Wilms腫瘍におけるWT1遺伝子微小変異の腫瘍発生への機能

维尔姆斯瘤WT1基因微突变在肿瘤发生发展中的作用

• 批准号: 07670222
• 负责人: 菊池 春人
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670222/
• 关键词: Wilms腫瘍; WT1遺伝子; Denys-Drash症候群

Wilms腫瘍関連遺伝子WT1の腫瘍発生における機能について明確にするために,関連疾患であるDenys-Drash症候群患者における遺伝子解析およびWT1遺伝子変異を伴う腫瘍細胞株を樹立してその遺伝子異常の意義について解析を行った。1.Denys-Drash症候群についての解析新たに3例の解析を行った。最近Wilms腫瘍を発症した1例はWT1 exon8にpoint mutationを認め,これによってDenys-Drash症候群の診断が確定した。また,今回解析した症例を含め,計8例の患者のうち5例にintron9のsplicing donor siteにpoint mutationを認めた。これらの変異様式はこれまで報告がないものでありsplicingに異常をきたすことが示された。また,intron変異を伴う症例では病態が通常のDenys-Drash症候群と異なる共通性がみられた。このことからintron異常が新たな病態群の指標となることが示された。さらにexon9のsplicingの腫瘍発生・器官形成における意義を具体的に示す所見として非常に興味深い。2.WT1遺伝子異常を伴ったWilms腫瘍細胞株についての解析電子顕微鏡観察・免疫組織化学的検討によって,この細胞は腎の上皮細胞としての性格を持っていることが示された。また,この腫瘍での遺伝子変異(WT1 exon10の43bp重複)の意義を検索するために,腫瘍からRNAおよび蛋白を抽出し,RT-PCRならびにWestern blotによる解析を行った結果,本腫瘍細胞ではWT1 mRNAは発現するもののWT1蛋白は検出されなかった。このことから変異によってstop codonがshiftし,不安定なWT1蛋白が産生されることが示唆された。現在これらの異常を伴うWT1遺伝子についてcloningを行い,発現vectorを作成している。

Wilms tumor-related gene WT1 gene mutation analysis in Denys-Drash syndrome patients, tumor development function analysis, and related disease analysis in tumor cell lines. 1.Denys-Drash syndrome analysis of new 3 cases of analysis of the line. Recently, Wilms 'disease was diagnosed in 1 case, and the diagnosis of Denys-Drash syndrome was confirmed. 5 cases of intron9 and splicing donor site mutation were identified. This is the first time I've ever seen an anomaly. Intron is associated with common Denys-Drash syndrome. This is the first time that I've seen an anomaly. Exon9 's splicing of tumor development, organ formation, and significance of specific findings are very interesting 2. WT1 gene abnormalities associated with Wilms tumor cell lines were analyzed by electron microscopy and immunohistochemistry. In addition, the expression of WT1 mRNA and WT1 protein in tumor cells was detected by RT-PCR and Western blot analysis. This is the first time that WT1 protein has been produced. Now, the anomaly is accompanied by WT1, and the vector is created.