インスリン様成長因子とその結合蛋白質との複合体の構造解析

胰岛素样生长因子与其结合蛋白复合物的结构分析

• 批准号: 07224208
• 负责人: 小林 祐次
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07224208/
• 关键词: インスリン様成長因子; ^<15>N核; 多核多次元NMR; 分子動力学計算; 結合蛋白質BP-3; 複合体形成

インスリン様成長因子(IGF-I)の溶液構造を決定した。^<15>N核によるラベル化を行い多核多次元NMR法と分子動力学計算を用いてその溶液構造を精密化した。それらの溶液構造を天然体と同様に構造解析し三者を比較し構造と活性の相関を論じた。IGF-Iとその結合蛋白質BP-3の複合体形成の様式を、本研究で改良を施した超遠心機を用い、沈降平衡法で解析した。^<15>Nラベル化IGF-IとBP-3の複合体を多核多次元NMRにより解析し始めたが、冷凍保存中にBP-3が変性するという事故に遭遇した。BP-3を再調製でき次第、すぐに実験を再開し、15Nのみならず^<13>Cをも含むダブルラベルしたIGF-Iを用いて、所期の目的を果たす態勢にある。多核多次元NMRによるこのような大きな蛋白質の複合体の構造解析は未だ行われていないが、ここに予備実験は全て完了した言える。

The <s:1> solution structure を of the <s:1> growth factor (IGF-I) is determined by を た. ^ < 15 > N nuclear に よ る ラ ベ ル change line を い multi-core multidimensional NMR method と molecular dynamics calculation を with い て そ の solution structure を motors し た. Youdaoplaceholder0 それら solution structure を natural body と similar に structure analysis <e:1> The three を comparison of <s:1> structure と activity <e:1> correlation を theory じた. IGF-Iとそ <s:1> binds to the protein BP-3 <s:1> complex to form a <s:1> pattern を. In this study, で is modified を, <s:1> is used, た is performed at a very long distance, を is used, とそ is analyzed by the sinking equilibrium method で, and た is resolved. ^ < 15 > N ラ ベ ル the IGF -i と BP - 3 の complex を multi-core multidimensional NMR に よ り parsing し beginning め た が, cryopreservation of BP - 3 が に - sex す る と い う accident suffered し に た. BP again - 3 を modulation で き phase, す ぐ に be 験 を to open し, 15 n の み な ら ず ^ < 13 > C を も containing む ダ ブ ル ラ ベ ル し た IGF -i を with い て, the purpose of the phase is の を fruit た す situational に あ る. Multi-core multidimensional NMR に よ る こ の よ う な big き の な protein complexes の structure は line not だ わ れ て い な い が, こ こ に reserve be 験 は て all up し た said え る.

项目成果

R.Katahira et al.: "Solution Structure of A Human Calcitonin Analog Elucidated by NMR and Distance Geometry Calculations." Int.J.Peptide Protein Res.45. 305-311 (1995)

R.Katahira 等人：“通过 NMR 和距离几何计算阐明人类降钙素类似物的溶液结构。”

K. Uegaki et al.: "15N labeling method of peptides using a thioredoxin gene fusion expression system: application to ACTH-(1-2)" FEBS Letters. 379. 47-50 (1996)

K. Uegaki 等人：“使用硫氧还蛋白基因融合表达系统的肽的 15N 标记方法：应用于 ACTH-(1-2)”FEBS Letters。

A. Aumelas et al.: "[Lys-2-Arg-1]-Endothelin-1 Solution Structure by 2D 1H-NMR: Possible Involvement of Electrostatic Interactions in the improved Disulfide Bridge Formation and in the Decreased Biological Activity." Biochemistry. 34. 4546-4561 (1995)

A. Aumelas 等人：“通过 2D 1H-NMR 测定 [Lys-2-Arg-1]-Endothelin-1 溶液结构：静电相互作用可能参与改善二硫键形成和降低生物活性。”

N. Nemoto et al: "Solution Structure of ω-Conotoxin MVIIC Determined by NMR." Biochem. Biophys. Res. Commun.207. 695-700 (1995)

N. Nemoto 等人：“通过 NMR 测定 ω-芋螺毒素 MVIIC 的溶液结构”，Biochem Res. 695-700。

N. Nemoto et al: "Solution Structure of Adrenocorticotropic Hormone Fragment(1-24)" Peptide Chemistry. 1994. 81-84 (1995)

N. Nemoto 等人：“促肾上腺皮质激素片段 (1-24) 的溶液结构”肽化学。