Wntシグナル制御による胚幹(ES)細胞からの造血幹細胞誘導の試み
尝试通过Wnt信号控制从胚胎干(ES)细胞诱导造血干细胞
基本信息
- 批准号:14657246
- 负责人:
- 金额:$ 1.79万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
- 财政年份:2002
- 资助国家:日本
- 起止时间:2002 至 2003
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Wnt/βカテニンのシグナルは、個体の発生及び分化に必須の重要な役割を担うことが示されてきた。本研究ではES細胞を用い、未分化性の維持機構におけるWnt/βカテニンの役割を明らかにする、さらに造血幹細胞の自己複製での役割を解明することを目的とした。本年度は、βカテニンのコンディショナルノックアウトES細胞を作製することを試みた。Targeting Vectorは、熊本大学、永渕昭良教授より供与された。このVectorは、マウスβカテニンのすべてのエクソンを取り除き、そのかわりにβカテニンcDNAが挿入できる。その後、Cre loxPを用いてcDNAを取り除き、その時点でES細胞において、ノックアウトされることになる。まず、ES細胞に電気穿孔法により導入し、現在、Hygromycin耐性クローンの中から、相同組み換え体を得た。現在、もう一方のアレルを相同組換えされたESを得ることを試みている。最近Wnt/βカテニンが、ES細胞の未分化性の維持に重要なことが明らかとなった。さらに、その下流でホメオボックス遺伝子Nanogが機能している。我々は、Nanogが、造血幹細胞に発現していることを明らかにした。このことは、造血幹細胞でも、ESと同様の機構で未分化性が保たれていることが示唆された。さらに、栄養除去時の細胞死に影響があることも明らかにした。
Wnt/beta カ テ ニ ン の シ グ ナ ル は, individual の 発 raw and に び differentiation must be cut を bear important な の service う こ と が shown さ れ て き た. This study で は を い, ES cells undifferentiated sex の keep agency に お け る Wnt/beta カ テ ニ ン の "を cut Ming ら か に す る, さ ら に の himself is the haematopoietic stem cell で cut を の service interpret す る こ と を purpose と し た. This year は, beta カ テ ニ ン の コ ン デ ィ シ ョ ナ ル ノ ッ ク ア ウ ト す the ES cells を cropping る こ と を try み た. Targeting Vector 渕, Kumamoto University, Professor Akira nagae よ よ and された. こ の Vector は, マ ウ ス beta カ テ ニ ン の す べ て の エ ク ソ ン を り except き, そ の か わ り に beta カ テ ニ ン cDNA が scions into で き る. After そ の, Cre loxP を with い て cDNA を り except き, そ の point で ES cells に お い て, ノ ッ ク ア ウ ト さ れ る こ と に な る. ま ず に 気 perforation method, ES cells に よ り import し, now, Hygromycin patience ク ロ ー ン の in か ら change, the same group み え body を た. Now, も う side の ア レ ル を in same group え さ れ た ES を have る こ と を try み て い る. Recently, the <s:1> undifferentiation <e:1> of Wnt/βカテニ が が and ES cells has been maintained at に, which is important for な ら とが and ら となった. さ ら に, そ の obscene で ホ メ オ ボ ッ ク ス posthumous son 伝 Nanog が function し て い る. I 々 は, Nanog が, hematopoietic stem cells に 発 now し て い る こ と を Ming ら か に し た. こ の こ と は, hematopoietic stem cells で も, ES と with others の institutions で undifferentiated sex が bartender た れ て い る こ と が in stopping さ れ た. When さらに and 栄 are cultured, <s:1> cell death に affects がある に と and と clearly show ら らに and に た た.
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Keramaris E, Hirao A, Slack RS, Mak TW, Park DS: "ATM can regulate p53 and neuronal death independent of Chk2 in response to DNA damage"J Biol Chem. 278. 37782-37789 (2003)
Keramaris E、Hirao A、Slack RS、Mak TW、Park DS:“ATM 可以独立于 Chk2 来调节 p53 和神经元死亡,以响应 DNA 损伤”J Biol Chem。
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