ベータアドレナリン受容体のもつアデニール酸シクラーゼ促進性G蛋白(G_s)への共役機構の解明

阐明β-肾上腺素受体与腺苷酸环化酶促进G蛋白（G_s）的偶联机制

• 批准号: 04807173
• 负责人: 岡本 卓
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 1993
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04807173/
• 关键词: β-アドレナリン受容体; アデニール酸シクラーゼ促進性G蛋白(G_s); Aキナーゼ; 合成ペプチド; リン酸化; cAMP

我々は増殖因子受容体の1つ、IGF-II受容体が直接G蛋白と共役すること、IGF-II受容体の細胞内領域の14アミノ酸残基(2410-2423)の合成ペプチド(ペプチド14と呼ぶ)が直接G_<i2>を活性化することを証明した。この配列の構造上の特徴から、ペプチドのG蛋白活性化配列モチーフを想定した。このモチーフをβ-アドレナリン受容体に適用したところ、第3細胞内ループに2箇所見いだされた。当該領域配列を合成して調べたところ、その内でN端側の配列にはG_s活性化能はなかったが、C端側の15残基(258-272)領域(βIII-2と呼ぶ)が直接G_sを活性化することが明らかとなった。重要なことはβIII-2のN端のRRSSがAキナーゼによるリン酸化のコンセンサスモチーフであり、262番目のセリンがすでにAキナーゼによってリン酸化されることが知られているということである。そこで我々はまず、βIII-2をin vitroでAキナーゼでリン酸化して、同部位のセリン残基がリン酸化されていることを確認した。興味深いことは、リン酸化されたβIII-2のG蛋白活性化の特異性がG_sからG_iに変換していたことであった。このことから、βIII-2はG_s活性化配列であるが、アデニール酸シクラーゼ、Aキナーゼと活性化される結果、自らがリン酸化を受けて抑制されるというその配列自体に負のフィードバックがかかる特徴を持っていることがわかった。我々は、BIII-2が培養細胞膜の系でcAMP産生を促進することも確認した。以上の結果から、IGF-II受容体によるG_<i2>活性化配列を基にして、G_s活性化配列が発見できたということであり、我々のモチーフが一般にG蛋白活性化配列を見いだすのに有益であるこということが明らかとなった。

Our colonization factor receptor "1", IGF-II receptor "direct G protein", IGF-II receptor "intracellular domain 14" acid residues (2410-2423) "synthesis" ("14" call) "direct Glycosyltransferixi2gt", "activation"activation". Make a special alignment of G protein activity.To make a specific alignment of G protein. The receptive body was treated with the same dose as seen by the third intracellular enzyme, the third and the third. When the field is equipped with synthetic compounds in the field, the N-terminal devices in the field are equipped with the active energy of GCs, and the 15 residues in the C-terminal (258-272) field (β III-2 call) are directly Gallized. It is important to know that the N-end of RRSS

项目成果

Ikezu T.: "Aminoaeids 356-372 constitute a Gi-activator sequence of α_2-adrenergic receptor and have a Phe substitute in G protien sequencemotif." FEBS Lett.311. 29-32 (1992)

Ikezu T.：“氨基酸 356-372 构成 α_2-肾上腺素受体的 Gi 激活剂序列，并在 G 蛋白序列基序中具有 Phe 替代物。” FEBS Lett.311 (1992)。

Nishimoto I.: "Alzheimer amyloid protein precursor forms a complex with the GTP binding protein Go." Nature. (1993)

Nishimoto I.：“阿尔茨海默病淀粉样蛋白前体与 GTP 结合蛋白 Go 形成复合物。”

Okamoto T.: "Meusurement of GTPrS binding to specific G proteins in membranes using G protein onfibodies." FEBS Lett.305. 125-128 (1992)

Okamoto T.：“使用 G 蛋白 onfibody 测量 GTPrS 与膜中特定 G 蛋白的结合。”

Okamoto T.: "Detection of G protein-activator region in M4 subtype muscarinic,cholinergic,and α_2-adrenergic receptors based upon characteristics in primary structure" J,Biol.Chem.267. 8342-8346 (1992)

Okamoto T.：“基于一级结构特征检测 M4 亚型毒蕈碱、胆碱能和 α_2-肾上腺素能受体中的 G 蛋白激活剂区域”J，Biol.Chem.267（1992）。