人の肝細胞を有するマウスを使用した劇症肝炎等の原因となる新規病態微生物の探索

利用具有人类肝细胞的小鼠寻找引起暴发性肝炎的新型病理微生物

• 批准号: 19659186
• 负责人: 茶山 一彰
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659186/
• 关键词: 肝炎ウイルス; 劇症肝炎; ゲノム; キメラマウス

病原微生物を分離する生体材料として、血清を液体窒素中で凍結保存し、ヒト肝細胞キメラマウス接種し、2、7,14,21日と経時的に採血を行った。投与前の血清と投与後の各時点の血清を用いてrepresentational difference analysisにより投与前には存在せず、投与後に存在する核酸を分離同定し、塩基配列を確認することにより未知の病原微生物を検出することを試みている。(1)これまでに液体窒素中に保存されている検体に加え、あらたに劇症肝炎、virus associated hemophagocytic syndromeの症例の血清を保存した。(2)10症例分の検体を一群として、キメラマウスに経時的に投与した。投与前、および投与後1、2,4,8,16週と血清を採取し、保存した。(3)各血清から核酸を抽出し、adopter primerを用いて逆転写反応を行った。さらに、linker ligationを行い、linkerのcomplementary strandとなるprimerを合成、2nd strandの合成を行いdouble strand DNAを得た。投与後の検体から得られたDNAをtester、投与前の血清から得られたDNAを driverとしてrepresentational difference analysisを行い、病原体特異的な核酸を増幅した。現在いくつかのバンドを切り出して、塩基配列の決定を行っている。

Pathogenic microorganisms were isolated from biological materials and serum samples, frozen and stored in liquid medium, and hepatocytes were collected at 2, 7, 14, and 21 days after inoculation. The serum before and after administration was used in representative difference analysis, and the nucleic acid was isolated and determined, and the nucleotide sequence was confirmed. (1)The serum of patients with hepatitis and virus associated hemophagocytic syndrome is preserved in the serum of patients with hepatitis and virus associated hemophagocytic syndrome. (2)10 The symptoms are divided into a group of patients and patients. Before, after and after 1, 2, 4, 8, 16 weeks, the serum was taken and preserved. (3)Each serum nucleic acid extract, adopter primer use in reverse write reverse Linker ligation, linker complementary strand, primer synthesis, 2nd strand synthesis, double strand DNA synthesis DNA tester after administration, DNA driver before administration, pathogen specific nucleic acid amplification Now you can choose between the two.

项目成果

Infection of human hepatocyte chimeric mouse with genetically engineered hepatitis C virus and its susceptibility to interferon

• DOI: 10.1016/j.febslet.2007.04.021
• 发表时间: 2007-05-15
• 期刊: FEBS LETTERS
• 影响因子: 3.5
• 作者: Hiraga, Nobuhiko;Imamura, Michio;Chayama, Kazuaki
• 通讯作者: Chayama, Kazuaki

Effects of a 24-week course of interferon-alpha therapy after curative treatment of hepatitis C virus-associated hepatocellular carcinoma.

丙型肝炎病毒相关肝细胞癌治愈后 24 周干扰素-α 疗法的效果。

• 发表时间: 2007
• 期刊: World J Gastroenterol. 28;13(40)
• 作者: Jeong SC;Aikata H;Chayama K.;et. al.
• 通讯作者: et. al.

Balloon-occluded retrograde transvenous obliteration for portal-systemic encephalopathy due to superior mesenteric-caval shunt via the right gonadal vein

球囊闭塞逆行经静脉闭塞术治疗因右性腺静脉肠系膜上腔分流引起的门体性脑病

• 发表时间: 2007
• 期刊: Intern Med 46(17):
• 作者: Katamura Y;Aikata H;Azakami T;Chayama K.;et. al.
• 通讯作者: et. al.

The long-term outcome of patients with bleeding gastric varices after balloon-occluded retrograde transvenous obliteration

• DOI: 10.1007/s00535-007-2077-1
• 发表时间: 2007-08-01
• 期刊: JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY
• 影响因子: 6.3
• 作者: Hiraga, Nobuhiko;Aikata, Hiroshi;Chayama, Kazuaki
• 通讯作者: Chayama, Kazuaki

Susceptibility of chimeric mice with livers repopulated by serially subcultured human hepatocytes to hepatitis B virus

连续传代培养人肝细胞肝脏嵌合小鼠对乙型肝炎病毒的敏感性

• DOI: 10.1002/hep.22057
• 发表时间: 2007
• 期刊: Hepatology
• 影响因子: 13.5
• 作者: R. Utoh;C. Tateno;C. Yamasaki;N. Hiraga;M. Kataoka;T. Shimada;K. Chayama;K. Yoshizato
• 通讯作者: K. Yoshizato