染色体維持機構の変異動物細胞株の表現型を評価するアッセイ系の樹立

建立评估具有突变染色体维持机制的动物细胞系表型的检测系统

• 批准号: 13206033
• 负责人: 武田 俊一
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13206033/
• 关键词: 遺伝学; 遺伝子; 癌; 放射線; 老化

我々は、標的組み換えが容易なニワトリBリンパ細胞株、DT40で系統的にDNA修復に関与する既知の遺伝子をノックアウトすることにより、様々なDNA修復の機能に関与する各遺伝子の機能を解析した。このような遺伝学的解析のときに重要な点は表現型の解析であり、そして各表現型解析方法が分子レベルで結果的になにを解析していることになるのかを正確に把握することである。以下に我々の研究業績とを3項目にわけて説明する。(1)相同DNA組み換えの機能解析相同DNA組み換えは、生殖細胞が減数分裂するときに起ることが知られている。我々は細胞分裂のときにDNA複製に伴う損傷を修復するために、相同DNA組み換えがおそらく数十回/分裂の頻度で起っていることを示した。(2)コヒーシンの機能解析姉妹染色分体はM期の中期までコヒーシンと呼ばれるタンパク分子群により結合する(コヒージョン)。そしてコヒーシンのなかでScc1と呼ばれる分子が分解されることが引き金になって、M期は中期から後期に移行し、姉妹染色分体は互いに解離し紡錘糸によって各姉妹染色分体はそれぞれ両極に引かれていく。コヒーシンを構成する分子は、酵母の遺伝学的解析により数種類同定され、しかもヒトでも保存されていることがわかっている。我々は、Scc1が動物細胞でも同じ機能をもつか否か、そして姉妹染色分体間のコヒージョンが姉妹染色分体間でおこる相同DNA組み換えに重要な機能を持つか否かの2点を解明するためにScc1の条件欠損細胞(テトラサイクリンを加えた時にのみScc1が発現停止する)細胞を解析した。

The DNA repair function of the target cell line and DT40 system was analyzed based on the known DNA repair genes. The important point of analysis of phenotype is that the analysis method of each phenotype is correct in understanding the results of molecular analysis The following is a description of our research achievements and 3 projects. (1)Analysis of the function of the same DNA group, the same DNA group. The frequency of DNA replication and damage repair in the same DNA set is shown in the table below. (2)The functional analysis of the chromatid is the middle stage of the M phase. In the middle and late stages of the M phase, the chromosomes are dissociated from each other and the chromosomes are dissociated from each other. The molecular structure of yeast is analyzed by molecular biology, and several species are identified and preserved. Scc1 is an animal cell that has the same function as Scc1. It has the same DNA set. It has the same function as Scc1. It has the same function as Scc1. It has the same DNA set. It has the same function as Scc1. It has the same function as Scc1. It has the same DNA set. It has the same function as Scc1. It has the same DNA set. It has the same function as Scc1. It has the same function as Scc1. It has the same DNA set. It has the same DNA set. It has the same function as Scc1. It has the same DNA set. It has the same DNA set. It has the same function as Scc1. It has the same DNA set. It has the same

项目成果

Sale, J.E., Calandrini, D.M., Takata, M., Takeda, S., Neuberger, M.S.: "Ablation of XRCC2/3 transforms immunoglobulin V gene conversion into somatic hypermutation"Nature. 412:9. (2001)

Sale, J.E.、Calandrini, D.M.、Takata, M.、Takeda, S.、Neuberger, M.S.：“XRCC2/3 的消融将免疫球蛋白 V 基因转化为体细胞超突变”《自然》。

A.Fujimori, S.Tachiiri, E.Sonoda, L.H.Thompson, P.K.Dhar, M.Hiraoka, S.Takeda, Y.Zhang, M.Reth, M.Takata: "Rad52 partially substitutes for the Rad51 paralog XRCC3 in maintaining chromosomal integrity in vertebrate cells"EMBO J.. 20. 5513-5520 (2001)

A.Fujimori、S.Tachiiri、E.Sonoda、L.H.Thompson、P.K.Dhar、M.Hiraoka、S.Takeda、Y.Zhang、M.Reth、M.Takata：“Rad52 在维持染色体功能方面部分替代了 Rad51 旁系同源物 XRCC3

Sonoda, E., Matsusaka, T., Morrison, C., Vagnareli, P., Hoshi, O., Ushiki, T., Nojima, K., Fukugawa, T., Waizenegger, I.C., Peters, J.-M., Earnshaw, W.C., Takeda, S.: "Scc1/Rad21/Mcd1 is required for sister chromatid cohesion and kinetochore function in v

园田，E.，松坂，T.，莫里森，C.，瓦格纳雷利，P.，星，O.，牛木，T.，野岛，K.，福川，T.，瓦森格，I.C.，彼得斯，J.-M

M.Takata, M.S.Sasaki, S.Tachiiri, T.Fukushima, E.Sonoda, D.Schild, L.H.Thompson, S.Takeda: "Chromosome instability and defective recombinational repair in knockout mutants of the five Rad51 paralogs"Mol.Cell.Biol.. 21. 2858-2866 (2001)

M.Takata、M.S.Sasaki、S.Tachiiri、T.Fukushima、E.Sonoda、D.Schild、L.H.Thompson、S.Takeda：“五个 Rad51 旁系同源基因敲除突变体中的染色体不稳定性和重组修复缺陷”Mol.Cell。

T.Fukushima, M.Takata, C.Morrison, R.Araki, A.Fujimori, M.Abe, K.Tatsumi, M.Jasin, P.K.Dhar, E.Sonoda, T.Chiba, S.Takeda: "Genetic analysis of the DNA-dependent protein kinase reveals an inhibitory role of Ku in late S-G2 phase DNA double-strand break rep

T.Fukushima、M.Takata、C.Morrison、R.Araki、A.Fujimori、M.Abe、K.Tatsumi、M.Jasin、P.K.Dhar、E.Sonoda、T.Chiba、S.Takeda：“遗传分析