血管新生阻害物質の作用メカニズムの検討

血管生成抑制剂的作用机制研究

• 批准号: 14657308
• 负责人: 松浦 成昭
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657308/
• 关键词: プロテアーゼインヒビター; セリン・プロテアーゼ; 血管新生; 転移; アポトーシス; ウリナスタチン; 癌の転移; アンチトロンビン; 細胞接着; MAPキナーゼ

腫瘍の増殖・進展において血管新生は不可欠な現象であり、近年これらに関与する種々の分子をターゲットとした血管新生阻害剤の研究が進められている。今年度は、serine_protease inhibitorの1つであるulinastatinの血管新生抑制効果について検討した。1)肺癌細胞A549またはEBC-1を注入したMillipore filter付きchamberをマウス背部皮下に植え込んだ。Ulinastatinを7日間皮下投与した群(U群)と非投与対照群(C群)に分け、7日後、chamberを周囲組織と共に摘出し、新生血管を実体顕微鏡にて観察、画像をコンピューターに取り込み血管長総和を計測した。その結果、A549の新生血管平均総長は、U群(993)はC群(1870)と比べて有意に減少し、EBC-1においても、U群(1051)はC群(2115)と比べて有意に減少した。2)EBC-1をマウス背部皮下に移植し、8日目よりPBS(P群)またはulinastatin(U群)を7日間連続皮下投与した。15日目に皮下腫瘍を摘出し、CD31の免疫染色及びTUNEL assayを行った。その結果、CD31陽性腫瘍内血管数は、U群(66.1)は、P群(107.6)に比べて有意に減少した。TUNEL assayによる腫瘍内アポトーシス陽性細胞数は、U群(11.10±4.19)はP群(4.25±3.17)と比べて有意に増加していた。3)A549をスキッドマウスの尾静脈から投与して、投与日から14日間PBS(P群)またはulinastatin(U群)を連続皮下投与した29日目にマウスをsacrificeし、転移を検索した。肺における転移巣の占める割合を算出したところ、P群(0.71)に比べてU群(0.49)は有意に低下が認められた。以上より、Ulinastatinは血管新生を抑制し、腫瘍におけるアポトーシスの亢進、転移巣の減少をおこした。

In recent years, the study of angiogenesis inhibition has been carried out. This year, serine_protein inhibitor 1 is detected in the angiogenesis inhibitory effect of ulinastatin. 1)Lung cancer cells A549 EBC-1 Millipore filter Ulinastatin 7 days subcutaneous injection group (U group) and non-injection group (C group) to separate, 7 days later, chamber tissue extraction, new blood vessels in vivo microscopical observation, imaging, blood vessel length and measurement The results showed that the average length of neovascularization in A549, U group (993) and C group (1870) was significantly lower than that in EBC-1, and U group (1051) and C group (2115) were significantly lower than that in EBC-1. 2)EBC-1 was subcutaneously transplanted into the back of the body on the 8th day, PBS(P group) and ulinastatin(U group) were subcutaneously injected on the 7th day. On the 15th, the subcutaneous tumor was extracted, CD31 immunostaining and TUNEL assay were performed. The results showed that the number of blood vessels in CD31 positive lesions was significantly lower than that in U group (66.1) and P group (107.6). The TUNEL assay showed that the number of positive cells in the tumor was significantly higher than that in the U group (11.10±4.19) and P group (4.25±3.17). 3)A549: The caudal vein is injected with PBS(P group) and ulinastatin(U group) on the 14th day. The subcutaneous injection is injected with PBS(P group) and ulinastatin on the 29th day. P group (0.71) is lower than U group (0.49). Ulinastatin inhibits angiogenesis, increases angiogenesis, and decreases angiogenesis.

项目成果

Kikkawa H, et al.: "Role of integrin aVb3 in the early phase of liver metastasis : PET and IV M analyses"Clin Exp Metast. 19・8. 717-725 (2002)

Kikkawa H等人：“整合素aVb3在肝转移早期的作用：PET和IV M分析”Clin Exp Metast 19・8（2002）。

Nakatsuji Y, et al.: "Epidermal growth factor enhances invasive activity of BeWo choriocarcinoma cells by inducing a2 integrin expression."Endocrine J. 50・6. 703-714 (2003)

Nakatsuji Y 等人：“表皮生长因子通过诱导 a2 整合素表达增强 BeWo 绒毛膜癌细胞的侵袭活性。”Endocrine J. 50・6 (2003)。

ADAM-binding protein Eve-1 is required for ectodomain shedding of EGF receptor ligands

ADAM 结合蛋白 Eve-1 是 EGF 受体配体胞外域脱落所必需的

• 发表时间: 2004
• 期刊: J.Biol.Chem. 279
• 作者: Tanaka;M.et al.
• 通讯作者: M.et al.

Ito Y, et al.: "Caveolin-1 overexpression is an early event in the progression of papillary carcinoma of the thyroid"Br J Cancer. 86・6. 912-916 (2002)

Ito Y 等人：“Caveolin-1 过度表达是甲状腺乳头状癌进展的早期事件”Br J Cancer 86·6 (2002)。

Hamada Y, et al.: "Angiogenic activity of osteopontin-deriverd peptide SVVYGLR."Biochem Biophys Res Commun. 310・1. 153-157 (2003)

Hamada Y等人：“骨桥蛋白衍生肽SVVYGLR的血管生成活性”。Biochem Biophys Res Commun. 310·1(2003)。