 2)It is proved that the same DNA sets are changed during meiosis, and the necessary conditions for DNA repair in somatic cell division are changed during meiosis (Paper: 3, 4, 6). 3)The DNA damage is caused by the activation of the DNA repair system, and the cell division cycle is temporarily stopped. The DNA repair system is also caused by the change of the same DNA group. 4)Rad51, Escherichia coli RecA molecular structure identity, maintain the same DNA group, change the center of the service, cut the molecule. 5 kinds of molecules (Rad 51B/Rad 51C/Rad 51D/XRCC2/XRCC3) were found in animal cells. The molecular structure of the five species of molecules was established and analyzed. The molecular structure of the five species was proved to be Rad51. The results of this research are different from those of the previous ones, and the new ones are different from those of the previous ones.

项目成果

E.Sonoda, M.S.Sasaki, J.-M.Buerstedde, O.Bezzubova, A.Shinohara, H.Ogawa, M.Takata M., Y.Yamaguchi-Iwai and S.Takeda.: "Rad51 deficient vertebrate cellsaccumulate chromosomal breaks prior to cell death."EMBO J.. 17. 598-608 (1998)

E.Sonoda、M.S.Sasaki、J.-M.Buerstedde、O.Bezzubova、A.Shinohara、H.Okawa、M.Takata M.、Y.Yamaguchi-Iwai 和 S.Takeda.：“Rad51 缺陷的脊椎动物细胞累积染色体断裂

C.Morrison, E.Sonoda, N.Takao, A.Shinohara, K.Yamamoto and S.Takeda: "The controlling role of ATM in homologous recombinational repair of DNA damage."EMBO J.. 19. 463-471 (2000)

C.Morrison、E.Sonoda、N.Takao、A.Shinohara、K.Yamamoto 和 S.Takeda：“ATM 在 DNA 损伤同源重组修复中的控制作用。”EMBO J.. 19. 463-471 (2000

M.Takata,M.S.Sasaki,S.Tachiiri,T.Fukushima,E.Sonoda,D.Schild,L.H.Thompson,and S.Takeda: "Chromosome instability and defective recombinational repair in knockout mutants of the five Rad51 paralogs."Mol.Cell.Biol. (2001)

M.Takata、M.S.Sasaki、S.Tachiiri、T.Fukushima、E.Sonoda、D.Schild、L.H.Thompson 和 S.Takeda：“五个 Rad51 旁系同源基因敲除突变体中的染色体不稳定性和重组修复缺陷。”Mol。

Y.Yamaguchi-Iwai.E.Sonoda.M.S.Sasaki.C.Morrison,T.Haraguchi.Y.Hiraoka.Y.M.Yamashita.T.Yagi.M.Takata.C.Price.N.Kakazu.and S.Takeda: "MreII is essential for the maintenance of chromosomal DNA in vertebrate cells."EMBO J. 18. 6619-6629 (1999)

Y.Yamaguchi-Iwai.E.Sonoda.M.S.Sasaki.C.Morrison,T.Haraguchi.Y.Hiraoka.Y.M.Yamashita.T.Yagi.M.Takata.C.Price.N.Kakazu.and S.Takeda：“

E.Sonoda.M.S.Sasaki.J.-M.Buerstedde.O.Bezzubova,A.Shinohara,H.Ogawa,M.Takata M.Takata M.,Y.Yamaguchi-Iwai and S.Takeda: "Homologous recombination and nonhomologous end joining pathways of DNA double-strand break repair have overlapping roles in the mainte

E.Sonoda.M.S.Sasaki.J.-M.Buerstedde.O.Bezzubova、A.Shinohara、H.Okawa、M.Takata M.Takata M.、Y.Yamaguchi-Iwai 和 S.Takeda：“同源重组和非同源