权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

臓器特異的mRNAの検出と法医学的応用に関する研究

器官特异性mRNA检测及法医学应用研究

基本信息

批准号：
07807049
负责人：
高浜桂一
金额：
$ 1.28万
依托单位：
宮崎医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07807049/
关键词：
特異抗原 mRNA cDNA PCR

项目摘要

特定の臓器で特異的に生合成される蛋白のmRNAを検出することによって、法医学的試料からその由来臓器を識別できるのではないかと考えた。先ず、肝臓では、我々の分離したLSAについてリシルエンドペプチダーゼ処理後、そのペプチド断片のアミノ酸配列を決定した。LSAのN末端シークエンスとペプチド断片のシークエンスをもとに3'、5'端のプライマーを作製し、肝臓のmRNAからPCR法によってプローブを合成した。次いで、このプローブを用いて肝臓のcDNAライブラリーを検索した。同時に、抗ヒトLSAマウスモノクローナル抗体を用いた抗体スクリーニングを行った。その結果、LSAの肝特異性は、コア蛋白に付随する糖鎖構造にあるものと考えられた。今後は、LSAの全cDNA配列の決定とその糖鎖構造による臓器特異性についての解明が必要であると思われた。さらに、肺に特異的に発現される蛋白を検索した結果、肺surfactant-associated protein(A-D),clara cell 10kDa proteinが肺に特異的に存在していることが確かめられたので、これらのcDNA配列をもとにプライマーを合成し、肺のmRNAからPCR法によってプローブを作製した。今後、これらのプローブを用いて、臓器特異的mRNAの発現を証明し、その法医学的応用法について検討したい。

Specific の铓器でspecific synthesis of されるproteinのmRNAを検出することによって, the origin of the sample of forensic medicine is the identification of the instrument. First, the liver is broken, I am separated, the LSA is separate After the processing of the プチダーゼ, the acid composition of the そのペプチド fragments is determined. LSA's N-terminal 3', 5' end The のプライマーを is produced and the hepatic mRNA is synthesized by PCR method. The time is いで, このプローブを Use いて liver 蓓のcDNAライブラリーを検SO した. At the same time, anti-LSA anti-LSA anti-antibodies are used.その results, LSA の liver specificity は, コアprotein にpays with するsugar lock structure にあるものとtest えられた. From now on, it is necessary to determine the complete cDNA alignment of LSA and to understand the specificity of the sugar lock structure and device.さらに, lung specific に発appears されるprotein を検SOした results, lung surfactant-associated protein (A-D), clara cell 10kDa Protein is specific to the lungs List of をもとにプライマーを synthesis, lung のmRNA からPCR method によってプローブを production した. From now on, the use of これらのプローブ using いて, the discovery of organ-specific mRNA will be proven, and the usage of そのforensic medicine will be discussed and discussed.