ターゲテドプロテオミクスによる血清マーカー複合体のマルチプレックス解析技術開発

利用靶向蛋白质组学开发血清标记物复合物多重分析技术

• 批准号: 19659140
• 负责人: 浜窪 隆雄
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659140/
• 关键词: PTX3; 疾患マーカー; プロテオミクス; 炎症; 自然免疫; LC; MS; タンパク質複合体; 磁気ビーズ; ペントラキシン; モノクローナル抗体; 磁性ビーズ; 質量分析; 血液マーカー; 心血管疾患

PTX3はペントラキシンファミリーに属するタンパク質で、炎症時に白血球や血管内皮細胞から放出され、炎症関連物質のオプソニン化に働くと考えられている。これまで不安定狭心症や脳血管障害などで血中に増加することが知られていて、これらの疾患の血液マーカーとして期待されている。PTX3は炎症初期に様々なタンパク質と相互作用するパターン認識受容体として働き、免疫担当細胞への抗原提示(オプソニン化)に関わっていると考えられている。このことから、PTX3が血中でどのようなタンパク質と複合体を形成しているかを調べることは、PTX3の病態との関連を知る上で重要である。本研究では、PTX3に対する特異的モノクローナル抗体を磁気ビーズに固定化して微量のPTX3を血液から回収し、形成している複合体を質量分析器(MS)にて解析する手法の開発を行った。順天堂大学病院より敗血症の患者血液の提供を受け、EDTA採血の患者血液からPTX3を磁気ビーズにより免疫精製して、MSにて同定することに成功した。メジャーな相互作用タンパク質としては、補体系タンパク質およびインターαトリプシンインヒビターを同定した。これらは、MantovaniらによってPTX3が相互作用することが報告されているタンパク質であり、この方法によってPTX3の血中での複合体を同定することができることが示されたと考えられる。さらにこれまで報告されていないタンパク質も数種類同定することに成功した。疾患とどのような関連性を持つかについては、症例数を増やして精査する必要があるが、本研究の目的とした血清マーカー複合体のターゲッドプロテオミクスによる解析手法が確立されたと考えられ、今後血液診断において重要な技術になるものと期待される。

PTX3 is sensitive to leukocytes and vascular endothelial cells during inflammation, and is linked to inflammation and inflammation. She is suffering from unstable heart disease, vascular disorder, blood vessel disorder, blood disease, blood, blood, blood. In the early stage of inflammation, PTX3 was induced to interact with each other in order to recognize that the recipient was infected, and that the immune system acted as a cellular antigen cue (immune response). In the blood of PTX3, there was no infection in the blood, the complex was formed in the blood, and the pathological condition of the PTX3 was found to be important. In this study, anti-PTX3 antibody was immobilized in magnetic field. The trace amount of PTX3 was immobilized, and the complex quantitative analyzer (MS) was used to analyze the method. The blood of patients with blood in the Hospital of the University of Paradise provides the blood of recipients and EDTA patients. PTX3, magnetism, immune sperm, MS, success. The interaction is similar to that of the system, and the system is the same as the system. The interaction of Mantovani, PTX3, PTX3, report, PTX3, and so on, the homology of the complex in the blood was determined. The number of reports is the same as that of successful reports. The number of cases, the number of cases, the number of

项目成果

Viral envelope protein gp64 transgenic mouse facilitates the generation of monoclonal antibodies against exogenous membrane proteins displayed on baculovirus

• DOI: 10.1016/j.jim.2007.02.005
• 发表时间: 2007-04-30
• 期刊: JOURNAL OF IMMUNOLOGICAL METHODS
• 影响因子: 2.2
• 作者: Saitoh, Ryoichi;Ohtomo, Toshihiko;Hamakubo, Takao
• 通讯作者: Hamakubo, Takao

バキュロウイルスディスプレイ法を用いた高親和性抗体の作製とターゲテドプロテオミクスの応用

杆状病毒展示法制备高亲和力抗体及靶向蛋白质组学应用

• 发表时间: 2007
• 作者: Saitoh R;Ohtomo T. Yamada Y;hamada N. Nezu J. Kimura N;Funahashi S;Furugaki K;Yoshino T;Kawase Y;Kato A;Ueda O;Jishage K;Suzuki M;Fukuda R;Arai M;Iwanari H;Takahashi K;Sakihama T;Ohizumi I;Kodama T;Tsuchiya M;Hamakubo T.;浜窪隆雄
• 通讯作者: 浜窪隆雄

Lipopolysaccharide induced expression of pentraxin 3 in human neutrophils and monocyte-derived macrophages

• DOI: 10.1016/j.cellimm.2007.09.003
• 发表时间: 2007-08-01
• 期刊: CELLULAR IMMUNOLOGY
• 影响因子: 4.3
• 作者: Imamura, Masaru;Kawasaki, Takashi;Naito, Makoto
• 通讯作者: Naito, Makoto

Expression of pentraxin 3 (PTX3) in human atherosclerotic lesions

• DOI: 10.1002/path.2314
• 发表时间: 2008-05-01
• 期刊: JOURNAL OF PATHOLOGY
• 影响因子: 7.3
• 作者: Savchenko, A. S.;Imamura, M.;Naito, M.
• 通讯作者: Naito, M.