蛋白質生合成の最終過程を司るリボソーム再生因子(RRF)の立体構造解析

控制蛋白质生物合成最终过程的核糖体再生因子（RRF）的三维结构分析

• 批准号: 09278220
• 负责人: 小林 祐次
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09278220/
• 关键词: RRF; リボソーム; 蛋白質生合成; 翻訳終結; NMR

従来の蛋白質生合成系の研究においては、翻訳の開始-伸長-終結の各段階に比べて、翻訳終結後のリボソーム-mRNA複合体の運命についてはあまり注目されていなかったが、近年この複合体を解離させるのに不可欠な蛋白質因子であるリボソーム再生因子(RRF)の存在が解明され、関心をもたれている。このリボソーム再生過程は、蛋白質生合成系の効率を維持するのに必須であり、遺伝子の発現制御にも関与していると思われる。しかし現在のところRRFの機能の分子論的メカニズムについては未知の点が多い。そこでRRFによるリボソーム-mRNA複合体の認識機構と、解離促進の機構について明らかにするため研究を行った。得られた成果として、1、大腸菌を用いたRRFの大量発現系を構築した。その結果NMR測定に不可欠な安定同位体標識した試料が容易に得られるようになった。また得られた試料を用い、NMR測定条件を検討したところ、適した条件を見つけることができた。2、HNCACB、CBCA(CO)NHといった各種の多核多次元NMR法を適用することによって、RRFの主鎖原子核の大部分について化学シフトを同定することができた。それによって、二次構造に関する知見が得られた。またNOE、J結合定数などの測定により、構造情報を収集することができた。3分析用超遠心機(沈降平衡法)を用いてRRFとEF-Gとの相互作用を解析した。

In the study of protein synthesis in recent years, we have studied the effect of protein synthesis, the beginning-elongation-phase comparison of each segment, the end-of-life cycle of protein synthesis and the synthesis of mRNA complex. in recent years, there is a clear solution for the existence of recombinant protein factor, protein factor and regeneration factor (RRF). I don't know what to do with my heart. During the regeneration process, the protein synthesis system must be controlled and controlled to maintain the protein synthesis rate. At present, there are many unknown points in the molecular theory of RRF. We need to know that the RRF complex, the mRNA complex, and the agency for the promotion of isolation are responsible for the development of research. The results are as follows: 1. A large number of bacteria are used to treat RRF. The results show that the NMR test results show that it is easy to obtain the data of the stable aptitude tag. You can use the NMR to determine the conditions and conditions. 2. HNCACB, CBCA (CO) NH have been used for various polynuclear multivariate NMR methods. Most of the nuclei of the main nuclei of the RRF have been tested in the same way as the chemical ones. If you don't know what you know, you won't know what you've heard. The combination of NOE and J combined with the number of data to determine the value of the test, the data set of the system, the data set, the data set and the data set. (3) the super heart machine (sinking balance method) was used to analyze the interaction between RRF and EF-G.

项目成果

S.Uchiyama: "Mcasurcment of thermodynamic quantities in the heating-rate dcpendent thermal transitions of sequenced polytripeptides" Chemical Physies Letters. 281. 92-96 (1997)

S.Uchiyama：“测序聚三肽的加热速率依赖性热转变中热力学量的增加”化学物理学快报。

Naoyoshi Chino: "Topological isomers of human uroguanylin:interconversion between biologically active and inactive isomers" FEBS letters. 421. 27-31 (1998)

Naoyoshi Chino：“人尿鸟苷蛋白的拓扑异构体：生物活性和非活性异构体之间的相互转换”FEBS 信件。

Hiroaki Gouda: "Solution structure of α-conotoxin MI determined by H-NMR spectroscopy and molecular dynamics simulation with the explicit solvent water" BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA. 1343. 327-334 (1997)

Hiroaki Gouda：“通过 H-NMR 光谱和使用显式溶剂水的分子动力学模拟测定 α-芋螺毒素 MI 的溶液结构”BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA 1343. 327-334 (1997)。

H.Takashima.: "Solution Structure of Neocarzinostatin Determined by Homonuclear Two-Dimensional Nuclcar Magnetic Resonance." Neocarzinostatin:The Past,Present,and Future Anticanccr Drug. 83-107 (1997)

H.Takashima.：“通过同核二维核磁共振测定新制癌菌素的溶液结构。”