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Wntシグナル制御による胚幹(ES)細胞からの造血幹細胞誘導の試み

尝试通过Wnt信号控制从胚胎干（ES）细胞诱导造血干细胞

基本信息

批准号：
14657246
负责人：
平尾敦
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657246/
关键词：
ES細胞 Wnt βカテニン造血幹細胞

项目摘要

Wnt/βカテニンのシグナルは、個体の発生及び分化に必須の重要な役割を担うことが示されてきた。本研究ではES細胞を用い、未分化性の維持機構におけるWnt/βカテニンの役割を明らかにする、さらに造血幹細胞の自己複製での役割を解明することを目的とした。本年度は、βカテニンのコンディショナルノックアウトES細胞を作製することを試みた。Targeting Vectorは、熊本大学、永渕昭良教授より供与された。このVectorは、マウスβカテニンのすべてのエクソンを取り除き、そのかわりにβカテニンcDNAが挿入できる。その後、Cre loxPを用いてcDNAを取り除き、その時点でES細胞において、ノックアウトされることになる。まず、ES細胞に電気穿孔法により導入し、現在、Hygromycin耐性クローンの中から、相同組み換え体を得た。現在、もう一方のアレルを相同組換えされたESを得ることを試みている。最近Wnt/βカテニンが、ES細胞の未分化性の維持に重要なことが明らかとなった。さらに、その下流でホメオボックス遺伝子Nanogが機能している。我々は、Nanogが、造血幹細胞に発現していることを明らかにした。このことは、造血幹細胞でも、ESと同様の機構で未分化性が保たれていることが示唆された。さらに、栄養除去時の細胞死に影響があることも明らかにした。

Wnt/β is a key component of growth and differentiation. The purpose of this study is to clarify the role of ES cells in the maintenance of undifferentiated Wnt/β cells and the role of hematopoietic stem cells in their own replication. This year, we will try our best to control the production of ES cells. Targeting Vector, Kumamoto University, Professor Akiyoshi Nagae The Vector contains the cDNA for the beta gene. Cre loxP is used to extract cDNA from ES cells at different times. In addition, ES cells were introduced by electroporation, and Hygromycin resistance was detected in the same group. Now, if you're going to lose your mind, you're going to lose your mind Recently, Wnt/β is important for the maintenance of undifferentiated ES cells. In the evening, the next step is to show the function of Nanog. The development of hematopoietic stem cells is a matter of concern. The stem cells are the same as the stem cells. When the sun rises, the sun rises and the sun rises.