M-CSF/PDGFキメラ受容体を用いた血液幹細胞の増殖と分化の分子機構の解明

利用M-CSF/PDGF嵌合受体阐明血液干细胞增殖和分化的分子机制

• 批准号: 05670910
• 负责人: 松井 利充
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670910/
• 关键词: M-CSF; PDGF; 受容体; チロシンキナーゼ; 幹細胞; オートクリン; TGF-β; (IL-1)インターロイキン1

造血反応は造血組織を構成する種々の細胞が構成的あるいは誘導的に産生する液性因子により制御されている。生理的な造血制御機構の理解にこれら液性因子およびその受容体遺伝子の発現調節機構を解明することが重要である。私達は単球・マクロファージ(Mφ)系細胞と間葉系支持細胞にそれぞれ特異的に発現しているMφコロニー刺激因子(M-CSF)と血小板由来成長因子(PDGF)受容体遺伝子の相互発現調節機構の存在に注目し、単球・Mφの増殖・分化の分子機構の1つとして、単球・Mφ系の細胞より分泌されるIL-1がPDGFオートクリンループを介しM-CSF産生・分泌調節を行っていることを報告してきた。本年度M-CSF遺伝子発現におけるTGF-βの役割とその分子機構を解析した。TGF-βは造血支持細胞を含む種々の間葉系細胞のM-CSF発現を誘導した。TGF-β誘導性M-CSFmRNA発現はIL-1やPDGF誘導性発現と同様に蛋白合成阻害剤により増強し、転写レベルにおいても誘導されることが核Run-offアッセイにて明らかとなった。またTGF-βはPDGF-Aおよび-B鎖遺伝子の発現も誘導したが、PDGF-Aおよび-B鎖それぞれの遺伝子の発現様式は異なった。さらにIL-1によるPDGF遺伝子発現様式とも異なった。すなわち、TGF-βはIL-1と同様にM-CSF遺伝子発現を転写レベルで誘導するが、それぞれの因子に特異的なM-CSFの産生・分泌調節にはPDGFオートクリンループが関与している。また、1つの受容体型チロシンキナーゼファミリーに属するPDGFおよびM-CSF受容体のキメラ受容体cDNAをマウス造血幹細胞に発現させ単球・Mφ系細胞の分化に必要なM-CSF受容体の機能領域を明らかにした。またこれらチロシンキナーゼ系受容体の細胞内情報伝達機構とクロストークしうるG蛋白共役型ペプチドホルモン受容体(コレシストキニン受容体)がヒトT細胞白血病細胞株に発現していることを明らかにし、その細胞増殖促進作用を証明した。

Hematopoiesis is composed of hematopoietic tissue and cells. It is composed of inducible factors and controls. It is important to understand the physiological mechanisms that control hematopoiesis, such as the mechanisms that regulate the production of fluid factors and other receptor genes. M-CSF and PDGF receptor proteins interact with each other and regulate the molecular mechanisms of proliferation and differentiation of M-CSF and PDGF receptor proteins. IL-1 is secreted by cells of the M-CSF family and is reported to regulate M-CSF production and secretion. This year, M-CSF gene discovery and molecular mechanism analysis of TGF-β gene TGF-β induces M-CSF expression in hematopoietic supporting cells, including mesenchymal cells. TGF-β-inducible M-CSF mRNA expression is the same as IL-1 and PDGF-inducible expression, and protein synthesis inhibition is enhanced and induced in the nucleus. The expression of TGF-β in PDGF-A and PDGF-B proteins is different from that in PDGF-A and PDGF-B proteins. The IL-1 gene was detected by PDGF gene expression system. The expression of M-CSF gene is regulated by IL-1 and TGF-β, and the production and secretion of M-CSF gene is regulated by PDGF gene. The receptor cDNA of PDGF and M-CSF receptor is necessary for the development of hematopoietic stem cells and the functional domain of M-CSF receptor necessary for differentiation of M-lineage cells. In addition, the intracellular information transmission mechanism of the CCRSNKINANA-related receptor and the G protein-cooperating PECTSNKINANA-type receptor (CORSNKINA-receptor) have been discovered in the T-cell leukemia cell line. This has been demonstrated in the future, and its role in promoting cell proliferation has been demonstrated.

项目成果

松井利充: "細胞増殖因子の最前線" 羊土社, 182 (1993)

松井俊光：“细胞生长因子的最前沿”Yodosha，182（1993）

Ito,M.: "Functional characterization of a human brain cholecystokinin-B receptor:A trophic effect of cholecystokin and gastrin" Journal of Biological Chemistry. 268. 18300-18305 (1993)

Ito,M.：“人脑胆囊收缩素-B 受体的功能特征：胆囊收缩素和胃泌素的营养作用”《生物化学杂志》。

Zimonjic,D.B.: "Localization of the human cholecystokinin-B/gastrin receptor gene(CCKBR)to chromosome 11p15.5-15.4 by fluorescence in situ hybridization" Cytogenetics and Cell Genetics. 65. 184-185 (1994)

Zimonjic,D.B.：“通过荧光原位杂交将人胆囊收缩素-B/胃泌素受体基因 (CCKBR) 定位到染色体 11p15.5-15.4”《细胞遗传学和细胞遗传学》。

Matsui,T.: "Growth Factors-Cell Growth,Morphogenesis,and Transforma-tion.Gann Monograph on Cancer Research 42" CRC Press (in press), (1994)

Matsui,T.：“生长因子 - 细胞生长、形态发生和转化。江恩癌症研究专着 42”CRC Press（正在印刷中），（1994 年）

Takaishi,T.: "Transforming growth factor-induced macrophage colony-stimulating factor gene expression in various mesenchymal cell lines" American Journal of Physiology. (in press).

Takaishi,T.：“在各种间充质细胞系中转化生长因子诱导的巨噬细胞集落刺激因子基因表达”美国生理学杂志。