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特異的24G7抗体イムノクロマトグラフィーによる急性拒絶反応の新しい診断法の確立

特异性24G7抗体免疫层析建立急性排斥反应新诊断方法

基本信息

批准号：
19659143
负责人：
笹栗志朗
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Kochi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々はこれまで、ラット頚部異所性心移植モデルにおける急性拒絶反応にて、尿中バイオピリン上昇が移植後4日目より生じ、心筋傷害マーカーであるトロポニンTよりも早期の段階で拒絶反応を捉えうることをバイオピリン特異的24G7抗体を用いたELISA法にて明らかにしてきた。しかし、ELISA法は感度に優れるものの最終判定までに数日を要し迅速性に欠けた。本研究では、感度よく短時間でバイオピリンを検出できるイムノクロマトキット(ICA kit)の開発を目的として開始した。ICA kit作製では固相化メンブレン及び標識粒子より構成されるテストプレートを試作した。尿サンプルを反応させた後にクロマトリーダーによる測定値計測を行うが、全工程約15分で尿中バイオピリンが測定可能であり、従来法と比較して格段の測定時間の短縮が実現できた。次に実際の急性拒絶反応時における尿中バイオピリン測定を、ICA kitと従来法で行い比較検討した。その結果、同種異所性頚部心移植での急性拒絶反応群(DAラット→LEWラット)では、尿中バイオピリンはICA kitと従来法ともに4日目に上昇し、ICA kitでは術前基礎値の約6倍、ELISA法では約4倍と、ICA kitでの測定においてより高い感度が得られていた。拒絶反応のみられない同系移植群(LEWラット→LEWラット)での尿中バイオピリン値は、ICA kit、ELISA法共に術前基礎値との有意な変化はなく、特異性についても従来法と同等であると考えられた。これらの結果は、尿中バイオピリン測定における新たなICA kit法の有用性を示しており、特に急性拒絶反応時の低侵襲かつより早期の診断が期待できるものと考えられる。現在、移植後拒絶反応診断の予備的研究として、腎移植後患者の尿サンプルの採取を行っている。今後これらの臨床例での検討を基に、移植後拒絶反応の早期診断法の確立を目指していきたい。

The early stage of rejection of anti-tumor antibody was detected by ELISA method. The results showed that there was no significant difference between the early stage and the early stage of rejection of anti-tumor antibody. The ELISA method is sensitive and the final determination is rapid. This study is the beginning of the development of ICA kit. The ICA kit is designed to be a solid phase marker and a marker particle. The measurement time is shortened by comparing the measurement time with the measurement time of the urine sample. In the meantime, the acute rejection method is used to compare the results of the ICA kit. The results showed that the acute rejection reaction group (DA level →LEW level) of allogeneic heart transplantation was increased by ICA kit and ELISA method, and the sensitivity of ICA kit was increased by ICA kit and ELISA method. Rejection of anti-inflammatory and anti-syngeneic transplantation groups (LEW), ICA kit, ELISA method, preoperative baseline value, intentional change, specificity, anti-inflammatory and anti-inflammatory method, etc. The results show the usefulness of the new ICA kit method in urine, especially in acute rejection and low invasion. Now, the study on the preparation of rejection diagnosis after kidney transplantation and the study on urine collection of patients after kidney transplantation. In the future, the basic diagnosis of clinical cases and the establishment of early diagnosis methods for rejection after transplantation should be pointed out.