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種々の癌細胞株及び腫瘍組織で発現増強している遺伝子の解析

分析各种癌细胞系和肿瘤组织中表达增强的基因

基本信息

批准号：
05670527
负责人：
山木戸道郎
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670527/
关键词：
癌細胞発現増強 cDNAライブラリー

项目摘要

癌細胞では,正常細胞と異なる発現をしている種々の遺伝子が存在すると考えられている。我々は,癌細胞において特異的に発現増強していると思われる約6kbのmRNAの3'末端150塩基のcDNAをクローニングしたため、これをプローブとして,cDNAライブラリーを再スクリーニングし,陽性クローンを数個得た。このクローンについて塩基配列を検討したが、cDNAの3'末端800bpとgenomic DNA 3.5kbを含んでいた。mRNAの全長をクローニングして全塩基配列を決定することはできなかったが、得られた塩基配列には,データベースと有意なホモロジーはなかった。このcDNA断片をプローブとして種々の癌細胞株および肺癌組織についてサザンブロッティングおよびノザンブロッティングを行なった。この遺伝子は、サザンブロッティングにより癌細胞においてDNAの増幅や再編成は認められなかったが、上皮系の癌細胞で発現増強が認められた。また、同一症例の肺癌組織でも、転移巣によって発現量が異なっており、p53遺伝子の変異、1番染色体短腕の欠失、テロメア長の延長を認めた転移巣での発現増強が認められた。この遺伝子の発現増強は、c-mycやRb遺伝子の発現量とは関係なく、PHA刺激したリンパ球やB cell lineでは低レベルな発現量しかなく、単に細胞増殖に関わる遺伝子ではないことが示唆された。さらに5'側のシークエンス解析および発現レベルの解析,アミノ酸配列の推定を引き続き検討中である。

Cancer cells are different from normal cells in appearance, species and genes are present, and there is no evidence of this. We found that the expression of specific mRNA in cancer cells was increased. In the middle of the study, about 6kb of cDNA at the 3'end of mRNA was detected. The gene sequence of the cDNA is 800bp at the 3 'end and 3.5 kb at the 3' end. The full length of mRNA is determined by the sequence of the gene. The cDNA fragments were isolated from cancer cell lines and lung cancer tissues. The gene expression of the tumor cells was enhanced by DNA amplification and recombination, and the epithelial cells were enhanced by DNA recombination. In lung cancer tissue of the same case, the expression of p53 gene is different, the length of chromosome 1 is short, and the expression of p53 gene is long. The expression of c-myc and Rb genes increased, and the expression of c-myc and Rb genes decreased with PHA stimulation. The expression of c-myc and Rb genes decreased with PHA stimulation. In addition, the analysis of the 5'side of the system and the analysis of the occurrence of the system, the estimation of the acid alignment, and the analysis of the occurrence of the system.