血液細胞特異的脱リン酸化酵素Hcphの機能解析とmotheatenマウスの治療

血细胞特异性去磷酸酶Hcph的功能分析及对母鼠的治疗

• 批准号: 08670366
• 负责人: 林 眞一
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670366/
• 关键词: meマウス; チロシンフォスファターゼ; Hcph; PTP1C; SHP1; B前駆細胞; 自己免疫疾患; インターロイキン7; c-Kit; c-Fms

Hcph/PTP1C/SHP1チロシンフォスファターゼ欠損motheaten(me)マウスは様々な造血因子の受容体の脱リン酸化が遅延し、シグナルが強調された形で表現される。特に、培養ではマクロファージ、単球系の細胞の異常増殖のため他の血液細胞系譜の出現が完全に阻害される。我々はM-CSF受容体c-Fms対する阻害性抗体を添加することでme骨髄よりpro-B細胞株を樹立した。meマウスのB細胞はほとんどすべてCD5陽性の自己免疫疾患で増加するB細胞群で占められている。今回、樹立した細胞株(MEBl-4)はIL-7とSCFに依存性に増殖し、特にIL-7を除くと速やかにアポトーシスで死滅した。免疫グロブリン遺伝子はDJ再構成のみが行われておりVDJの再構成前の未熟な細胞株であった。RAG-2(-/-)マウス及びp53(-/-)マウスより同様に未熟B前駆細胞を作製しHcphの発現を検討した結果、DJ再構成以前より発現し分化してもその発現は継続されていることが確認された。MEB1-4は初期B前駆細胞に発現している分子には大きな変化はみられなかったが、既にCD5を発現しており、さらにscidマウスに経静脈投与すると骨髄で維持、増殖し、脾臓と腹腔に散布された。正常マウスにみられるCD5 B前駆細胞は胎仔肝から腹腔へ移動すると予想されており、この細胞株を用いることでCD5 B細胞の遊走、分化、増殖機構の解析が可能となった。Hcphの欠損した細胞株は現在まで報告がなく、シグナル伝達系解析にも有用と考えられる。

Hcph/PTP1C/SHP1 has a long history of loss of motheaten(me), and its receptor for hematopoietic factors has a long history of acidification. In particular, the abnormal proliferation of cell lines in culture and culture is completely prevented from occurring in other blood cell lineages. We have established pro-B cell lines by adding protective antibodies to M-CSF receptor c-Fms. CD5 positive B cell populations are increasing in number. In the present study, we established a cell line (MEB1 -4) that is IL-7-SCF-dependent, and specifically IL-7-dependent. The immune system is a mature cell line. RAG-2(-/-) and p53(-/-) are the same as immature B cells. MEB1 -4 is the first B cell to be developed, and CD5 is the first to be developed, and the second to be developed, and the third to be developed, and the fourth to be developed, and the CD5B cells migrate from fetal liver to abdominal cavity. It is possible to analyze CD5B cells migration, differentiation and reproductive mechanism. Hcph cell lines with defective cells are reported to be useful for analysis of Hcph cell lines.

项目成果

S.I.Hayashi et al: "Osteoclast precursors in bone marrow and peritoneal cavity" J.Cell.Physiol.170. 241-247 (1997)

S.I.Hayashi 等人：“骨髓和腹膜腔中的破骨细胞前体”J.Cell.Physiol.170。

H.Yoshida et al: "Neural and skin cell-specific expression pattern conferred by steel factor regulatory sequence in transgenic mice." Developmental Dynamics. 207. 222-232 (1996)

H.Yoshida 等人：“转基因小鼠中钢因子调控序列赋予神经和皮肤细胞特异性表达模式。”

宮本顕友、林眞一: "免疫不全の分子医学(分担)" 羊土社, 157 (1996)

Akitomo Miyamoto、Shinichi Hayashi：“免疫缺陷的分子医学（分享）”Yodosha，157（1996）