新しいヒトrge遺伝子の構造と染色体座位の決定

人类新基因rge的结构和染色体位点的测定

• 批准号: 06670159
• 负责人: 米倉 秀人
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06670159/
• 关键词: reg; pancreatic islet β-cells; regeneration; gene family; genomic cloning; nucleotide sequence; gene expression; chromosomal localization

本発明の目的は、インスリン産生細胞増殖因子reg蛋白をコードする新しいヒト遺伝子を分離して構造を決定し、発現の組織特異性を明らかにするとともに、その染色体座位を決定することである。本研究は、当初の計画どおりに進行し、以下のように期待された成果を得た。1.弱い条件のサザンブロット分析でハイブリダイズしてくる、すでに分離されているreg遺伝子しとは明らかに異なる3.4kbpと2.2kbpのHindIII消化ヒトDNA断片を、ゲル電気泳動後回収しDNAライブラリーを作製した。1.で作製したゲノムDNAライブラリーをスクリーニングし、ヒトregcDNAとハイブリダイズする3.4kbpと2.2kbpのDNA断片をクローン化した。これらのDNAの塩基配列を決定した結果、3.4kbpのDNA断片が新しいヒトreg遺伝子の5領域、2.2kbpのDNA断片が3領域であることが明らかとなった。さらに、PCR法を用いて3.4kbpと2.2kbpのDNA断片がゲノム上、連続していることを確認した。2.で分離した新しいreg遺伝子のエクソンに相当する領域にプラマ-を作製し、脾臓RNAより、RT-PCR法により新しいヒトreg遺伝子に由来するcDNAを分離し、構造を決定した。その結果、この新しいreg遺伝子はすでに分離されているreg遺伝子と同じ166アミノ酸のタンパクをコードしており、両者はアミノ酸で87%という非常に高い相同性を有していた。そこで、先に分離されたreg遺伝子をregIαと改称し、新しく分離したreg遺伝子をregIβと命名した。ノーザンブロット分析により、regIαが膵、胃、腎で発現しているのに対し、regIβは膵でのみ発現していることが明らかとなった。regIαとregIβ遺伝子DNAをプローブとして、fluorecence in situhybridization(FISH)法により両遺伝子の染色体座位を決定したところ、両者は第2染色体のごく近傍に位置していることが明らかとなった。

The purpose of this invention is to determine the structure, specificity, and locus of a novel gene that produces a cell growth factor reg protein. This study was carried out according to the original plan, and the following results were expected. 1. Under weak conditions, HindIII digestion of DNA fragments and electrophoresis of DNA fragments was carried out. 1. DNA fragments of 3.4kbp and 2.2kbp were isolated from DNA fragments. The sequence of DNA fragments was determined. The 3.4kbp DNA fragment was found in 5 domains and the 2.2kbp DNA fragment in 3 domains. The DNA fragments of 3.4kbp and 2.2kbp were identified by PCR. 2. Isolation of cDNA from novel reg genes and determination of cDNA structure in the corresponding domain by RT-PCR and RNA sequencing As a result, the new reg gene was isolated from the original reg gene, and the same gene was isolated from the original reg gene, and the same gene was isolated from the original reg gene. The name regIαIn addition to the above, the analysis of regIα, stomach and kidney shows that regIβ is the most important factor in the development of gastric cancer. regIα, regIβ, regIβ, regI α, regI α, regI β, regI α, regI β, regI α, regI α, regI β, regI α, regI α, regI β, regI β, regI α, regI α, regI β, regI α, regI α, regI β, regI α, regI β, regI

项目成果

加藤一郎: "膵ランゲルハンス島β細胞でVIP遺伝子を過剰発現するトランスジェニックマウスの作製と導入遺伝子による血糖降下作用." 分子糖尿病学. 5. 73-80 (1994)

Ichiro Kato：“在胰岛 β 细胞中过度表达 VIP 基因的转基因小鼠的创建以及引入基因的降血糖作用。” 5. 73-80 (1994)。

海野倫明: "reg蛋白を膵β細胞で過剰発現するトランスジェニックマウスの作製." 糖尿病,Supplement. 37. 226 (1994)

Michiaki Unno：“创建在胰腺 β 细胞中过度表达 reg 蛋白的转基因小鼠。”，增刊，37. 226 (1994)。

Kato,I: "Enhanced insulin secretion and improved glucose tolerance in transgenic mice overexpressig human VIP/PHM-27 gene in pancreatic β cells." 15th International Diabetes Federation Congress Abstracts. 313 (1994)

Kato, I：“在胰腺 β 细胞中过度表达人 VIP/PHM-27 基因的转基因小鼠中，胰岛素分泌增强并改善了葡萄糖耐量。”第 15 届国际糖尿病联合会大会摘要 313（1994 年）。

Moriizumi, S.: "Isolation, structural determination and expression of a novel reg gene, human regI β." Biochimica et Biophysica Acta. 1217. 199-202 (1994)

Moriizumi, S.：“新型 reg 基因（人 regI β）的分离、结构测定和表达。”1217. 199-202 (1994)

Suzuki, Y.: "Structure and expression of a novel rat Reg III gene." Gene. 144. 315-316 (1994)

Suzuki, Y.：“新型大鼠 Reg III 基因的结构和表达。”