ターゲテドプロテオミクスによる血清マーカー複合体のマルチプレックス解析技術開発

利用靶向蛋白质组学开发血清标记物复合物多重分析技术

• 批准号: 19659140
• 负责人: 浜窪 隆雄
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659140/
• 关键词: PTX3; 疾患マーカー; プロテオミクス; 炎症; 自然免疫; LC; MS; タンパク質複合体; 磁気ビーズ; ペントラキシン; モノクローナル抗体; 磁性ビーズ; 質量分析; 血液マーカー; 心血管疾患

PTX3はペントラキシンファミリーに属するタンパク質で、炎症時に白血球や血管内皮細胞から放出され、炎症関連物質のオプソニン化に働くと考えられている。これまで不安定狭心症や脳血管障害などで血中に増加することが知られていて、これらの疾患の血液マーカーとして期待されている。PTX3は炎症初期に様々なタンパク質と相互作用するパターン認識受容体として働き、免疫担当細胞への抗原提示(オプソニン化)に関わっていると考えられている。このことから、PTX3が血中でどのようなタンパク質と複合体を形成しているかを調べることは、PTX3の病態との関連を知る上で重要である。本研究では、PTX3に対する特異的モノクローナル抗体を磁気ビーズに固定化して微量のPTX3を血液から回収し、形成している複合体を質量分析器(MS)にて解析する手法の開発を行った。順天堂大学病院より敗血症の患者血液の提供を受け、EDTA採血の患者血液からPTX3を磁気ビーズにより免疫精製して、MSにて同定することに成功した。メジャーな相互作用タンパク質としては、補体系タンパク質およびインターαトリプシンインヒビターを同定した。これらは、MantovaniらによってPTX3が相互作用することが報告されているタンパク質であり、この方法によってPTX3の血中での複合体を同定することができることが示されたと考えられる。さらにこれまで報告されていないタンパク質も数種類同定することに成功した。疾患とどのような関連性を持つかについては、症例数を増やして精査する必要があるが、本研究の目的とした血清マーカー複合体のターゲッドプロテオミクスによる解析手法が確立されたと考えられ、今後血液診断において重要な技術になるものと期待される。

PTX3 is a protein that is produced by leukocytes and vascular endothelial cells during inflammation. This is the first time in my life that I've ever seen a person who's had a heart attack or a vascular disorder, and that I've ever seen a person who's had a blood disorder. PTX3 is related to the early stages of inflammation, such as the recognition of receptors, antigen cues of immune cells, and the interaction of substances. The relationship between PTX3 and PTX3 is very important. In this study, the development of a method for the analysis of PTX3-specific antibodies, magnetic immobilization, and micro-amounts of PTX3 in blood by mass spectrometry (MS) was investigated. The blood supply of patients with hematomosis in Shun Tien University Hospital was successful. Blood samples were collected from patients with hematomas. The quality of the interaction is different from that of the compensation system. The interaction between PTX 3 and Mantovani was investigated. This report was successful in determining the number of quality items. The purpose of this study is to establish an analytical method for determining the relationship between the disease and the number of cases, and to establish an important technique for future blood diagnosis.

项目成果

Viral envelope protein gp64 transgenic mouse facilitates the generation of monoclonal antibodies against exogenous membrane proteins displayed on baculovirus

• DOI: 10.1016/j.jim.2007.02.005
• 发表时间: 2007-04-30
• 期刊: JOURNAL OF IMMUNOLOGICAL METHODS
• 影响因子: 2.2
• 作者: Saitoh, Ryoichi;Ohtomo, Toshihiko;Hamakubo, Takao
• 通讯作者: Hamakubo, Takao

バキュロウイルスディスプレイ法を用いた高親和性抗体の作製とターゲテドプロテオミクスの応用

杆状病毒展示法制备高亲和力抗体及靶向蛋白质组学应用

• 发表时间: 2007
• 作者: Saitoh R;Ohtomo T. Yamada Y;hamada N. Nezu J. Kimura N;Funahashi S;Furugaki K;Yoshino T;Kawase Y;Kato A;Ueda O;Jishage K;Suzuki M;Fukuda R;Arai M;Iwanari H;Takahashi K;Sakihama T;Ohizumi I;Kodama T;Tsuchiya M;Hamakubo T.;浜窪隆雄
• 通讯作者: 浜窪隆雄

Lipopolysaccharide induced expression of pentraxin 3 in human neutrophils and monocyte-derived macrophages

• DOI: 10.1016/j.cellimm.2007.09.003
• 发表时间: 2007-08-01
• 期刊: CELLULAR IMMUNOLOGY
• 影响因子: 4.3
• 作者: Imamura, Masaru;Kawasaki, Takashi;Naito, Makoto
• 通讯作者: Naito, Makoto

Expression of pentraxin 3 (PTX3) in human atherosclerotic lesions

• DOI: 10.1002/path.2314
• 发表时间: 2008-05-01
• 期刊: JOURNAL OF PATHOLOGY
• 影响因子: 7.3
• 作者: Savchenko, A. S.;Imamura, M.;Naito, M.
• 通讯作者: Naito, M.