reg過剰発現マウス,reg欠損マウスの解析によるreg遺伝子の機能の解明

通过分析 reg 过度表达和 reg 缺陷小鼠来阐明 reg 基因的功能

• 批准号: 07670163
• 负责人: 米倉 秀人
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670163/
• 关键词: Reg; Pancreatic islet β-cells; Regeneration; Transgenic mouse; Gene targeting

regは、再生増殖を誘導したラットの膵ランゲルハンス島由来のcDNAライブラリーから分離された遺伝子で、再生時の膵ランゲルハンス島β細胞で強く発現する。本研究の目的は、reg蛋白の機能を解明するため、膵ランゲルハンス島β細胞でreg蛋白を過剰発現するトランスジェニックマウスとreg遺伝子を欠損させた遺伝子標的マウスを作成することである。平成7年度の研究は、以下のとおりに進行した。1)インスリンプロモーターとregの融合遺伝子を導入したトランスジェニックマウスを作製した。2)トランスジェニックマウスより膵ランゲルハンス島を分離し、ノーザン法、ウエスタン法、免疫組織学的方法によりreg蛋白が常に膵β細胞で発現されていることを確認した。3)このreg蛋白過剰発現マウスの膵β細胞の形態、大きさは、正常マウスと差は認められなかったが、膵ランゲルハンス島を分離しin vitroで膵β細胞の増殖能を検討したところ、reg蛋白過剰発現マウスの膵ランゲルハンス島は正常マウスと比較して1.5〜3倍のDNA合成が見られ、reg蛋白を過剰発現しているβ細胞は増殖能が上昇していることが示された。4)染色体上の遺伝子が変異reg遺伝子と相同組替えにより入れ換わったES細胞株ES1.4由来の変異細胞株をマウス胞胚に注入して代理母に移入し、キメラ個体を得た。5)4)で得られたキメラマウスの交配を行なったが、ES1.4由来の変異細胞株により作製したマウスは変異遺伝子のジャームライントランスミッションを起こさず、reg遺伝子欠損マウスは得られなかった。6)新しいES細胞株TT2に遺伝子標的ベクターを導入して染色体上の遺伝子が相同組換えにより入れ換わった変異細胞株を選択し、新たにreg遺伝子欠損マウスの作製を行っている。

Reg, regeneration, induction, isolation, isolation, and strong expression of beta cells. The purpose of this study is to understand the function of reg protein and to create a mechanism for the expression of reg protein and the impairment of reg gene expression targets in beta cells of the Langerhans Island. Heisei 7th year of research, the following is carried out. 1) The fusion gene of the fusion gene is introduced into the system. 2) The reg protein was identified by the method of isolation, immunohistochemistry, and immunohistochemistry. 3) Reg protein expression in β-cell morphology, large cell size, normal cell size, differential cell size, cell 4)The chromosome of ES cell line ES1.4 was transformed into a different cell line by embryo injection. 5)4) To obtain the correct mating sequence, ES1.4 to obtain the correct mating sequence. 6)The new ES cell line TT2 has a gene target that is introduced into the same chromosome, and the new ES cell line TT2 has a gene target that is not damaged.

项目成果

加藤一郎: "ペプチドC末端アミド化酵素:ペプチジルグリシン モノオキシゲナーゼとリアーゼ in "新しい酵素研究法"" 一島英治・小野寺一清編(東京化学同人), 85-91 (1995)

加藤一郎：“新酶研究方法”中的肽C末端酰胺化酶：肽酰甘氨酸单加氧酶和裂合酶”，市岛英二和小野寺一清编（东京化学同人），85-91（1995）

赤羽敦也: "サイトカインのNO合成酵素誘導による膵β細胞機能障害とその防止の分子機構." 生化学. 67. 780 (1995)

Atsuya Akabane：“胰腺 β 细胞功能障碍的分子机制及其通过细胞因子诱导 NO 合酶的预防。” 67. 780 (1995)。

Kato, I.: "Enhancement of glucose-induced insulin secretion in transgenic mice overexpressing human VIP gene in pancreatic β cells." Annals of New York Academy of Science. (in press). (1996)

Kato, I.：“在胰腺 β 细胞中过度表达人类 VIP 基因的转基因小鼠中葡萄糖诱导的胰岛素分泌的增强。”纽约科学院年鉴（1996 年出版）。

篁俊成: "CD38(ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase)とアメフラシADP-ribosyl cyclaseの遺伝子構造" 生化学. 67. 540 (1995)

Toshinari Takamura：“CD38（ADP-核糖基环化酶/环状 ADP-核糖水解酶）和海兔 ADP-核糖基环化酶的基因结构”生物化学 67. 540 (1995)。

東郷暁: "ヒトCD38のcyclic ADP-rebosyl cyclase合成・分解酵素活性について." 生化学. 67. 1323 (1995)

Akira Togo：“关于人类 CD38 的环状 ADP-rebosyl 环化酶合成/降解酶活性。”67. 1323 (1995)