カルシウムセンサー(S-モヂュリンとS26)の構造とN-末端ミリスチン酸基の役割

钙传感器（S-调节蛋白和 S26）的结构和 N 端肉豆蔻酸基团的作用

• 批准号: 07680721
• 负责人: 小林 祐次
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07680721/
• 关键词: S-モジュリンファミリー; 視細胞内; Ca^<2+>イオン; Ca^<2+>濃度センサー; ミリストイル基; S-モジュリン; S26; 大量発現系

S-モジュリンファミリーは、外的刺激によって視細胞内に動員されたCa^<2+>イオンを検知して、その後の細胞応答を調節する、視細胞のCa^<2+>濃度センサーである。これら視細胞カルシウム結合蛋白質はCa^<2+>濃度の増加を自らの構造変化の情報に変換して標的蛋白質に伝達すると考えられる。また、S-モジュリンファミリーのもう一つの特徴であるN末端のミリストイル基はCa^<2+>依存的な視細胞外節円盤膜への結合を担っていることが報告されている。一般に、生命現象の複雑かつ巧妙な機構を理解するためには、それに関わる生体分子の機能とそれらの相互作用を構造的見知から解明することが必要である。本研究では以上のような観点にたち、S-モジュリンとS26の立体構造を明らかにし、その機能を原子レベルで理解することを目的とし、さらにS-モジュリンとS26の構造機能相関を比較、検討した。その結果、i) 大腸菌によるS-モジュリンとS26の大量発現系を構築し、さらに精製系を確立した。また、得られたS-モジュリンとS26が天然のものと同一であることを示した。ii) CD、蛍光測定により、Ca^<2+>、Mg^<2+>といった2価金属イオンのS-モジュリンとS26の構造におよぼす影響についていくつかの知見を得た。iii) S-モジュリンとS26に安定同位体^<15>N、^<13>Cを導入することに成功し、水溶液における立体構造解析をめざした多次元NMRの適用をおこなった。

S - モ ジ ュ リ ン フ ァ ミ リ ー は, outside stimulation に よ っ て に depending on cell mobilization さ れ た Ca ^ 2 + < > イ オ ン を 検 know し て, そ の 応 の cells after a を adjust す る, depending on the cell の Ca ^ 2 + < > concentration セ ン サ ー で あ る. こ れ ら visual cell カ ル シ ウ ム binding protein は Ca ^ 2 + < > concentration の raised を since ら の structure - the の intelligence に variations in し て target protein に 伝 da す る と exam え ら れ る. ま た, S - モ ジ ュ リ ン フ ァ ミ リ ー の も う a つ の, 徴 で あ る N terminal の ミ リ ス ト イ ル base は Ca ^ 2 + < > section interdependence な regards extracellular has drifted back towards &yen; plate membrane へ の combining を bear っ て い る こ と が report さ れ て い る. General に, life phenomenon の 雑 か つ clever な institutions を understand す る た め に は, そ れ に masato わ る raw body function of molecular の と そ れ ら の interaction を structure see know か ら interpret す る こ と が necessary で あ る. This study で は above の よ う な 観 point に た ち, S - モ ジ ュ リ ン と S26 の three-dimensional structure を Ming ら か に し, そ の function を atomic レ ベ ル understand で す る こ と を purpose と し, さ ら に S - モ ジ ュ リ ン と S26 の function of tectonic facies masato を comparison, beg し 検 た. Youdaoplaceholder0 そ results: i) Large quantities of escherichia coli によるS-モジュリ とS26 strains are present in を formation による, さらに refinement を establishment of た. ま た, ら れ た S - モ ジ ュ リ ン と S26 が natural の も の と same で あ る こ と を shown し た. Ii) CD, determination of 蛍 light に よ り, Ca ^ < > 2 +, Mg ^ 2 + < > と い っ た 2 価 metal イ オ ン の S - モ ジ ュ リ ン と S26 の tectonic に お よ ぼ す influence に つ い て い く つ か の knowledge を た. Iii) S - モ ジ ュ リ ン と S26 に stable isotopic body ^ < 15 > N, ^ < 13 > C を import す る こ と に successful し, aqueous に お け る three-dimensional structure parsing を め ざ し た multidimensional NMR の applicable を お こ な っ た.

项目成果

N.Nemoto et al.: "Solution Structure of ω-Conotoxin MVTTC Determined by NMR." Biochem.Biophys.Res.Commun.207. 695-700 (1995)

N.Nemoto 等人：“通过 NMR 测定 ω-芋螺毒素 MVTTC 的溶液结构”。 Biochem.Biophys.Res.Commun.207 (1995)。

K.Uegaki et al.: "15N labeling method of peptides using a thioredoxin gene fusion expression system : and application to ACTH-(1-24)" FEBS Letters. 379. 47-50 (1996)

K.Uegaki 等人：“使用硫氧还蛋白基因融合表达系统的肽的 15N 标记方法：及其在 ACTH-(1-24) 上的应用”FEBS Letters。

R.Katahira et al.: "Solution Structure of A Human Calcitonin Analog Elucidated by NMR and Distance Geometry Calculations." Int.J.Peptide Protein Res.45. 305-311 (1995)

R.Katahira 等人：“通过 NMR 和距离几何计算阐明人类降钙素类似物的溶液结构。”

N.Nemoto et al.: "Solution Structure of Adrenocorticotropic Hormone Fragmenta (1-24)" Peptide Chemistry. 1994. 81-84 (1995)

N.Nemoto 等人：“促肾上腺皮质激素片段 (1-24) 的溶液结构”肽化学。

A.Aumelas et al.: "[Lys-2-Arg-1]-Endothelin-1 Solution Structure by 2D 1H-NMR : Possidle Involvement of Electrostatic Interactions in the Improved Disulfide Bridge Formation and Intthe Decreased Biological Activity." Biochemistry. 34. 4546-4561 (1995)

A.Aumelas 等人：“通过 2D 1H-NMR 测定 [Lys-2-Arg-1]-Endothelin-1 溶液结构：静电相互作用可能参与改善二硫键形成并降低生物活性。”