血球の増殖・分化制御におけるケイシンキナーゼIδおよびεの機能解明

阐明keisin激酶Iδ和ε调节血细胞增殖和分化的功能

• 批准号: 13877160
• 负责人: 松井 利充
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13877160/
• 关键词: ケイシンキナーゼI; G-CSF; 造血細胞; 顆粒球; 細胞分化; レトロウィルスベクター

ケイシンキナーゼ(CKI)は、多くの細胞に発現するセリン・スレオニンキナーゼで、種を超えて保存されている。なかでもCKIδ・εは酵母で発見されたDNA複製・修復に関与するHRR25と高い相同性を持ち、空胞輸送、日内リズムや癌遺伝子Wntの信号伝達にも重要な役割を果たしている。私達は、ヒト血球におけるCKIδ・εmRNA発現を解析したところ、成熟顆粒球では末梢血単球や骨髄細胞に比し明らかな発現低下が認められ、分化に伴う発現制御の存在が示唆された。ヒト前骨髄性白血病細胞を顆粒球系に分化誘導するとCKIεmRNAの著減が見られるが、単球系への分化誘導では変化しない。マウス造血細胞32D細胞は、G-CSFやGM-CSF刺激により、CKIεmRNA発現に明らかな変化は認めなかったが、分化とともにCKIε蛋白が減少し、顆粒球分化に伴うCKIεの発現制御の存在が確認された。CKIε蛋白発現制御の機能的意義を解明するためヒトCD34^+細胞cDNAライブラリーから単離した野生型およびキナーゼ活性を消失させた変異型CKIεcDNAを、レトロウイルスベクターを用い造血細胞へ導入し、サイトカインによる分化誘導能を検討した。CKIεの過剰発現によりG-CSFおよびGM-CSF刺激による顆粒球分化が抑制された。キナーゼ活性を消失させたCKIε(dominant negative型)の導入により、サイトカイン刺激による分化の促進が逆に認められた。以上より、造血細胞においては、G-CSF・GM-CSFの刺激によりCKIεは発現調節され、その蛋白発現量の変化が直接顆粒球分化の制御に大きく関わっていると考えられた。CKIεが血球の増殖・分化異常を病態とする白血病やMDSの発症に関与しているかどうか興味のある課題である。

The CKI is a multi-cell phenomenon, and the CKI is a multi-cell phenomenon. CKIδ·ε is an important part of yeast development, which is related to DNA replication, repair and HRR25, high identity, cell transport, intra-day transmission, and signal transmission of cancer gene Wnt. CKIδ εmRNA expression in mature granulocytes, peripheral blood lymphocytes and bone marrow cells is lower than that in mature granulocytes. The expression of CKIεmRNA in myeloid leukemia cells is induced by differentiation of myeloid leukemia cells, and the expression of CKIεmRNA is induced by differentiation of myeloid leukemia cells. 32D hematopoietic cells were stimulated by G-CSF and GM-CSF, CKIεmRNA expression was detected, CKIε protein was decreased, granulocyte differentiation was accompanied by CKIε expression control was confirmed. To clarify the significance of CKIε protein expression and control function in CD34^+ cells, the expression of CKIε protein in CD34^+ cells was reduced from wild type to wild type, and the expression of CKIε protein in CD34 ^+ cells was reduced from wild type to wild type. CKI gene expression is inhibited by G-CSF and GM-CSF stimulation. CKIε(dominant-negative type) is introduced into the brain and stimulated to differentiate. The above mentioned factors are related to the regulation of CKIε production and protein production in hematopoietic cells, G-CSF and GM-CSF stimulation, and the regulation of direct granulocyte differentiation. CKIε related to the development of leukemia and MDS due to abnormal cell proliferation and differentiation