抗c-Fms抗体によるmotheatenマウスの異常の抑制とその利用

抗c-Fms抗体对母鼠异常的抑制及其应用

• 批准号: 07670368
• 负责人: 林 眞一
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670368/
• 关键词: motheatenマウス; Hcph; c-Fms; c-Kit; 骨髄培養; B細胞; マスト細胞; 血液幹細胞

motheaten(me)マウスは血液細胞系譜特異的に発現するSH2ドメインを持つ脱リン酸化酵素(Hematopoietic cell phosphatase:Hcph)遺伝子の変異で多くの血液細胞系譜で異常が観察されているが、主なものはマクロファージの異常増殖とCD5陽性B細胞による自己免疫疾患である。meマウスの骨髄、脾臓、胸腺、リンパ節の培養は3日以内にストロマ細胞が存在してもほとんどマクロファージにより占められ、他の血液細胞の増殖は全く見られなかった。そこでストロマ細胞にPA6を用い、IL-7とAFS98(抗c-Fms抗体)を添加したところマクロファージの異常増殖を阻害することができB細胞系譜の細胞を誘導し増殖させることができた。このB220弱陽性の細胞は大型の細胞でIgMやCD5陽性B細胞のマーカーであるMac1も発現していない未熟なB前駆細胞であった。また骨髄細胞をIL-3とAFS98で培養することでマスト細胞株も作製できた。このことからmeマウスにみられるマクロファージの増殖もc-Fmsからの刺激によることが明らかとなりmeマウスの細胞株を樹立するにはAFS98を添加すればよいことが明らかとなった。しかし予想に反してB細胞もマスト細胞も正常マウスからのものよりむしろ増殖が低下していた。meマウス由来のマスト細胞は正常と同様にc-Kitを発現していたので、IL-3の代わりにSCFを添加してみたがやはり増殖は低下していた。さらにB細胞、マスト細胞ともアポトーシスにより死滅する細胞が多く、Hcphの標的分子の脱リン酸化が行われないことによりすべての血液細胞系譜の増殖が増強されるのではなくmeマウスで見られるようにマクロファージ、単球系においてはc-Fmsからの刺激が増強されるが、B細胞やマスト細胞のIL-3受容体、c-Kitからのシグナルにはむしろリン酸化の延長は増殖、維持にとってマイナスに働くことが明らかになった。当初の目的の細胞株作製の実験系は樹立できたので、今後、この培養系を用いて各血液細胞系譜の細胞株を樹立しHcphの機能を検討する。meマウスの血液幹細胞よりB前駆細胞を誘導できるのでCD5B細胞の分化についても検討する。培養系における結果は生体内への抗c-Fms抗体の投与により症状が改善する可能性を示している。

motheaten(me) Culture of bone marrow, spleen, thymus and lymph nodes within 3 days, and the proliferation of other blood cells The addition of PA6, IL-7 and AFS98(anti-c-Fms antibody) to B cell lineages inhibits the induction of abnormal proliferation. These B220 weakly positive cells are large cells, IgM and CD5 positive B cells are immature B cells. Cell culture of IL-3 and AFS98 This is the first time I've seen a cell in my life. I want to be able to control the growth of B cells. The origin of IL-3 is the same as that of c-Kit. B cells, stem cells, and c-Fms stimulate the proliferation of B cells and IL-3 receptors in T cells, and B cells stimulate IL-3 receptors in T cells. C-Kit is the first to be developed and maintained. The purpose of the cell line production system is to establish the function of Hcph in the future, and the use of this culture system to establish the function of Hcph in various blood cell lines. The stem cells of CD5 B cells are induced by the enzyme. The results of culture showed the possibility of improving symptoms by administration of anti-c-Fms antibodies in vivo.

项目成果

S.I.Hayashi,et al: "Identification of the control regions formouse c-kit gene transcription induced by retinoic acid" DNA Res.2. 211-218 (1995)

S.I.Hayashi 等人：“视黄酸诱导的 c-kit 基因转录控制区域的鉴定”DNA Res.2。

T.Sudo,et al: "Hieralchical relation of c-kit and c-fmsin intramarrow production of CFU-M" Oncogene. 11. 2469-2476 (1995)

T.Sudo 等人：“c-kit 和 c-fmsin 骨髓内产生 CFU-M 的层次关系”癌基因。