WT1遺伝子の微小変異の同定とその腫瘍・奇形発生の分子的機序

WT1基因小突变的鉴定及其肿瘤/致畸的分子机制

• 批准号: 06670203
• 负责人: 菊池 春人
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06670203/
• 关键词: Wilms腫瘍; WT1遺伝子; Denys-Drash症候群

1)Denys-Drash症候群におけるWT1遺伝子変異の解析:これまで解析した5例について詳細な解析を行った。そのうち,Wilms腫瘍および非腫瘍部腎でWT1遺伝子の両方のalleleに変異(exon8の点突然変異)を認めた症例については,白血球についても解析を行い,germlineでもWT1の両方のalleleの異常が認められた。このことから,従来の仮説と異なり,Wilms腫瘍発症にはWT1遺伝子の両方のalleleの異常だけでは十分でないことが示され,報告した(FEBS letter 1995)。またintron9の4番目の塩基に突然変異を示していた3例については,変異部分をvectorに組み込んだWT1 minigeneを作成し発現させる解析を行い,この変異によってsplicing patternが変化することを確認した。2)弧発生Wilms腫瘍におけるWT1遺伝子変異の解析:従来の症例と合わせ,計50例について解析を行い,本年度は新たに1例の微小変異症例を見出した,これは,現在まで報告のないexon10の43bpの重複であり,この腫瘍から,scid mouseへの継代移植,細胞株の樹立を行うことができた。これまで,Wilms腫瘍の細胞株は樹立が困難で,特にWT1遺伝子の変異を伴うものは,確立されていなかったが,今後これらの細胞を用い,正常WT1遺伝子導入による増殖の変化などをさぐることで,WT1遺伝子の腫瘍発生における機能を解析する系となるものと思われる。3)正常および変異WT1遺伝子産物機能解析:現在,正常白血球・脾あるいはWilms腫瘍よりRNAを抽出し,RT-PCRによってWT1の全領域のcDNAを作成中である。

1) Denys-Drash Syndrome におけるWT1 伝子変differentのanalytics: これまでanalyticsした5 casesについてDetailedなanalyticsを行った.そのうち, Wilms tumor およびnon-swollen part of the kidney WT1 伝子の両方のallele に変different (exon8 のpoint sudden change) を recognized めた Symptoms に つ い て は, white blood cells に つ い て も analysis を row い, germline WT1 WT1 の両 square のallele の abnormal め ら れ た.このことから,従来の仮说とdifferentなり,Wilms's swelling disease にはWT1 伝子の両Fang のallele's abnormal だけでは十でないことがshow され, report した(FEBS letter 1995).またintron9の4epimeの塩基に suddenly 剉 Different を Show し て い た 3 cases に つ い て は , 剉 Different part を vector に group み込 ん だ WT1 Minigene is made and analyzed and analyzed, and the splicing pattern is modified and confirmed. 2) The analysis of Wilms’ tumor of arc uterus and the difference between WT1 and WT1: a total of 50 cases, a total of 50 cases, an analysis of the disease, and a new one this yearに1 case of minor abnormality した, これは, now まで report のないexon10の43bp の Repeat であり, このswelling から, scid The mouse is used for generation transplantation, and the establishment of cell lines is carried out. It is difficult to establish the cell line of Wilms tumor, especially the WT1 gene.の変different を与うものは, Establish されていなかったが, and use it in the future WT 1. The function of the disease caused by the swelling and infection of the remaining child is analyzed and analyzed. 3) Functional analysis of normal WT1 heterogeneous WT1 gene products: Now, normal white blood cells and spleen WT1 RNA are extracted, and RT-PCR WT1 full range cDNA is produced.

项目成果

Kikuchi H.et al.: "A critical mutation in both WT1 alleles is not sufficient to cause Wilms'tumor" FEBS letter. (in press).

Kikuchi H.等人：“两个 WT1 等位基因的关键突变不足以引起肾母细胞瘤”FEBS 信。