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Akata細胞より分離したEBウイルス非感染細胞を用いたEBウイルス増殖系の確立

使用从 Akata 细胞分离的未感染 EB 病毒的细胞建立 EB 病毒繁殖系统

基本信息

批准号：
05670281
负责人：
高田賢蔵
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

目的および意義:EBVトランスフォームリンパ球(LCL)におけるEBNAの発現は6種類のEBNAに共通なCまたはWプロモーターを使って行われるのに対し、バーキットリンパ腫(BL)細胞ではEBNA-1にユニークなFプロモーターが使われ、EBNA-1のみが発現する。今回、BL由来Akata細胞からEBVゲノム陰性の細胞クローンが分離されたので、EBVの再感染を行ない、BLでのFプロモーターの使用がBL細胞側の要因によるものか否かを調べた。また、Akata細胞は抗ヒト免疫グロブリン抗体(抗Ig)処理によりEBV産生が効率良く誘導され、このユニークな性状が再感染でも認められるか否かを併せて検討した。材料と方法:Akata細胞をクローニングして得られた5種類のEBV陰性クローンへ、B95-8またはAkata EBVを感染し、EBNAの発現を蛍光抗体法、ウエスタンブロット法により、EBNAプロモーターの使用をRT-PCR法により調べた。抗Ig抗体によるウイルス産生誘導はVCA抗体による蛍光抗体法により調べた。結果:1.EBV陰性クローンはいずれもEBVに感受性で、感染3日目に最高40%の細胞がEBNA陽性となった。2.ウエスタンブロット法で、EBNA-1に加えEBNA-2、EBNA-3が検出された。3.RT-PCR法で、親株がFプロモーターを使用していたのに対し、再感染細胞ではC、Wプロモーターを使用していた。4.抗Ig抗体処理によりウイルス産生が誘導されなかった。考察:BLとLCLでの使用プロモーターの違いは細胞側の要因以外のものによること、C、Wプロモーター使用により発現したEBNA-1以外のウイルス抗原が抗Ig抗体刺激によるウイルス産生誘導を抑制している可能性、が示唆された。

The purpose of this article is to clarify the significance of EBNA occurrence in EBV cell line (LCL), EBNA occurrence in 6 types of EBNA cell line (BL), EBNA-1 occurrence in 6 types of EBNA cell line (BL), EBNA-1 occurrence in 6 types of EBNA cell line (BL). Now, BL is derived from Akata cells, EBV negative cells are isolated, EBV reinfection occurs, BL is used, and BL cells are isolated. Akata cells were treated with anti-EBV antibodies (anti-Ig) to induce EBV production and re-infection of EBV traits. Materials and Methods:Akata cells were infected with 5 kinds of EBV negative cells, B95-8 cells were infected with Akata EBV, EBNA was detected by light antibody method, EBNA was detected by RT-PCR method. Anti-Ig antibody production and VCA antibody production Results: 1. EBV negative cells were found to be EBV sensitive, and EBNA positive cells were found in 40% of the infected cells on the 3rd day. 2. EBNA-1, EBNA-2, EBNA-3 and EBNA-3 are added to the list. 3. In the RT-PCR method, when the parent strain is used for F-PCR, the C and W-PCR strains are used for re-infecting cells. 4. Anti-Ig antibody treatment induces the production of anti-Ig antibodies. To investigate the possibility of inhibition of cell induction by anti-Ig antibody stimulation with antigens other than EBNA-1 in BL and LCL, and to explore the possible mechanisms of cell induction induced by anti-Ig antibody stimulation with antigens other than EBNA-1.